不同分离方法对骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响

背景：目前并没有特定的实验对骨髓间充质干细胞分离的两种基本方法进行系统评估，所以贴壁分离法和密度梯度离心法对细胞诱导分化是否存在不同影响，尚无定论。目的：拟验证两种基本分离方法对骨髓间充质干细胞成软骨分化影响的差别。设计、时间及地点：对照观察实验，2005—03／09在中国医科大学附属盛京医院儿外实验室完成。材料：2-3月龄体质量1．2-2．0kg的日本大耳兔20只用于抽取骨髓。方法：用贴壁分离法和密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞。选择两组同代的骨髓间充质于细胞，用转化生长因子β1诱导其向软骨方向分化。主要观察指标：①倒置显微镜观察骨髓间充质干细胞的生长情况，绘制两组细胞生长曲线。②免疫组化检测两组Ⅱ型胶原表达。⑧原位杂交检测两组细胞Ⅱ型胶原mRNA表达。结果：绘制生长曲线表明两组细胞生长速度趋于一致。免疫组化法检测两种方法分离的骨髓骨髓间充质干细胞的软骨细胞分化率为76．1％和77．7％，原位杂交法检测的软骨细胞分化率为70．3％和71．0％，差异无显著性意义。结论：两种分离方法对骨髓间充质干细胞的生长和成软骨分化结果的影响无差异。     

细菌胶原酶对瘢痕降解的实验研究及临床观察

目的探讨细菌胶原酶治疗增生性瘢痕及瘢痕疙瘩的作用机理;观测评价其临床疗效。方法通过动物实验对细菌胶原酶降解增生性瘢痕的作用进行验证,并通过10个病例对其临床疗效进行初步观察。结果动物实验显示,两次注药后,两周内瘢痕块体积平均缩小86%,较对照组差异有非常显著意义(P<0.001)。临床观察显示,经过两次病灶内细菌胶原酶的注射(剂量200～2000U),瘢痕体积两周内平均缩小46.92%,其中有4例缩小50%以上,占病例总数的30%。经过对5名病人3～16个月随访,除1例瘢痕疙瘩于治疗后第2个月复发外,余均无复发迹象。胶原酶作用后的瘢痕组织,光镜及电镜下可以清楚地看到处于溶解状态的胶原结构。结论细菌胶原酶可以直接降解瘢痕组织内的胶原纤维,可望成为一种快速有效的治疗增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的新方法。     

口服Ⅱ型胶原治疗大鼠佐剂性关节炎的研究

类风湿关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）是一种慢性炎症免疫性疾病，以多个关节的疼痛、肿胀和功能障碍为主要特征，并伴有免疫功能的障碍，靶细胞———滑膜细胞（主要为纤维母细胞）逐渐增生肥厚、病变关节发生渐进性破坏及变形，最终导致关节功能的丧失，严重影响患者的生活质量和健康。ＲＡ的病因和发病机制仍不甚清楚，也无理想的治疗方法。目前发现：口服Ⅱ型胶原（ｃｏｌｌａｇｅｎ，ＣⅡ）形成免疫耐受治疗ＲＡ有较好的应用前景。本文研究了ｉｇＣⅡ对大鼠佐剂性关节炎（Ａｄｊｕｖａｎｔａｒｔｈｒｉｔｉｓ，…     

测定糖尿病肾病患者血清Ⅳ型胶原的意义

非早期的糖尿病肾病的特征是肾小球系膜扩张，小结形成，肾小球基底膜增厚，伴随输入和输出小动脉透明变性以及间质的纤维化。Ⅳ型胶原是肾基底膜和肾小球膜基质的主要成份。本研究测定了糖尿病患者血清Ⅳ型胶原的水平与尿白蛋白程度，阐述在糖尿病肾病患者中测定血清Ⅳ型胶原的意义。一、资料与方法１．病例选择：根据１９８５年ＷＨＯ糖尿病诊断标准选定门诊及住院确诊的２型糖尿病人１０９例，男３７，女７２。根据尿中白蛋白排泄量将患者分为Ａ、Ｂ、Ｃ三组。Ａ组：正常蛋白尿组６１例（尿中白蛋白排泄量＜２０μｇ／ｍｉｎ），Ｂ组：微…     

白血病患者血清Ⅳ型胶原的测定

Ⅳ型胶原（ⅣＣ）是基底膜主要的糖蛋白成分，在上皮细胞和粘膜的生长、分化、以及癌细胞的浸润和转移中起重要作用［１］。我们对８７例白血病患者进行血清ⅣＣ测定，现报告如下。病例和方法１一般资料初治白血病患者８７例，男４８例，女３９例，年龄１４～７２岁，平均...     

脱细胞异体真皮与自体瘢痕薄皮复合移植后Ⅰ、Ⅲ型胶原表达与分布的实验研究

目的探讨脱细胞异体真皮与自体瘢痕薄皮复合移植修复瘢痕愈合创面的手术效果。方法荧光定量PCR对比移植前后Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达，应用免疫组化方法观察胶原蛋白的表达与分布。结果移植组织Ⅰ、Ⅲ胶原的mRNA表达与自体增生性瘢痕组织的mRNA表达有差异，胶原排列接近正常皮肤组织。结论脱细胞异体真皮与自体瘢痕薄皮复合移植修复继发瘢痕的创面，组织结构恢复良好，接近正常皮肤，是目前修复大面积深度烧伤患者功能部位创面，实现功能重建的有效方法。     

血清Ⅳ型胶原和透明质酸联合检测的诊断价值

目的通过对40例慢性肝炎、4D例肝硬化患者的血清透明质酸和Ⅳ型胶原的测定，探讨在肝病中联合柱测透明质酸和Ⅳ型胶原的诊断价值。方法采用放射免疫测定法测定了40例健康人，80例慢性肝炎及肝硬化患者的血清透明质酸(HA)及血清Ⅳ型胶原(Ⅳ·C)的水平。结果慢性肝炎及肝硬化患者两项指标增显著高于正常人(P<0．001)，肝硬化组明显高于慢性肝炎组(P<0．001)。结论血清透明质酸和Ⅳ型胶原联合连续动态检测有助于确定肝纤维的早期诊断。     

胶原海绵与兔软骨细胞体外三维培养的实验研究

目的 观察用人胎盘Ⅰ型胶原海绵作为兔软骨细胞体外三维培养支架时，软骨细胞形态学特征和功能及该支架的吸附性和组织相容性。方法 将新生兔原代和传代软骨细胞接种于人胎盘Ⅰ型胶原海绵进行体外培养，用光镜和扫描电镜观察细胞形态和结构及支架的吸附性和组织相容性，用免疫组化观察细胞Ⅱ型胶原合成。结果 以胶原海绵作为支架的传代软骨细胞能维持其形态学特征及细胞功能，该支架有较好的吸附性和组织相容性。结论 人胎盘Ⅰ型胶原海绵可作为软骨细胞体外三维培养较好的支架材料。