骨髓间质干细胞体外预构组织工程化肌腱的实验研究

目的探讨骨髓间质干细胞与胶原-聚羟基乙酸的细胞相容性,为构建组织工程化肌腱寻求理想方法.方法以贴壁法分离、培养骨髓间质干细胞,并检测CD44.在实验组中将骨髓间质干细胞置入含胶原-聚羟基乙酸的DMEM培基中培养:在对照组中将骨髓间质干细胞置入DMEM培基中培养.通过MTT方法比较两组的细胞活性和生长情况,并对实验组进行超微观察.以骨髓间质干细胞为种子细胞,以胶原-聚羟基乙酸为支架在体外预构组织工程化肌腱.结果以贴壁法原代培养骨髓间质干细胞,11天细胞即汇合成片,检测CD44示阳性.骨髓间质干细胞接种于胶原-聚羟基乙酸中混合培养后14天生长良好,始终保持89%以上的细胞活力,与对照组比较无显著差别;实验组细胞数未发生明显改变,而对照组从第4天开始即发生增殖.透射电镜示实验组细胞培养14天后仍保持旺盛的分泌功能.体外预构的组织工程化肌腱具有良好的形态,细胞伸展成梭形,沿聚羟基乙酸缝线大致平行排列.结论骨髓间质干细胞与胶原-聚羟基乙酸的细胞相容性好.以骨髓间质干细胞为种子细胞,以胶原-聚羟基乙酸为支架可在体外初步预构组织工程化肌腱.     

黄芪注射液对糖尿病肾病患者尿Ⅳ型胶原的影响及意义

目的 观察黄芪注射液对糖尿病肾病（DN）患者尿Ⅳ型胶原(CⅣ)探讨黄芪注射液治疗DN的机制。方法 分别测定黄芪注射液治疗组(30例)，对照组(28例)治疗前后尿CⅣ、24小时尿白蛋白排泄率(UAE)、α1-微球蛋白(α1-MG）。结果 黄芪注射液能明显降低DN患者尿CⅣ水平，减少DN患者UAE、α1—MC。结论 黄芪注射液对DN患者肾脏有保护作用，可能与其抑制DN患者CⅣ有关。     

Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因第2外显子核酶对靶RNA的体外切割活性的研究

目的 体外研究锤头型α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段核酶对各自靶RNA分子的切割活性及反应条件。同时观察两反义核酶对瘢痕中成纤维细胞胶原合成的影响。方法 将含α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段的重组质粒(pT-Ⅰ、pT-Ⅲ)，经体外^32P标记转录后形成产物靶RNA。同时将含特异性核酶基因的重组质粒(pT-gⅠ、pT-gⅢ)进行非标记的体外转录，产物(核酶)与各自的^32P-靶RNA按不同的条件混和反应，电泳后放射自显影观察结果。将构建好的核酶以脂质体包裹后导入培养的成纤维细胞内，采用图像分析法观察核酶对成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA合成的影响。结果 两种核酶在37℃、42℃均能有效切割各自的靶RNA，对Mg^2 浓度的要求范围较宽(10～20mmol／L)；反应温度从65℃逐渐降至并维持在37℃的条件下核酶切割活性显提高。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达明显降低，胶原蛋白生成降低，胶原生成明显受抑制。结论 针对α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段的核酶能有效地在体外对靶RNA进行切割并能有效地抑制瘢痕中成纤维细胞胶原的合成。     

隆乳术并发症的超声影像学诊断

目的 探讨隆乳术后并发症的二维超声和彩色多普勒超声的影像学表现及临床意义。方法 对21例隆乳术后并发症行7．0～11．0MHz的高频二维超声及彩色多普勒超声检测，全部检测所见均得到手术证实。结果 隆乳术后出现假体折叠、移位、包膜挛缩、硬化、硅胶囊破裂渗漏等，均有较特异的二维超声图像，其邻近组织有少量或较多的彩色血流信号和多普勒频谱表现。结论 超声影像学检查是隆乳术并发症的可靠检测手段，具有较高的临床诊断价值。     

氟对体外培养人牙乳头间充质细胞合成I型胶原的影响

目的:明确氟对人牙乳头细胞合成 I型胶原的影响。 方法:对人牙乳头细胞进行体外培养 ,分别给予0 .0、0 .2× 10 - 6、1.0× 10 - 6、5 .0× 10 - 6、2 5 .0× 10 - 6 g/ L 氟处理 ,采用免疫细胞化学方法染色 ,图象分析氟对细胞合成 I型胶原的影响。 结果:I型胶原在对照组和 4种氟浓度处理组细胞表达均为阳性。图象分析结果表明 ,4种氟浓度对体外培养的人牙乳头细胞合成 I型胶原量与对照组相比差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。结论:过量氟对牙本质基质 型胶原的影响可能不是通过影响成牙本质细胞内合成实现的     

预防儿童龋齿

对个别幼小的孩子，龋齿呈大面积剥脱状。无法制备洞型作修复时，可以暂时把龋齿组织去除，通过涂药的方法．使龋齿静止下来。但涂药的方法并不能恢复牙齿的缺损部分。     

小儿过敏性紫癜血瘀证与TNF-α、Ⅳ-C的相关性研究

目的：观察小儿过敏性紫癜（HSP）血瘀证的临床特征及其与肿瘤坏死因子α（TNF-α）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）的相关性。方法：采用问卷调查形式采集167例HSP[其中紫癜性肾炎（HSPN）94例]患儿血瘀证临床指标，采用计分法评定血瘀证积分；放射免疫法测定75例患儿TNF-d（血、尿）、Ⅳ型胶原（血、尿）等。结果：①167例病人中117例（70．06％）为血瘀证，非血瘀证者50例（29．94％）；②出现频率在10％以上的症状依次为皮肤紫癜（73．65％）、血尿（35．93％）、腹部、关节疼痛或疼痛拒按（27．54％）、舌质紫暗（37．13％）和／或舌体瘀斑瘀点（13．17％）、舌下静脉曲张（26．95％）、面色不泽（20．96％）、鼻衄（15．57％），皮肤粗糙（14．37％）。③血瘀证组中PT、FIB、D-dinaer、血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、24小时尿蛋白定量和尿微量白蛋白与非血瘀证组对比差别有统计学意义（P〈0．05）；④血瘀证组血、尿TNF-α及尿Ⅳ-C水平明显高于非血瘀组（P〈0．05）；⑤血、尿TNF-α水平与FIB正相关（P〈0．05，P〈0．01）。⑥血TNF-α与D-dimer正相关，尿Ⅳ-C与尿TNF-α水平正相关（P〈0．01）。结论：HSP、HSPN血瘀证出现频率较高。其临床症状、体征除皮肤紫癜、腹痛和／或关节痛、尿血外，以望诊内容舌象、面色、皮肤粗糙为主；炎症因子TNF-α与血瘀证的形成密切相关，尿Ⅳ-C水平与尿TNF-α水平正相关。尿Ⅳ-C水平与血瘀证相关。检测尿TNF-α、Ⅳ-C对HSPN血瘀证中医辨证的客观化有一定的参考意义。     

肝星状细胞活化与肝纤维化分期和血清学指标的关系

目的 :了解肝星状细胞 (HSC)活化与肝维纤化分期的关系 ,初步探讨肝组织中HSC活化强度的临床意义。方法 :对 5 6例慢性乙型肝炎患者肝穿组织进行纤维化分期 ,采用EnVision免疫组织化学法检测肝组织中α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达水平 ,放射免疫分析测定血清透明质酸 (HA)、层粘连蛋白 (LN)和IV型胶原 (IV C)含量。结果 :α SMA的表达与纤维化分期为正相关 (r =0 41,P <0 0 1)。α SMA表达的不同强度间患者血清HA、LN及IV C水平差异均无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 :HSC活化强度可用于反映肝纤维化的强度 ,而与血清HA、LN及IV C的含量无对应关系     

人眼直肌Pulley系统胶原成分的实验研究

目的 研究人眼直肌Pulley系统胶原的组成成分及分布特点.方法 选取5个新鲜尸体眼眶,整体固定包埋,进行全眼眶连续冠状切片(4μm).相邻层面经苦味酸-天狼星红染色后,在偏振光显微镜下观察4条直肌Pulley及Pulley连接带(Pulley band,PB)的胶原组成及分布特点,并用MIAS-2000显微图像分析系统定量分析.结果 偏振光显微镜下可见4条直肌Pulley及PB中含有大量黄红色的I型胶原纤维及少量绿色的Ⅲ型胶原纤维.经图像分析,内直肌组Pulley中Ⅰ型胶原含量最高,内直肌-下直肌组PBⅢ型胶原含量最高,明显高于其他组,各组间差别有显著性(P＜0.05).结论 与力学特性密切相关的Ⅰ型胶原纤维及Ⅲ型胶原纤维作为眼直肌Pulley及PB胶原的主要组织成分,对眼球在功能眼位维持双眼视功能意义重大.