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61.
Combined gene therapy of endostatin and interleukin 12 with polyvinylpyrrolidone induces a potent antitumor effect on hepatoma 总被引:1,自引:0,他引:1
Li PY Lin JS Feng ZH He YF Zhou HJ Ma X Cai XK Tian DA 《World journal of gastroenterology : WJG》2004,10(15):2195-2200
AIM: To study the antitumor effect of combined gene therapy of endostatin and interleukin 12 (IL-12) with polyvinylpyrrolidone (PVP) on mouse transplanted hepatoma. METHODS: Mouse endostatin eukaryotic plasmid (pSecES) with a mouse Igkappa signal sequence inside and mouse IL-12 eukaryotic plasmid (pmIL-12) were transfected into BHK-21 cells respectively. Endostatin and IL-12 were assayed by ELISA from the supernant and used to culture endothelial cells and spleen lymphocytes individually. Proliferation of the latter was evaluated by MTT. H22 cells were inoculated into the leg muscle of mouse, which was injected intratumorally with pSecES/PVP, pmIL-12/PVP or pSecES+pmIL-12/PVP repeatedly. Tumor weight, serum endostatin and serum IL-12 were assayed. Tumor infiltrating lymphocytes, tumor microvessel density and apoptosis of tumor cells were also displayed by HE staining, CD31 staining and TUNEL. RESULTS: Endostatin and IL-12 were secreted after transfection, which could inhibit the proliferation of endothelial cells or promote the proliferation of spleen lymphocytes. Tumor growth was highly inhibited by 91.8% after injection of pSecES+pmIL-12/PVP accompanied by higher serum endostatin and IL-12, more infiltrating lymphocytes, fewer tumor vessels and more apoptosis cells compared with injection of pSecES/PVP, pmIL-12/PVP or vector/PVP. CONCLUSION: Mouse endostatin gene and IL-12 gene can be expressed after intratumoral injection with PVP. Angiogenesis of hepatoma can be inhibited synergisticly, lymphocytes can be activated to infiltrate, and tumor cells are induced to apoptosis. Hepatoma can be highly inhibited or eradiated. 相似文献
62.
目的 用响应面法对马来酰亚胺活化相对分子质量40 000的聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)(MAL-PEG40K)修饰胰高血糖素样肽1类似物(glucagon-like peptide-1 analog,GLP-1a)的反应条件进行优化。方法 对GLP-1a浓度、GLP-1a/MAL-PEG40K摩尔比、反应液pH值、反应温度、反应时长进行单因素试验。以前3个条件为自变量, PEG修饰率为响应值,根据中心组合试验设计原理,研究各自变量及其交互作用对PEG修饰率的影响。通过高效液相色谱法分析PEG修饰率,依据回归分析确定各反应条件的最优值。 结果 GLP-1a与MAL-PEG40K的最佳反应条件为:GLP-1a浓度2.5 mg/ml,GLP-1a/MAL-PEG40K摩尔比1∶1.25,反应液pH 8,反应温度4 ℃,反应时长60 min。该优化条件下,GLP-1a的PEG修饰率可达91.0%。结论 响应面法获得了GLP-1a与MAL-PEG40K的最佳反应条件。 相似文献
63.
目的探讨基因1b型慢性丙型肝炎患者NS5A区基因变异与聚乙二醇干扰素α-2a(PEG—IFNα-2a)联合利巴韦林(RBV)抗病毒治疗疗效的关系。方法回顾性选择15例应用PEG—IFNα-2a/RBV抗病毒治疗的基因1b型慢性丙型肝炎患者,其中7例为快速应答(RVR),8例为无应答(NR),应用RT—PCR法扩增NS5A全长片段,用克隆测序方法进行核苷酸和氨基酸序列测定。结果没有发现与治疗应答相关的单个氨基酸或基序变异,RVR组和NR组在NS5A、ISDR、PKRBD和IRRDR区的氨基酸突变数目差别均无统计学意义,RVR组在V3区(aa2356~2379)的氨基酸突变数目高于NR组(分别为5.3±0.5和3.4±0.6,P=0.03)。结论V3区的氨基酸突变数目与PEG—IFNα-2a联合RBV抗病毒疗效可能相关。 相似文献
64.
目的 :探讨非病毒载体Gen Escort TM II介导质粒骨形态发生蛋白2(p BMP-2)转染对MC3T3-E1细胞增殖和体外成骨分化的影响。方法:以非病毒载体Gen Escort TM II介导报告基因质粒增强型绿色荧光蛋白(p EGFP)转染MC3T3-E1细胞,优化转染条件,荧光显微镜和流式细胞仪评价转染效率。p BMP-2转染MC3T3-E1细胞后,MTT法检测细胞增殖情况,染色法检测碱性磷酸酶(ALP)和茜素红S(ARS)的表达,Real-time PCR分析成骨细胞标志基因ALP、骨涎蛋白(BSP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的表达。结果 :Gen Escort TM II介导p EGFP转染MC3T3-E1细胞后,转染效率达35.02±4.42,MTT结果示基因转染对细胞增殖无影响(P>0.05)。p BMP-2转染组的ALP、ARS表达较p EGFP转染组和未转染组显著,同时Real-time PCR检测结果示,转染后6 d,p EGFP转染组和未转染组相比,p BMP-2转染组的成骨基因ALP、BSP、Runx2、OCN、OPN的表达量差异有显著性意义(P<0.05)。结论:非病毒载体Gen Escort TM II介导BMP-2转染MC3T3-E1细胞可诱导其向成骨方向分化。 相似文献
65.
目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对超高分子聚乙烯(UHMWPE)引起的鼠成骨细胞RANKL代谢的影响。方法:将体外培养的鼠颅骨成骨细胞在UHMWPE微粒预处理后,加入外源性不同浓度的CGRP孵育48 h,提取各组细胞m RNA、蛋白,通过实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和western blot来观察成骨细胞OPG和RANKL m RNA、蛋白表达水平的变化。结果:微粒明显刺激了RANKL的表达,降低了OPG的表达;CGRP显著抑制了鼠成骨细胞RANKL的表达。结论:CGRP抑制微粒介导的骨质溶解作用是可能是通过下调RANKL的表达实现的。 相似文献
66.
67.
目的 探讨聚乙烯亚胺修饰的荧光素钠(PEI-NHAc-FS)纳米颗粒(nanoparticles,NPs)在荧光素眼底血管造影术的应用和安全性。方法 选取90只健康棕色雄性挪威大鼠作为实验动物。将1 mL 荧光素钠(200 g·L-1)加入10 mol的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)混合物中搅拌30 min,再加入10 mol的N-羟基琥珀酰亚胺搅拌3 h。然后将该溶液加入到5 mL聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)(76 g·L-1)中,剧烈搅拌3 d获得PEI-NH2-FS。将2 mL三乙胺加入到PEI-NH2-FS原液中,30 min后再将1 mL的乙酸酐加入混合物中搅拌24 h,合成PEI-NHAc-FS。使用核磁共振波谱仪和紫外可见光吸收光谱观察PEI-NHAc-FS的结构,并对合成的NPs结构进行表征;CCK-8检测其细胞毒性。选取30只大鼠,根据荧光素钠和PEI-NHAc-FS NPs的浓度(5 g·L-1、10 g·L-1、50 g·L-1)将大鼠分为6组,每组5只,分别于注射前及注射后5 min、20 min、30 min和60 min进行眼底摄像,采集大鼠眼底血管荧光素图像。用激光诱导大鼠脉络膜新生血管模型后,取10只大鼠,随机分为10 g·L-1荧光素钠组和PEI-NHAc-FS NPs组,每组5只,分别于注射前及注射后5 min、20 min、30 min和60 min通过眼底血管造影成像观察病灶处渗漏。另取40只大鼠,随机分为10 g·L-1荧光素钠组和PEI-NHAc-FS NPs组,每组20只,于注射后10 min、20 min、30 min和60 min进行荧光冰冻切片。将10只大鼠随机分为对照组(注射生理盐水)和PEI-NHAc-FS NPs组,每组5只,行组织切片HE染色和视网膜电图检测。采用HE染色和视网膜电图观察PEI-NHAc-FS NPs在体内的生物安全性。结果 通过核磁共振和紫外可见光吸收光谱观察到荧光素钠与PEI成功耦合。发射荧光光谱显示,游离荧光素钠和PEI-NHAc-FS NPs的最大发射波长分别出现在546 nm和544 nm处。CCK-8检测结果表明,不同浓度的荧光素钠和PEI-NHAc-FS NPs处理人脐静脉内皮细胞12 h、24 h后,细胞活性差异无统计学意义(P>0.05)。即使用10 μmol·L-1 PEI-NHAc-FS NPs处理24 h和未处理之间细胞存活率差异亦无统计学意义(P>0.05)。在5 g·L-1游离荧光素钠组和PEI-NHAc-FS NPs组中,均仅显影视网膜主要血管,不能用于荧光素眼底血管造影的诊断。而在10 g·L-1游离荧光素钠组和PEI-NHAc-FS NPs组可清晰地显示视网膜主要血管及微血管的结构,且在注射后30 min时血管荧光强度基本相同。PEI-NHAc-FS NPs组在60 min时荧光强度已基本消失,而游离荧光素钠组仍保持较强的荧光强度。10 g·L-1游离荧光素钠组和PEI-NHAc-FS NPs组荧光素眼底血管造影结果显示,经尾静脉注射造影剂后,视网膜血管内可见荧光成像;同时病灶部位可见荧光渗漏。游离荧光素钠组在视网膜组织中荧光较强,对视网膜组织有较强的吸附和渗透作用,而PEI-NHAc-FS NPs组在视网膜组织中荧光较弱,对视网膜组织吸附较弱。HE染色和视网膜电图对造影剂进行体内生物安全性分析结果显示,PEI-NHAc-FS NPs安全性较好。结论 PEI-NHAc-FS NPs能够安全、有效地用于荧光素眼底血管造影。 相似文献
68.
目的探讨采用标准型股骨髁、胫骨托与高切迹胫骨聚乙烯垫组合全膝关节置换术(TKA)治疗严重膝关节骨性关节炎并膝内、外翻畸形的临床疗效。方法采用标准型股骨髁、胫骨托与高切迹胫骨聚乙烯垫组合TKA治疗20例(25膝)严重膝关节骨性关节炎并膝内、外翻畸形,其中2例保留后交叉韧带,18例不保留后交叉韧带。结果本组20例术后获得平均12(5~60)个月随访。术前膝关节活动范围15°~85°,术后0°~130°。膝内、外翻畸形得到矫正。术前KSS评分(11.50±1.61)分,术后(91.35±1.23)分。结论采用标准型股骨髁、胫骨托与高切迹胫骨聚乙烯垫组合TKA治疗严重膝关节骨性关节炎并膝内、外翻畸形术中通过软组织平衡技术的应用,操作方便,假体稳定性及关节活动度好。早期临床疗效满意,远期疗效有待进一步随访观察。 相似文献
69.
乙型和丙型病毒性肝炎是世界上引起慢性肝病、肝硬化及其严重并发症的首要原因。可导致显著的致残率、致死率并消耗巨额医疗费用。而目前临床上用于治疗HBV及HCV的方法仍有较多不足之处,如用多聚乙烯二醇结合的干扰素β(PEG-IFN—β)及利巴韦林联合用药治疗HCV感染,对不同的HCV基因型获得的持续病毒降低率仅为30%~60%,而约有25%~40%的患者对抗HCV治疗无反应;还有许多患者因抗病毒治疗产生的一系列严重不良反应(如流感样症状,贫血等)而不得不中止治疗。 相似文献
70.
《中国矫形外科杂志》2014,(16):1471-1475
[目的]超高分子量聚乙烯是目前人工关节载荷元件胫骨平台垫片和髋臼内衬的首选材料,然而其磨损不可避免,磨损碎屑继发假体周围骨溶解,严重影响假体使用寿命。本文简要介绍了超高分子量聚乙烯独特的摩擦磨损机制和残留自由基氧化对其耐磨性的影响,最后阐述其研发现状和方向。高交联聚乙烯可以显著降低人工关节假体的体内磨损率,目前得到了最广泛的临床应用。而复合维生素E的高交联聚乙烯也可明显提高材料抗氧化性和耐磨性,近期随访证明了其安全有效,但仍有待大样本量长期的临床疗效观察。 相似文献