精子与肿瘤细胞融合模型的建立

目的：构建一种稳定的精子与肿瘤细胞融合体系,为精子与肿瘤细胞融合研究提供生物模型。方法：采用体外共培养的方式进行精子与HeLa细胞等多种肿瘤细胞的融合实验;采用共聚焦显微镜三维重建成像的方法对精子与肿瘤细胞融合现象进行确证;采用嵌套式培养体系作为融合实验的对照研究;采用自主合成的精子与肿瘤细胞共培养基（STCM）对精子与肿瘤细胞融合模型进行优化。结果：精子与肿瘤细胞在体外可以发生融合,融合事件多发生于共培养后的1.5~2 h,精子与肿瘤细胞融合形成的嵌合型肿瘤细胞呈明显的球形改变,其贴附能力明显下降,通常漂浮于培养中。与RPMI 1640培养基相比较,STCM能够在不影响肿瘤细胞生长的情况下,显著提高精子与肿瘤细胞的融合率（P < 0.05）,并且能够加速精子与肿瘤细胞地融合。结论：采用体外共培养的方法,我们建立了精子与肿瘤细胞融合的生物模型。     

人树突状细胞与K562细胞的融合以及体外诱导p210蛋白特异性CTL的研究

目的：探讨人外周血单细胞来源的树突状细胞（Ｄdndritic cells,ＤＣ）与人白血病细胞 Ｋ５６２融合后,能否诱导同p２１０蛋白特异性的ＣＴＬ,为ＤＣ疫苗的临床应用提供理 论基础。方法：外周血来源的巾附单核细胞,在人ＧＭ－ＣＳＦ（１０００Ｕ/ml）作用下,培养５～７天后,与人白血病细胞Ｋ５６２进行融合,融合细胞再与自体的淋巴细胞共同孵育１０～１４天,采用乳酸脱氢酶释放试验分析其对p２１０蛋白阳性细胞的杀伤效果。     

EPO单克隆抗体的制备

目的：制备EPO单克隆抗体,为高原红细胞增多症的治疗研究提供材料。方法：用细胞融合技术制备能稳定分泌EPO单克隆抗体的细胞株,对该细胞株扩增培养,注射入BALB小鼠腹腔内,（7～10）天后搜集腹水并进行腹水抗体效价测定,提纯,浓缩,进行抗体浓度测定。结果：得到一株能稳定分泌EPO单克隆抗体的细胞株,并制备出高效价的EPO单克隆抗体。结论：该EPO单克隆抗体的制备成功为高原红细胞增多症的治疗的基础研究提供了原料。     

SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白特异性单克隆抗体(McAb)，为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料。方法 用纯化的重组SARS-CoVN蛋白免疫BALB/c小鼠，经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株，用Western blot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性，并将N蛋白分3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。结果 通过细胞融合和3轮克隆化，筛选出分泌抗N蛋白的6个杂交瘤细胞株。Western blot及免疫荧光显示，获得的McAb可与SARS-CoVN蛋白及SARS-CoV发生特异性反应，有4个细胞株分泌的抗体的识别位点位于N蛋白N端，2个位于C端。结论 获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体并进行了初步定位，可用于SARS的早期诊断及致病机制研究。     

分泌抗兔ⅧR:Ag单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

先从兔血浆中纯化ⅧR:Ag,然后用纯化的抗原免疫BALB/C小鼠。用免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP_2/O融合。采用ELISA法检测上清液中抗体滴度,得到了一株稳定分泌抗兔ⅧR:Ag单克隆抗体的杂交瘤细胞株。     

晶体上皮细胞单克隆抗体的动物实验研究──第二部分 晶体上皮细胞膜单克隆抗体的制备

通过将免疫小鼠的脾细胞与HGPRT缺陷的NS－1骨髓瘤细胞进行细胞融合，并经HAT培养液对融合的杂交瘤细胞进行选择培养，再经二次限界稀释法对此杂交瘤细胞进行克隆化。采用无血清细胞培养技术，得到较高浓度而且较纯化的抗家兔晶体上皮细胞膜单克隆抗体。为进一步研究晶体上皮细胞的特性，以及利用免疫学方法抑制白内障术后晶体上皮细胞增殖奠定了基础。     

rHuIFN-γ促进大肠癌放射免疫显像的实验研究

结肠癌是最常见恶生肿瘤之一，对人类健康、生命威胁很大，早期诊断十分重要。自1975年Kolher等创立了杂交瘤细胞融合技术后，免疫显像领域研究得到了长足进展。由于肿瘤病理类型多种多样，肿瘤相关抗原（TAA）种类繁多，有些TAA认为低表达型级显像带来困难。为此，有的作者用IFN-γ促进TAA表达，以达到满意的免疫显像效果。     

EHF患者血清肌酐、尿素氮与尿中细胞融合指数的相关性

为探讨流行性出血热（ＥＨＦ）患者肾脏损害与其尿液中融合细胞的融合指数（ＦＩ）之间的关系，检测了１６０例ＥＨＦ患者尿液融合细胞的ＦＩ值与血清中肌酐（Ｃｒ）、尿素氮（Ｂｕｎ）的水平，并将尿液融合细胞的ＦＩ值和相应患者血中Ｃｒ、Ｂｕｎ峰值进行相关性分析。结果表明，患者尿液融合细胞的ＦＩ值与血清Ｃｒ、Ｂｕｎ峰值呈直线正相关关系（ｒ＝０．８４８８，０．８７８１）。提示根据尿液融合细胞的融合程度可以判断患者肾脏损害的程度。     

电磁场细胞融合器的研制

细胞融合,形成杂交细胞是细胞工程的一项基本操作。本文介绍了磁细胞融合器的工作原理和结构。该融合器的工作原理系利用交变的电磁场来达到细胞融合的目的。当样品置于电磁场中时,可通过改变交变电磁场的强度,使之达到完全融合。电磁场融合比病毒融合、化学融合具有更好的可控性。