人参皂甙Rb1对体外软骨细胞代谢的影响

为探讨人参皂甙Rb1对体外软骨细胞增殖、SOD活性及Ⅱ型胶原表达的影响,在成功分离、培养出兔软骨细胞后,以MTT法检测软骨细胞活性并绘制其生长曲线图,以不同浓度的Rb1作用于H2O2诱导后的软骨细胞,检测培养液中SOD的活性及Ⅱ型胶原含量.结果显示浓度为1×102μmol*L-1的Rb1在第3～5天使细胞增殖加速;同样浓度的Rb1还可对抗H2O2降低SOD活性及降解Ⅱ型胶原.表明人参皂甙Rb1具有促进兔软骨细胞增殖、增强SOD活性、维持Ⅱ型胶原表达的作用.     

阿米洛利对肝星状细胞增殖及分泌细胞外基质的影响

阿米洛利(amilofide)为Na /H 交换泵(NHE)阻滞剂,是一种临床常用的保钾利尿药,近年来发现NHE与细胞的增殖、分化和凋亡密切相关.本实验应用HSC-T6细胞系,观察阿米洛利对HSC增殖及细胞外基质分泌的影响,以探索临床抗肝纤维化的新途径.     

保和消积方体外对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其机制研究

目的：探讨保和消积方对胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响,在mRNA和蛋白水平上阐明其分子机制。方法：选取对数生长期的胃癌SGC7901细胞作为研究对象,分为空白对照组和不同浓度（0.5、1、2、4、8、12和16 mg/mL）组,采用噻唑蓝（MTT）法检测不同时间（24、48、72 h）SGC7901细胞增殖情况;采用Transwell小室迁移试验检测SGC7901细胞的迁移能力;利用流式细胞仪检测SGC7901细胞凋亡情况;定量PCR和蛋白质免疫印迹法分别检测胃癌SGC7901细胞增殖、迁移、血管生成相关的磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA和蛋白表达水平。结果：与空白对照组比较,作用不同时间后不同浓度的保和消积方组的胃癌SGC7901细胞增殖抑制率显著增加（均P<0.05）,穿膜细胞数显著降低（均P<0.05）,显著抑制了微管的形成（均P<0.05）,AKT、mTOR、PI3K、VEGF mRNA和蛋白表达水平显著降低（均P<0.05）。结论：保和消积方通过抑制AKT、mTOR、PI3K、VEGF的mRNA和蛋白表达,从而抑制了SGC7901胃癌细胞增殖、迁移,促进了胃癌细胞的凋亡。     

红景天苷抗非小细胞肺癌作用机制研究进展

肺癌是最常见的呼吸道恶性肿瘤之一,居全球癌症死亡原因首位,其主要病理类型为非小细胞肺癌。由于非小细胞肺癌早期症状不典型,大多数患者确诊时已处于癌症中晚期,失去了手术机会且对放化疗不敏感,生存率较低。中药红景天具有益气活血、通脉平喘的功效,广泛应用于神经系统疾病、心血管疾病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病的治疗。红景天苷是红景天的主要抗肿瘤成分,研究表明其可通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞转移、改善免疫功能等多种途径发挥抗肿瘤作用,说明其在抗非小细胞肺癌方面有巨大潜力,推测其治疗非小细胞肺癌具有良好的前景。下一步应深入探索红景天苷药理毒理性质、安全用量、毒副反应等,为红景天苷的进一步开发利用提供参考。     

葛根素对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探讨葛根素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法:用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,葛根素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况;用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶的活性,用改良的Lowry法测蛋白含量。结果:葛根素在1×10-4mol/L~1×10-8mol/L浓度范围内24h,48h促进成骨细胞增殖,在1×10-6mol/L~1×10-8mol/L范围内48h及1×10-8mol/L72h提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。结论:葛根素体外能促进成骨细胞的增殖与分化。     

姜黄素抑制人胃癌BGC-823细胞生长并诱导其凋亡的机制研究

目的:探讨姜黄素抑制人胃癌BGC-823细胞生长并促人胃癌BGC-823细胞凋亡的生物学作用及其调控机制。方法:常规体外培养对数生长期胃癌BGC-823细胞,细胞分为对照组,低、中、高姜黄素处理组四组,姜黄素浓度分别为0mg/L5,mg/L1,0mg/L,20mg/L。姜黄素处理24h后,采用甲基噻唑(MTT)比色法及流式细胞仪测定细胞增殖水平及细胞凋亡率;采用免疫组化法测定细胞内Bax、Bcl-2蛋白表达;采用PCR检测Caspase-3的mRNA表达水平。结果:MTT检测显示姜黄素能抑制人胃癌BGC-823细胞増殖,呈现浓度依赖性;流式细胞仪显示姜黄素能有效诱导细胞的凋亡,呈现浓度依赖性,其中20mg/L姜黄素处理24h后细胞凋亡率为48.3%;免疫组化试验表明姜黄素处理使人胃癌BGC-823细胞中Bax表达水平上调,同时Bcl-2蛋白表达水平下调;且细胞中Caspase-3的mRNA表达水平受姜黄素诱导而增高。结论:姜黄素对人胃癌BGC-823细胞的增殖具有明显抑制作用,呈浓度依赖性促进细胞凋亡,这种生物学效应可能与激活Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达而活化Caspase-3的信号通路有关。该研究为深入探讨姜黄素诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的机制提供了重要依据。     

蒿秦化斑方对紫外线B诱导的HaCaT细胞光损伤的影响

目的 观察蒿秦化斑方对紫外线B(ultraviolet-B,UVB)诱导的HaCaT细胞光损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法 建立300 m J/cm2UVB辐射损伤HaCaT细胞的病理模型,使用蒿秦化斑方干预,实验分为空白对照组、UVB模型组及蒿秦化斑方高、中、低剂量组。使用MTT法测定蒿秦化斑方的安全性及HaCaT细胞的增殖;吸光度法测定HaCaT细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量; ELISA法检测HaCaT细胞细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)、血管细胞间黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)、内皮细胞选择素(endothelium-selectin,E-selectin)、白细胞介素-10 (interleukin-10,IL-10)、转化生长因子β(transforming growth facor-β,TGF-β)的含量。结果 与空白对照组比较,UVB模型组细胞增殖能力降低(P0.05),与UVB模型组比较,蒿秦化斑方高、中、低剂量组细胞增殖能力均增强(P0.05);与空白对照组比较,UVB模型组SOD、CAT活性降低(P0.05),MDA含量增加(P0.05);与UVB模型组比较,蒿秦化斑方高剂量组SOD、CAT的活性增强(P0.05),MDA的含量降低(P0.05)。与空白对照组比较,UVB模型组ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、IL-10含量均增加(P0.05),TGF-β含量表达降低(P0.05);与UVB模型组比较,蒿秦化斑方高剂量组ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、IL-10的含量均降低(P0.05),TGF-β含量升高(P0.05)。结论 高剂量蒿秦化斑方能够通过增强抗氧化酶SOD、CAT的活性及减少脂质过氧化物MDA的产生抑制UVB诱导的HaCaT细胞氧化损伤,通过降低HaCaT细胞中炎症相关因子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、IL-10的表达抑制UVB诱导的HaCaT细胞炎症反应,通过细胞增殖和上调TGF-β的表达修复HaCaT细胞屏障功能,从而对UVB诱导的HaCaT细胞光损伤起到保护作用。     

人参皂苷Rc、Rd、Re对神经胶质瘤细胞增殖作用的影响

目的探究人参皂苷Rc、Rd、Re对神经胶质瘤细胞增殖作用的影响。方法采用CCK-8法分别测定不同浓度人参皂苷Rc、Rd和Re作用SHG-44和U251MG细胞24、48、72 h后对细胞增殖的影响,计算细胞增殖的抑制率。结果人参皂苷Rc(1~100μg/mL)对SHG-44细胞抑制增殖作用较弱,人参皂苷Rc(12.5~200μg/mL)对U251MG细胞抑制增殖作用也较弱;人参皂苷Rd(100μg/mL)处理SHG-44细胞72 h后,细胞增殖抑制率可达(97.28±0.94)%;人参皂苷Rd(200μg/mL)对处理U251MG细胞24、48、72 h后,细胞增殖抑制率分别为(94.51±1.86)%、(93.86±0.40)%、(95.32±0.68)%;人参皂苷Re(200.00μg/mL)作用U251MG细胞72 h后,细胞增殖抑制率为(51.96±2.36)%。结论人参皂苷Rd具有抑制人神经胶质瘤SHG-44和U251MG细胞增殖作用,起到显著的抗肿瘤作用。     

枳术丸水煎液及其拆方含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨枳术丸水煎液及其拆方对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖和凋亡的影响及其分子机制,并从细胞分子层面分析中医攻补兼施法治疗慢传输型便秘可能的机制。方法:将40只大鼠随机分成白术组、枳实组、枳术丸组、空白血清组,每组10只。白术组灌以17.7 g·kg-1·d-1白术水煎液,枳实组灌以8.9 g·kg-1·d-1枳实水煎液,枳术丸组灌以26.4 g·kg-1·d-1枳术丸水煎液,空白血清组灌以无菌蒸馏水3 mL,每日1次,连续7 d,取血制备含药血清和空白血清。将4组含药血清分别配成5%,10%,15%,20%4个体积分数,干预24 h,观察ICC的数量、形态,用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测各组细胞增殖情况,测定各组最佳干预体积分数。将大鼠结肠ICC细胞分为正常组、空白血清组、白术组、枳实组、枳术丸组,5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测各组ICC的增殖情况,流式细胞仪检测各组ICC的凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组ICC中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP),增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,空白血清组、白术组、枳实组最佳干预体积分数均为10%,枳术丸组最佳干预体积分数为5%。与正常组比较,所有实验中空白血清组对ICC增殖和凋亡的影响没有明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC增殖率有显著差异(P0.05,P0.01),与白术组和枳实组比较,枳术丸组对ICC增殖率明显增加(P0.05,P0.01);与枳实组比较,白术组对ICC增殖率变化不明显。与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC的凋亡率无明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组内的XIAP,PCNA蛋白水平均明显上调(P0.05,P0.01),三组间比较差异不明显。结论:枳术丸、枳实、白术在一定浓度下均能通过增加XIAP,PCNA蛋白表达促进ICC的增殖,且对ICC的凋亡无明显影响;以攻补兼施法立法的方剂枳术丸能促进ICC的增殖,并且其增殖效果优于攻伐单药枳实和补益单药白术。     

中药对血管平滑肌细胞增殖抑制的研究进展（续完）

2　中药复方的实验研究2 .1　血府逐瘀汤　张群豪[16] 等采用两种离体实验方法对比观察血府逐瘀浓缩丸对实验性动脉粥样硬化家兔主动脉血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)增殖的影响。第一种给家兔灌服血府逐瘀浓缩丸后 ,取其血清加至细胞培养基中进行实验即血清药理学方法 ;第二种直接加血府逐瘀煎剂浓缩液至细胞培养基中。结果发现含血府逐瘀浓缩丸血清和血府逐瘀煎剂浓缩液均对ＳＭＣ增殖有抑制作用 ,且后者作用强于前者 ,并呈剂量依赖性。李静等[17] 采用斑点印迹杂交和原位杂交技术 ,研究了血管通对与血管平滑肌细胞增生相关基因表达的影响。发…