胰岛素样生长因子1对PC12细胞胱硫醚-β-合成酶和硫化氢的影响及机制

\[摘要\]目的观察胰岛素样生长因子1(IGF-1)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)胱硫醚-β-合成酶(CBS)及硫化氢(H2S)表达的影响以及可能的细胞信号通路机制。方法用不同剂量IGF-1(20、 40、80 ng/ml)作用体外培养的PC12细胞24 h,荧光定量PCR检测CBS基因表达,蛋白质印迹分析检测CBS、细胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)相关蛋白表达,敏感硫电极法检测H2S气体含量。之后选取最佳剂量的IGF-1(80 ng/ml) 作用于30 min前已加入ERK/MAPK抑制剂PD98059的PC12细胞再次检测CBS、ERK/MAPK相关蛋白及H2S气体表达水平。结果IGF-1增加CBS的表达和H2S的含量,上调pERK1/2的表达;而PD98059能够抑制IGF-1的上述作用。结论IGF-1及其调控的ERK/MAPK信号通路参与调节CBS及H2S的表达。     

内耳缺血豚鼠模型内源性硫化氢检测及意义

目的:观察内耳缺血豚鼠模型血清内源件硫化氢水甲变化并探讨其机制及意义.方法:随机将24只红目豚鼠分为对照组、假手术组及模型组,模型组,采用小脑前下动脉FeCl3诱导血栓形成制备耳蜗缺血豚鼠模型,造模1小时后,采用激光多普勒血流测量耳蜗血流量,测量实验前后豚鼠听性脑干反应(ABR)域移,采用敏感硫电极法测量血清内源性硫化氢变化.结果:对照组耳蜗血流量变化值0.73%,假手术组组耳蜗血流量减少4.24%,模型组组耳蜗血流量减少37.3%,对照组ABR阈移值0.84%,假手术组ABR阈移值0.92%,模型组ABR阈移值42.1%,对照组血清内源性硫化氧4.1μmol/L,假手术组血清内源性硫化氢4.0μmol/L,模型组血清内源性硫化氧7.2μ mol/L,同对照组及假手术组相比,模型组耳蜗血流量明显减少,ABR阈移值增大,内源性H2S水平升高.结论:内耳缺血造成耳蜗血流量减少,引起听力损伤,H2S升高可能是对抗内耳缺血,保护听力的机制之一.     

硫化氢对氧应激大鼠肝星形细胞的影响

目的探讨硫化氢（H2S）对大鼠肝星形细胞（HSC）增殖和氧应激的影响。方法用铁超载的方法复制肝纤维化的氧应激模型,给予外源性H2S供体硫氢化钠（NaHS）和炔丙基甘氨酸（PPG,H：S合成关键酶胱硫醚-γ-裂解酶CSE抑制剂）,通过绘制生长曲线法和用CCK-8细胞计数法测定不同浓度H2S和PPG分别作用于500μmol／L次氮基三乙酸铁（FeNTA）培养下的HSC6、12、24h细胞上清液和裂解液中H2S浓度、超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量,通过检测HSC的增殖情况、CSEmRNA表达水平、H2s浓度和氧化抗氧化指标（MDA、SOD）来探讨H2S对HSC氧应激的影响。结果FeNTA所致的增殖HSC氧应激损伤明显增加,抗氧化能力减弱。同时,CSEmRNA表达水平低下,H2S产生减少。给予PPG后,HSC增殖显著且CSEmRNA表达受到抑制。内源性H2S随着严重的氧应激损伤进一步减少。给予NaHS后,HSC增殖减少,CSEmRNA表达和H2S产生显著增加以缓解氧应激损害和增强抗氧化能力。结论H2S对HSC增殖具有一定的抑制作用,对FeNTA诱导的氧应激具有保护作用。     

高原肺动脉高压大鼠硫化氢／胱硫醚-γ-裂解酶体系的变化

目的探讨气体信号分子H2S及其生成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）在大鼠高原性肺动脉高压形成中的作用及其动态变化规律。方法60只雄性Wister大鼠,随机抽取10只大鼠作为低海拔对照组,其余50只为高原组。高原组大鼠在到达海拔4617m的第1、3、7、15、30d不同时间采集血浆及肺组织标本,采用右心导管法测定肺动脉压、敏感硫电极法测定血浆H,S浓度、酶促反应法测定肺组织CSE转化率、Western blot方法检测CSE在蛋白中的表达。结果大鼠第1d到达高原时,各项观察指标无明显变化;到达高原第3d时肺动脉压（18．12±3．34mmHg）无明显变化,而血浆H2S和CSE转化率明显增高;大鼠在高原7d时可形成肺动脉高压[（30．31±4．05）mmHg];随着高原低压低氧和大鼠肺动脉高压的持续,血浆H2S浓度、肺组织CSE转化率及蛋白表达逐渐下降,15d组和30d组与其他各组比较差异均有统计学意义。结论在高原暴露早期,内源性H2S／CSE体系上调而肺动脉压不增高,而在后期H2S／CSE体系下调且肺动脉压增高,提示内源性H2S体系可能与高原性肺动脉高压形成有关,并起着保护作用。     

Hydrogen sulfide： third gaseous transmitter, but with great pharmacological potential

Hydrogen sulfide （H2S）, which is well known traditionally as a toxic gas, has been proven to be produced endogenously by 3 enzymes in mammalian tissues and plays important roles in physiological and pathophysiological conditions. In the central nervous system, H2S functions as not only a neuromodulator, but also a neuroprotectant against oxidative stress. In the cardiovascular system, H2S relaxes vascular smooth muscles by the activation of KATP channels and inhibits smooth muscle cell proliferation via the mitogen-activated protein kinase signaling pathway. These effects are important for maintaining blood pressure and preventing vessel structural remodeling, and identifies H2S as an important factor in the development of some vascular diseases, such as hypertension. H2S also shows cardioprotective effects in ischemic myocardium and septic and endotoxin shock. Recent studies have demonstrated a new mechanism to explain the motor effect of H2S on the rat detrusor muscle, which is through the activation of the capsaicin-sensitive primary neuron. This review focuses on the recent research achievements on H2S and discloses the great potential of H2S as the third gaseous transmitter in cardiac protection.     

新型气体信号分子硫化氢和肝纤维化关系的研究进展

内源性硫化氢(H2S)是继一氧化氮(NO)、一氧化碳(CO)后发现的第3种气体信号分子[1].研究发现H2S具有抗氧化、抗凋亡、抗炎、抗纤维化、细胞保护、舒张血管、降低门脉压、改善肝功能、保护心肌、抗动脉粥样硬化、调节神经退行性变等生理作用[2-6].肝纤维化是肝硬化的早期阶段,肝星状细胞(HSC)的激活是肝纤维化进程中的关键步骤,有研究发现H2S能影响HSC的激活,对肝纤维化具有潜在治疗作用[7].现就H2S与肝纤维化的关系概述如下.     

硫化氢延迟预处理对大鼠心肌蛋白质组学的研究

目的 采用蛋白质组学技术,观察硫化氢延迟预处理对大鼠心肌蛋白质表达的影响.方法 16只SD大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组和硫化氢预处理组,每组8只.尾静脉注射生理盐水和硫化氢预处理后24h建立心肌缺血/再灌注模型(缺血30 min、再灌注120 min).用双向凝胶电泳(2-DE)分离两组大鼠心肌组织蛋白质,2-DE图谱分析后找出表达差异的蛋白质,并用基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质.结果 对照组的蛋白质点数平均为929±14,硫化氢组的蛋白质点数平均为906±10,经凝胶图像分析找到表达差异蛋白质15个;用MALDI-TOF-MS对差异蛋白进行鉴定,共鉴定出11个蛋白质,包括多(聚)脱氧核糖核苷酸合酶、胱硫醚-γ-裂解酶、转录起始因子、NADH脱氢酶、鸟嘌呤核苷酸释放因子、果糖二磷酸醛缩酶A、糖原合成酶激酶-3、电子转移黄素蛋白、谷胱甘肽S转移酶、钙活化核苷酸酶、S-腺苷蛋氨酸合成酶.结论 硫化氢延迟预处理可使大鼠心肌组织蛋白表达发生改变,其心肌保护作用可能与改善能量代谢、抗氧化反应、细胞保护和保护呼吸链等有关.     

以硫化氢为主混合性气体急性中毒12例救治体会

目的 分析以硫化氢为主混合性气体中毒原因,临床表现及疗效.方法 对急性混合性气体中毒临床资料进行分析.结果 中毒共12例,1例现场死亡;就诊11例,2例经抢救无效死亡,3例住院综合治疗后痊愈,6例给予留观对症治疗痊愈.结论 以硫化氢为主急性混合性气体中毒可致多脏器功能损害,尽早氧疗,畅通气道,保护重要脏器功能,尽早行高压氧治疗至关重要.     

硫化氢对心衰大鼠心肌保护作用的研究

目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对心力衰竭(heart failure,HF)大鼠心肌的保护作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组(control组),心衰模型组(HF组),NaHS(外源性的H2S)干预组(NaHS组)。其中心衰模型组用异丙肾上腺素(ISO)制备,NaHS组在给予ISO的同时每天腹腔注射NaHS一次。统计各组大鼠死亡率,测定肺与体重比值;通过超声检测各组大鼠左室血流动力学的变化;HE,电镜观察心肌形态学变化,TUNEL观察心肌细胞凋亡情况。结果 H2S提高了心衰大鼠存活率,降低肺与体重比值;明显改善心衰大鼠心脏血流动力及心肌损伤情况,并且减少了心肌细胞的凋亡。结论 H2S对心衰大鼠心肌具有明显的保护作用,能阻止心衰的进一步发展。     

硫化氢与脏器功能变化关系性研究进展

硫化氢(H2S)是一种带有臭鸡蛋味的有毒气体,以其毒性而闻名。20世纪90年代中期,科学家证明人体内源性硫化氢可作为一种神经活性物质而存在。越来越多的研究证明,H2S是继一氧化氮和一氧化碳后发现的一种新型气体信号分子。有关H2S与相关疾病的文献分析发现,H2S广泛参与机体多种生理、病理过程,且在许多器官和系统中起着保护作用。近来研究发现,硫化氢对烧伤后脏器功能的保护产生积极作用。