乙型肝炎患者父子间HBV DNA U5样序列的研究

为了探讨乙型肝炎的遗传传递，我们对乙型肝炎患者３８个家系８２个个体检测了血清游离型和外周血单核细胞内整合型ＨＢＶ ＤＮＡ Ｕ５样序列片段和单链ＤＮＡ构象多态性等实验指标。发现男患者及其发病后出生子女Ｕ５样序列检出率均显著高于其发病前出生子女；Ｕ５样序列检出率在ＨＢＰ和其发病后出生子女呈一致性增高；ＨＢＰ与其发病后出生子女可具有完全一致的单链泳动变位结果。     

掌指关节的三维解剖及形态分析

目的：观测掌指关节关节面的几何形态,为人工关节的设计和应用提供解剖学依据。方法：10只成人手标本,解剖掌指关节,测量侧副韧带起点距掌骨头关节面的直线距离,三维数据检测仪获得关节面三维坐标数据,应用SPSS软件进行统计分析和成像。结果：掌骨头有双髁结构,桡侧髁略大,第1掌骨头形态特殊;各掌骨头高度的比较无显著差异;其掌侧关节面大于背侧,第2、3掌骨头关节面面积明显较大。近节指骨底在形态、高度和面积方面各序列相似;各序列侧副韧带起点桡侧较尺侧距离掌骨头关节面远。结论：手指人工关节的设计应符合解剖形态,并根据各序列形态的差异进行个体化设计,尤其拇指更应区别对待;手指人工关节的设计和应用中应注意软组织保护,关节的切除范围应注意保留侧副韧带的起止点。     

日本血吸虫大陆株26kDa谷胱甘肽S┐转移酶编码区基因的克隆及序列测定

从日本血吸虫大陆株成虫分离总ＲＮＡ，逆转录合成ｃＤＮＡ第一链，根据菲律宾株２６ｋＤａ谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）的ｃＤＮＡ序列，设计并合成引物，扩增出２６ｋＤａ的编码区基因，并克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ质粒。初步酶切鉴定后，从两端对插入片段进行核苷酸序列测定。结果与菲律宾株比较，核苷酸同源性为９９．８％，仅第５８２位碱基不同，菲律宾株为Ａ，而大陆株为Ｇ。比较从ｃＤＮＡ推导出的氨基酸序列，两者１００％相同。测序结果也与曼氏血吸虫进行了比较。     

中国人β神经生长因子基因的分子克隆,序列分析及其在哺乳…

以正常人血淋巴细胞染色体ＤＮＡ为模板，ＰＣＲ扩增出短体前β神经生长因子编码基因。将所得基因片段重组于Ｍ１３噬菌体载体，筛选得到含中国人ｐｒｅｐｒｏ－β－ＮＧＦ基因的克隆。采用Ｓａｎｇｅｒ单链末端终止法测出其全部的核苷酸序列，该序列与国外文献所报道的仅有一个碱基不同。将该基因亚克隆于真核表达载体ｐＥＶ１，经转染哺乳动物细胞ＢＨＫ后，在培养上清中检测到了成熟型β－ＮＧＦ。     

电生理检测在肌无力综合征中的诊断价值

肌无力综合征是一种由抗体介导的神经肌肉接头处突触前膜乙酰胆碱部位及钙离子通道选择性破坏的自身免疫性疾病.它的发生与恶性肿瘤密切相关[1].由于早期原发肿瘤症状隐匿,容易误诊.神经电生理检测在肌无力综合征的确诊中有重要作用.现将我科收治的5例患者的电生理资料作回顾性分析,以提高对该病以及神经电生理检查尤是重复神经刺激(RNS)反应重要性的认识.     

顺式串联双拷贝DuIFN—γ基因的真核表达

目的：以鸭γ－干扰素（DuIFN-γ)基因为目的基因,研究同一启动子调控下,不同拷贝数的目的基因的表达状况。方法：采用基因重组技术构建含DuIFN-γcDNA单拷贝和双拷贝重组质粒并转入真核细胞COS－7中进行表达。DuIFN-γ活性采用Griess试剂检测。结果：双拷贝重组质粒和单拷贝重组质粒50％最大活性稀释度分别为1：320和1：160。双拷贝重组质粒转染上清稀释10240倍后,仍保留DuIFN-γ活性,而单拷贝重组质粒转染上清经1280倍稀释后,即丧失活性。结论：在同一启动子作用下,顺式插入双拷贝目的基因可明显增强目的基因在真核细胞中的表达量。     

口腔链球丙酮酸氧化酶的克隆和序列分析

目的 阐明血链球菌产生过氧化氢及其调节的分子机理。方法 根据已知的肺炎链球菌丙酮酸氧化酶基因（spxB）序列设计PCR引物,扩增血链球菌ATCC10557的丙酮酸氧化酶基因,以pUC18及M13mp18、M13mp19为载体进行克隆和亚克隆,并进行序列分析。结果 成功地从血链球菌ATCC10557扩增出丙酮酸氧化酶基因,获得该基因的全部序列（1788bp),具有完整的开放读框,能编码591个氨基酸的多肽。结论 血链球菌丙酮酸氧化酶基因的克隆和序列分析,为进一步研究调节血链球菌产生过氧化氢的分子机理打下了基础。     

不同机制大动脉粥样硬化型脑卒中基线特征和血管内治疗后结局比较

目的 本研究旨在比较颅内大血管伴/不伴同侧颈内动脉闭塞的大动脉粥样硬化型脑卒中患者基线特征以及行血管内治疗后结局的差异。方法 对DIRECT-MT亚组进行回顾性分析,以比较前循环大动脉粥样硬化（large-artery atherosclerosis,LAA）型卒中串联闭塞和颅内闭塞接受血管内治疗（endovascular treatment,EVT）的患者的基线特征和预后,分析不同机制学特征（动脉粥样硬化或动脉-动脉栓塞）对临床结局的影响。结果 LAA型卒中患者共108例,其中串联闭塞63例,颅内闭塞45例。颅内闭塞组患者高血压史率高于串联闭塞组（77.8% vs. 52.4%, P=0.007）。颅内闭塞组闭塞部位最常见于大脑中动脉M1段（88.6%）,而串联闭塞组颅内闭塞主要位于颈内动脉颅内段（49.2%）和大脑中动脉M1段（49.2%）（P＜0.001）。两组患者在年龄、性别、术前抗栓、他汀类药物的使用,卒中、房颤、吸烟史,基线mRS、NIHSS评分,是否静脉溶栓,侧枝循环,以及救治流程时间差异均无统计学意义（P均＞0.05）。90天mRS 0-2分的患者比例两组差异无统计学意义（53.3% vs. 41.9%, P=0.243）。颅内闭塞组术后成功再灌注率高于串联闭塞组（93.3% vs. 77.4%, P=0.026）,但术后24-72小时血管再通的比例前组低于后组（57.1% vs. 77.2%, P=0.034）。最终梗死体积,颅内闭塞组小于串联闭塞组（20.1 vs. 34.5, P=0.025）。术后NIHSS评分,90天EQ-5D-5L评分和BI指数等其他次要结局,两组间差异无统计学意义（P均＞0.05）。两组在90天内的死亡率,发生的无症状性和症状性颅内出血率,5-7天时在另外的血管区域新发脑梗死,以及新流域栓塞的患者百分比相似,差异无统计学意义（P均＞0.05）。结论 动脉粥样硬化导致的串联闭塞相较于孤立颅内闭塞,末次造影成功再灌注率较低,梗死体积更大,但术后24-72小时再通率更高,且神经功能良好预后率以及不良事件发生率均与颅内闭塞相仿。     

HIV—1基因限制性显示片段的克隆与序列分析

目的：克隆并分析经限制性显示－聚合酶链反应（RD－PCR）扩增的HIV－1基因片段。方法：将所有HIV－1基因片段分成10组并进行RD－RCR扩增,纯化各组PCR产物后将之克隆至T载体上并快速鉴定。从阳性克隆中提取质粒,扩增靶片段并测序。结果：序列分析表明,所扩增的片段均属于HIV基因。结论：改良了一种多片段的克隆及鉴定方法并用于限制性显示扩增片段的克隆。