碱性成纤维细胞生长因子/重组异种骨临床应用研究的初步报告

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和重组异种骨(RBX)复合(bFGF/RBX)后的临床应用.方法:将bFGF/RBX用于脊柱后路融合2例、股骨骨不连2例、骨缺损修复5例、成骨不全弯曲畸形截骨矫形1例;于术前和术后10d、4、8、12周查静脉血Ca2 、P3-、AKP及摄片.结果:(1)除2例AKP值于术前、后变化显著外,其余8例病例的AKP值及全部病例的Ca2 、p3-值均正常;(2)X线平片显示:骨痂生长丰富、愈合时间提前;(3)无排异反应、感染,术后热均于术后4～5d至正常.结论:bFGF/RBX的成骨能力强,能缩短愈合时间,是组织相容性好、骨源丰富且安全的生物复合材料.     

复合皮移植修复功能部位肉芽创面的临床研究

2000年6月以来,我们对27例功能部位的肉芽创面进行修复,其中接受脱细胞异体真皮 刃厚自体皮(复合皮)修复创面12例,自体中厚皮片移植修复15例,术后比较复合皮修复效果满意,报告如下.     

脱细胞异体真皮基质组织补片用于腹股沟疝

目的 研究异体细胞外基质材料在疝修补术中的应用效果.方法 采用脱细胞异体真皮基质组织补片对腹股沟疝行无张力修补,观察其临床应用效果.结果 11例患者术后恢复良好,无并发症出现,随访3年均无不良主诉和复发表现.结论 异体细胞外基质材料可作为无张力疝修补术的理想天然生物材料.     

不同种属脱细胞真皮与自体皮复合移植的比较性研究

目的　观察不同种属脱细胞真皮基质 (acellulardermalmatrix,ADM)与自体皮复合移植的效果 ,为异种ADM的临床应用提供理论依据。　方法　本地产白色小猪 6头 ,分为异种 (人 )ADM +自体刃厚皮组 (A组 )、同种异体 (猪 )ADM +自体刃厚皮组 (B组 )、单纯自体刃厚皮组 (C组 )及单纯自体中厚皮组 (D组 )。观察术后 2、4、8、12、2 4周内移植物存活率 ,以及移植皮片收缩程度、移植区组织学变化等情况。　结果　A、B组移植后皮片外观光滑、有弹性 ;两组均获得了满意的皮片成活率 ,并可迅速诱导成纤维细胞、血管内皮细胞等宿主修复细胞的长入 ;两组移植皮片收缩面积有大于C、D组的趋势 (P <0.0 5);术后 2 4周移植区组织与单纯中厚皮移植组织结构一致。　结论　在观察期内(复合移植后 2 4周 ) ,与自体皮复合移植时 ,同、异种ADM具有相近的生物学作用 ,异种来源的ADM可能具有更广阔的应用前景     

碱性成纤维细胞生长因子转染兔关节软骨细胞的研究

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)基因转染兔关节软骨细胞后对培养的关节软骨细胞形态、分裂增殖及代谢等方面的影响。方法　将bFGF基因克隆于真核表达载体pHβ。AP 1中 ,构建重组真核表达载体 pHβ bFGF ,转染兔关节软骨细胞。G418筛选阳性克隆 ,检测阳性细胞bFGF基因的表达水平。测定培养软骨细胞的DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及进行细胞周期分析。结果　bFGF基因转染软骨细胞表型未见显著变化 ;bFGF基因转染组、载体对照组、空白对照组DNA含量分别为 ( 77.37± 6 .2 1)、( 40 .39± 4.33)、( 33 .77± 4.2 5 ) μg/瓶 (P <0 .0 1) ,糖醛酸含量分别为 ( 30 8.8± 10 .2 )、( 77.9± 8.7)、( 80 .2± 10 .5 ) μg/瓶 ( P <0 .0 1) ,软骨细胞G1期分别为 5 9.3± 2 .1、6 9.5± 4.0、73 .1± 3 .9(P <0 .0 5 )。结论　bFGF转染关节软骨细胞后 ,可显著促进细胞分裂增殖并缩短细胞周期 ,为软骨组织工程研究提供新的技术路线及理论基础。     

局灶脑缺血恢复期半影区小胶质细胞可塑性变化和bFGF表达规律探讨

目的 观察Wistar大鼠大脑中动脉永久性闭塞后不同时段，缺血半影区小胶质细胞和神经元形态学变化及bFGF在皮层和海马的表达规律。方法 将雄性Wistar大鼠48只，随机分为假手术对照组和永久性局灶性脑缺血组，后者再根据缺血时间不同分5个亚组。假手术组：仅暴露大脑中动脉，2h后断头取脑。永久性局灶性脑缺血组：建立大鼠大脑中动脉闭塞模型，分别于缺血后3d、7d、14d、28d、42d断头取脑，行HE和免疫组化染色。观察梗死灶周围半影区的小胶质细胞和神经元的形态学变化和bFGF在皮层及海马部位的表达规律。结果 HE染色可见脑缺血3d时半影区有少量小胶质细胞出现，14d小胶质细胞增多达高峰，42d趋于稳定。脑缺血3d梗死灶周围皮质神经元和胶质细胞开始表达bFGF，7d表达增强，14d达高峰，28d表达开始减弱，42d仍有一定表达，bFGF在海马的表达也有相同规律。结论 小胶质细胞的肥大和增生性变化以及bFGF的表达，不仅发生于脑缺血早期，晚期仍显示持续性变化，表明小胶质细胞活动以及bFGF的表达贯穿于脑缺血的整个病理过程。     

Differentiation of human epidermal stem cells into fibroblasts induced by TGF-β1 in vitro

Objective To investigate the correlation between human epidermal stem cell (hESCs) and hypertrophic scar or keloid. Methods Improved collagen Ⅳ-coated adhesion methods was used to isolate and culture the epidermal stem cells after neutral protease selectively digested the dermo-epidermal junctions. After the cells were cultured and expanded in vitro, and passage 3 hESCs were induced by different concentrations of TGF-β1 (0.1, 5.0, and 10.0 ng/ml). Morphological fea-tures and identification of these cells were meseasured by HE, Masson, immunohistochemical staining on the days 3 and 7, respectively. Results After induced by TGF-β1 for 3 and 7 days, the morpholo-gy of the epidermal stem cell (hESCs) was changed into fusiform shape, similar to fibroblasts. 70 % ofthe cell which was induced by TGF-β1 were blue stained in the cytoplasm by Masson stain, which is the distinctive method for collagen, suggesting collagen appeared or increased in the cells. The collagen concentrations in supernatants of hESCs were 0.4150±0.0014, 0.3380±0. 0020, and 0.3870±0.0020, much higher than that in control group (0.0780±0.0025) and normal skin fibro-blast group (0.15004±0.0051) (P<0.05). Immunohistochemical staining revealed that positive rates of these cells for anti-vimentin staining were more than (95.00±1.20)% in experiments and (5.70±0.20)% in control group. Conclusion The differentiantion of hESCs induced by TGF-β1 into fibro-blasts indicates that hESCs may play a role in the pathogenesis of hypetrophic scar and keloid.     

丹参对狼疮性肾炎成纤维细胞增殖,凋亡及c—myc蛋白表达的影响

观察丹参对人肾间质成纤维细胞生物学行为的影响。用狼疮性肾炎患者肾活检组织培养分离的成纤维细胞，观察丹参对人肾成纤维细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率的影响，并用游戏工细胞仪检测了细胞凋亡及ｃ－ｍｙｃ蛋白表达情况。丹参对人肾成纤维细胞增殖有抑制作用，并通过使ｃ－ｍｙｃ蛋白高水平表达而诱导细胞凋亡。     

异种骨基质明胶(BMG)诱导成骨活性的实验研究

本文按着 Urist 方法制备了人、兔、猪和羊四种骨基质明胶(BMG),分别将其植入25只成年 SD 大鼠的胸部和股部肌肉,在手术的第2、4、6和8周后,通过光学显微镜观察各种 BMG 在肌肉内的免疫排斥反应和诱导成骨活性。结果表明:异种 BMG 具有一定的诱导成骨能力。但在 BMG 周围亦出现程度不同的排斥反应。本文认为,进一步降低 BMG 的抗原性,提高其诱导成骨活性,对于异种 BMG的临床应用将具有重要意义。     

rhGM-CSF对小鼠口腔粘膜损伤的防治作用

目的：探讨rhGM-CSF促进口腔腔溃愈合的作用机制。方法：取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞，用rhGM-CSF刺激成纤维细胞后第2、4、6天用细胞计数及^3H－胸腺嘧啶掺入法（^3H-TdR）测定其增殖情况，结果rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用，在80－100ng/ml时，细胞生长达到最佳状态，过高浓度rhGM-CSF的刺激作用反而下降。结论：rhGM-CSF可以通过刺激成纤维细胞增殖及DNA合成促进口腔溃疡愈合。