原位PCR技术检测石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒DNA

应用原位聚合酶链反应（ＩＳＰＣＲ）技术检测了２５例尸检畸形胎儿石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ及原位杂交（ＩＳＨ）进行了比较。ＩＳＰＣＲ、ＰＣＲ及ＩＳＨ检测阳性率分别为４４％，３６％及２０％。与ＩＳＨ相比较，ＩＳＰＣＲ不仅检出阳性率高，而且信号强度增强。研究结果提示，ＩＳ－ＰＣＲ是诊断ＨＣＭＶ感染的快速、敏感、特异的实用方法。     

孕妇巨细胞病毒感染对胎儿影响的前瞻性研究

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对沈阳市４５０名孕妇进行巨细胞病毒（ＣＭＶ）筛查，并前瞻性追查到其婴儿１００名ＣＭＶ感染状况。结果孕妇９７．１１％为既往感染，０．８９％为原发感染，１１．１１％为复发感染，仅２％为易感者。４５０例中感染组孕妇有畸形儿３例，流产３例，其胎儿感染率与致畸率明显高于对照组。１００例母婴检查结果：感染组孕妇所生先天性感染儿比对照组多１．４３倍（ＲＲ＝１．４３），感染组有２名低智儿，对照组无。本组早孕原发感染对胎儿危害最大，其宫内传播率为３３．３％。感染组孕妇９例感染儿中２例巨细胞包涵体病，７例无症状。为了早期诊断达到优生目的，对孕妇进行ＣＭＶ筛查是必要的，但筛查过程中发现有活动感染时处理要慎重，最好追查到羊水阳性时考虑终止妊娠。     

一氧化氮供体和他汀对B组柯萨奇病毒感染的实验研究

目的研究硝酸酯类和他汀类等一氧化氮（NO）供体的抗柯萨奇病毒B组3型（CVB3）的作用及其特点和机制。方法用TCID50和空斑形成实验测定CVB3的毒力；MTT法确定NO供体药物的无毒性浓度；利用细胞病变效应（CPE）抑制实验和空斑形成抑制实验分析NO供体药物对CVB3在HeLa细胞和ECV．304细胞中增殖的抑制作用；并分析硝酸甘油（GRIN）不同给药次数、NO浓度变化以及NO浓度与GTN对CVB3抑制效应间的相关性。结果硝酸酯类药物GTN、硝酸异山梨酯可明显抑制CVB3所致的CPE及空斑形成（P〈0．05），他汀类药辛伐他汀、洛伐他汀均未显示抑制CVB3所致的CPE（P〉0．05）；CVB3接种前预先与GTN作用、CVB3接种同时加入GTN两种条件下CPE抑制率差异无统计学意义（P〉0．05）；CVB3攻击后多次给予GTN的组间CPE抑制率差异无统计学意义（P〉0．05），但在CVB3攻击前不同时间点给予GTN的组间CPE抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）；NO浓度与不同时间点给予GrIN的CPE抑制结果呈正相关（r=0．97，P〈0．01）。结论NO供体类药物硝酸酯类具有明确的抗CVB3感染作用，其抗CVB3增殖的作用与NO浓度呈正相关；他汀类药物在本实验条件下未观察到抗CVB3增殖作用，原因可能是细胞类型与他汀不匹配。     

MHCⅡ类反式激活因子与病毒感染的关系

MHCⅡ类反式激活因子（ClassⅡ transactivator，CⅡTA）通过调控细胞是否表达MHCⅡ类分子及其水平而决定宿主是否对外来病毒感染产生免疫应答及其程度，从而影响病毒感染的发生、发展与转归。本文介绍了CⅡTA的结构与功能、IFNγ诱导MHCⅡ类基因表达的机制及CⅡTA分子与病毒间的相互作用。     

微生物学

0500672 HIV复制型痘苗病毒载体疫苗免疫原性分析，0500673 苦参素对HBsAg转基因小鼠血清Th1和Th2细胞因子水平的影响，0500674 肝癌高发区广西隆安县乙型肝炎病毒株全基因序列分析，0500675 我国广东、福建地区2000-2001年手足口病肠道病毒71型分离株的种系进化分析，0500676 贵州侗族、苗族和汉族人群乙型肝炎病毒基因型分布。     

一些病毒感染对宿主肥胖的影响

近年来,人类社会中肥胖者在不断增多。导致肥胖的病因很多,感染因素是一个易被忽视的病因,其中一些病毒感染对宿主肥胖具有明显的影响。本文就一些病毒对宿主肥胖的影响作一个概述。     

成年大鼠胰岛的体外基因转染

目的 探讨携带外源基因的慢病毒在体外有效感染胰岛及外源基因在胰岛中的表达，为通过移植前向胰岛细胞转入特定的免疫调节分子基因诱导胰岛移植物耐受奠定基础。方法 将目的基因CTLA4Ig导入慢病毒载体pWPTS，构建成pWPTS-CTLA4Ig载体。用磷酸钙沉淀法将pWPTS-EGFP、pWPTS-CTLA4Ig分别和其辅助载体pMD2．G、pCMVΔ8．92共转染293T细胞，收获病毒上清液，测定病毒滴度后感染新分离的胰岛。通过Western Blot测定胰岛培养上清液中CTLA4Ig蛋白的表达。结果 ①成功构建了携带CTLA4Ig基因的慢病毒载体pWPTS-CTLA4Ig；②包装产生的慢病毒Lenti-EGFP、Lenti-CTLA4Ig在体外可以感染胰岛，其中在Lenti-EGFP慢病毒感染的胰岛观察到了绿色荧光，及在Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛培养上清液中检测到了CTLA4Ig蛋白的表达。结论 慢病毒在体外可以有效感染大鼠胰岛，且携带的外源基因可以在胰岛细胞中稳定表达，其中Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛为进行胰岛移植并诱导体内特异的胰岛移植物耐受奠定了基础。     

从人分离出两株甲型流感H9N2亚型毒株内部基因特性的研究

目的 了解2株从人分离出的H9N2亚型毒株内部基因特性，并弄清其来源。方法 用RT-PCR扩增目的基因，用P^CEM-T Vector(美国Promega公司)，4℃过夜连接，重组质粒转入dH5a细菌，筛选阳性菌落，酶切鉴定，送六合通公司自动测序。然后进行进化树分析。结果 2株测定毒株内部基因均为G9基因系，它们相互间除PA基因有差异外，其余5个基因均相同。结论 2株测定毒株的基因组均为G9基因系，它们是由携带不同基因特性H9N2毒株的禽群分别直接感染人，而不是来自同一禽的H9N2亚型流感病毒。     

建立一种用重组蛋白检测抗口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法

目的研究以重组蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒（FMDV）感染后的动物血清中特异性抗体的可能性,为建立一种非病毒颗粒的ELISA检测试剂盒提供实验依据。方法利用自行构建表达的O型口蹄疫病毒VP1表位肽重组蛋白（VP1epi）作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳工作浓度和包被方法,优化各项实验条件,并以FMDV感染后的豚鼠血清作为标准阳性血清确定ELISA方法的特异性和灵敏度。结果FMDV感染后的阳性豚鼠血清可以很好地识别VP1epi重组蛋白,用此蛋白包被检测抗FMDV抗体的灵敏度可达1∶3200,并证明所检测的抗体是FMDV特异性的。结论VP1epi重组蛋白可以替代FMDV颗粒用于建立检测抗FMDV抗体的ELISA试剂盒。     

病毒性肝炎多重感染因素分析

为了解病毒性肝炎多重感染的危险因素,我们采用1∶1病例对照的研究方法,对广州市9所综合性大医院141对病毒性肝炎多重感染的患者进行问卷调查,资料单因素用EP16分析,多因素用Logistic回归方法分析.结果表明,家庭肝炎史(OR=9.57,p<0.005),手术史(OR=10.95,p<0.05),注射史(OR=3.99,p<0.001),输液史(OR=11.95,p<0.005),是病毒性肝炎多重感染的危险因素,而饭前便后洗手的习惯(OR=0.27,p<0.05),乙肝疫苗接种史(OR=0.064,p<0.001)是保护因素.提示广州市病毒性肝炎多重感染的主要途径是血液传播,而良好的卫生习惯有助于减少肝炎多重感染的机会.