六味地黄苷糖对高糖诱导的胎盘滋养层细胞增殖侵袭 及ERK/MMP-9信号通路的作用机制研究

目的:探究六味地黄苷糖(LW-AFC)通过调控ERK/MMP-9信号通路对高糖诱导的胎盘滋养层细胞增殖侵袭作用机制研究。方法:将在ATCC细胞库购买胎盘滋养层细胞分为空白对照组(空白组):胎盘滋养层细胞正常培养,不做任何处理;高糖诱导组(诱导组):采用高糖诱导的方式制作高糖胎盘滋养层细胞模型;六味地黄苷糖组(苷糖组):在高糖诱导胎盘滋养层细胞模型完成后给予LW-AFC培养。通过MTT法检测胎盘滋养层细胞增殖率,Western blot法检测胎盘滋养层细胞中ERK/MMP-9的蛋白含量,Transwell小室实验检测胎盘滋养层细胞侵袭情况,qRT-PCR法检测胎盘滋养层细胞中ERK/MMP-9mRNA的表达含量,克隆法检测胎盘滋养层细胞迁移情况的差异性,探究LW-AFC对高糖诱导的胎盘滋养层细胞增殖侵袭及ERK/MMP-9通路表达的影响。结果:随着时间的推移,诱导组胎盘滋养层细胞的增殖率降低,与诱导组比较,苷糖组细胞增殖率显著升高(P0.05)。苷糖组与诱导组比较,苷糖组滋养层细胞侵袭能力显著高于诱导组细胞(P0.05)。诱导组、苷糖组与空白组比较,空白组细胞克隆数量显著较多(P0.05);苷糖组与诱导组比较,诱导组胎盘滋养层细胞克隆数量显著低于苷糖组(P0.05)。诱导组胎盘滋养层细胞中ERK/MMP-9蛋白表达、ERK/MMP-9 mRNA表达量最高,空白组胎盘滋养层细胞蛋白表达、mRNA表达量低于苷糖组、诱导组(P0.05),苷糖组与诱导组比较,苷糖组胎盘滋养层细胞ERK/MMP-9蛋白表达、ERK/MMP-9 m RNA表达量显著低于诱导组(P0.05)。结论:LW-AFC能够提升高糖诱导的胎盘滋养层细胞的增殖速率,增加细胞迁移、侵袭的数量,LW-AFC的作用机制可能与下调ERK/MMP-9通路表达含量有关,这一试验结果可逐步应用于临床妊娠糖尿病患者的治疗中。     

小鼠滋养层细胞原代培养方法的优化

目的 建立一种简便、有效的小鼠滋养层细胞原代培养方法,为研究病理妊娠的发生机制奠定基础.方法 分别在K.Handschuh和Zhou WH方法的基础上进行改良,获取孕鼠滋养层细胞,进行原代培养,并应用细胞计数及免疫细胞化学法比较滋养层细胞数量和纯度.结果 K.Handschuh改良法和Zhou WH改良法获得滋养层细胞数目分别为(11.4±1.8)×104个/mL、(16.3±0.9)×104个/mL,纯度分别为95%、96%,在获得滋养层细胞数目方面Zhou WH改良法优于K.Handschuh改良法(P<0.05).结论 Zhou WH改良法可获得高纯度足量的小鼠滋养层细胞.     

环孢素A治疗复发性流产的研究进展

复发性流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）是常见的妇产科疾病,该病病因复杂,目前仍有部分RSA患者的病因尚不明确,可能与免疫因素异常密切相关。与免疫因素相关的治疗方案也引起了学者们的关注,其中细胞免疫抑制剂环孢素A（cyclosporine A,CsA）在RSA中的治疗作用逐渐被揭示。随着研究的深入,学者们发现CsA具有调节母胎免疫耐受和滋养细胞增殖、迁移、侵袭等作用,为其作为RSA相关用药提供了证据支持。从CsA调节母胎免疫耐受细胞因子的平衡、缓解滋养细胞免疫应激损伤、增强滋养细胞的增殖及侵袭力和减少滋养细胞凋亡等方面阐述CsA的胚胎保护机制,并结合最新有关CsA联合中药治疗RSA的临床报道,阐明CsA在RSA疾病中的治疗价值,为进一步研究CsA治疗RSA提供思路。     

miR-34a靶向MMP2对TNF-α诱导人绒毛膜滋养层细胞 HTR-8/SVneo迁移及侵袭的影响

目的 探讨微小RNA（miR）-34a靶向基质金属蛋白酶（MMP）2对肿瘤坏死因子（TNF）-α诱导人绒毛膜滋 养层细胞 HTR-8/SVneo 迁移和侵袭的影响。方法 体外培养人绒毛膜滋养层细胞 HTR-8/SVneo,利用 0.5 μg/L TNF-α刺激细胞;将细胞分为对照组、TNF-α诱导组、NC组、miR-34a mimics组、iNC组、miR-34a inhibitor组;实时荧 光定量PCR（qPCR）检测各组细胞中miR-34a、MMP2 mRNA的表达;CCK-8法、Transwell法和划痕实验分别检测各组 细胞增殖、侵袭和迁移情况;蛋白免疫印迹法检测MMP2蛋白的表达;双荧光素酶报告实验证明miR-34a和MMP2的 靶向关系。结果 与对照组比较,TNF-α 诱导组细胞 miR-34a 表达水平、细胞增殖抑制率显著升高（P＜0.05）, MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭数目、细胞迁移率显著降低（P＜0.05）;与TNF-α诱导组和NC组比较,miR- 34a mimics组细胞miR-34a表达水平、细胞增殖抑制率显著升高（P＜0.05）,MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭 数目、细胞迁移率显著降低（P＜0.05）;与TNF-α诱导组和iNC组比较,miR-34a inhibitor组细胞miR-34a表达水平、 细胞增殖抑制率显著降低（P＜0.05）,MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭数目、细胞迁移率显著升高（P＜0.05）; miR-34a与MMP2具有靶向关系。结论 miR-34a可能通过负调控MMP2的表达抑制TNF-α诱导的人绒毛膜滋养 层细胞HTR-8/SVneo迁移和侵袭。     

生长因子对滋养细胞增殖分化的调控

本文阐述生长因子（GrowthFactors，GFs）及其受体的分子生物学特征以及对滋养细胞增殖分化的调控，并探讨导致细胞恶性转化的可能机制。     

DIAGNOSIS AND TREATMENT OF THE MALIGNANT GESTATIONAL TROPHOBLASTIC TUMOR WITH PULMONARY METASTASIS COMPLICATED WITH PULMONARY TUBERCULOSIS

Objective. To evaluate the diagnosis and treatment for malignant gestational trophoblastie tumor (MGTT) with pulmonary metastasis complicated with pulmonary tuberculosis. Methods. To analyze ten cases of MGTT with pulmonary metastasis complicated with pulmonary tu-berculosis in oar hospital from 1980 to 1997 retrospectively, Results. From the x-ray film, there are great resemblances between MGTT with pulmonary metastasis and pulmonary tuberculosis. Of 10 patients, 7 of them were examined out pulmonary tuberculosis during the ehamotherapy of MGTT. Pulmonary tuberculosis appeared six months before chemotherapy in three eases, All of the patients were treated with multiagent chemotherapy. Seven patients achieved a complete remission, 2 patients developed drug resistance and died of cerebral haemorrhage and cerebral herniation, 1woman who had achieved a complete remission from MGTT for 14 months died of miliary tubereulosis. Condu.non. It is very important to make differential diagnosis oi the MGTT with pulraonary metasta-sis complicated with pulmonary tuberculosis, Trying to avoid excessive anti tumor treatment owing to mis-take pulmonary tuberculosis for pulmonary metastasis, and avoiding missing an opportunity of anti-tuber-culosis treatment because of missed diagnosis should be emvhasized.     

海风藤酮对小鼠抗着床作用的细胞化学和电镜观察

目的观察海风藤酮对小鼠的抗着床作用及其细胞化学和超微结构的变化。②方法向妊娠第２天小鼠子宫角内注射不同剂量的海风藤酮,于妊娠第８天和第１０天观察其对滋养层细胞的刀豆凝集素（ＣｏｎＡ）受体和麦胚凝集素（ＷＧＡ）受体表达,以及对滋养层细胞和子宫蜕膜细胞超微结构的影响。③结果随着海风藤酮剂量增大,滋养层细胞的ＷＧＡ和ＣｏｎＡ受体的阳性反应减弱,以ＷＧＡ受体的改变更明显。电镜所见,实验组绒毛浅层滋养层细胞胞浆电子密度低,核固缩;深层滋养层细胞溶酶体增多,见髓样小体,子宫蜕膜的大蜕膜细胞胞浆溶酶体增多,胞浆空泡化,核膜溶解。④结论海风藤酮可使小鼠胚胎滋养细胞的ＷＧＡ和ＣｏｎＡ受体糖蛋白减少,从而干扰了细胞之间的识别黏附,破坏了胚胎正常生长和发育的内环境,抑制着床过程。     

用免疫组织化学方法鉴别异位妊娠与正常妊娠

对57例内膜刮出组织和宫内流出组织均未检出绒毛膜绒毛。用抗血清标记绒毛滋养层的人绒毛膜促性腺激素(HCG)、人胎盘催乳素(HPL)和妊娠特异糖蛋白(SPI),结果18例被标记,37例未被标记。临床证明未被标记的37例为异位妊娠。表明用激素标记子宫内膜可提高异位妊娠的诊断率。     

遗传印记基因PEG10在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的 探讨遗传印记基因 PEG10在子痫前期（PE）患者胎盘组织中的表达及意义.方法 选取2010年8月至2012年6月在上海市第一人民医院宝山分院妇产科住院分娩的22例PE患者的临床病历资料为研究对象,并纳入研究组,选取同期在本院行择期剖宫产分娩的正常足月妊娠孕妇22例纳入对照组.2组受试者的年龄,孕龄,孕、产次等一般临床资料比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.采用荧光实时定量逆转录聚合酶反应（RT FQ-PCR）及免疫组织化学方法检测2组受试者胎盘组织中PEG10 mRNA及蛋白的表达与分布（本研究遵循的程序符合上海市第一人民医院宝山分院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书）.结果 PEG10 mRNA及蛋白在研究组和对照组胎盘组织中均有表达（0.5832±0.0450 vs.0.1943±0.0350,0.1258±0.0860 vs.0.0572±0.0050）,2组比较,差异有统计学意义（t=6.8266,P〈0.001;t=2.4296,P〈0.01,P〈0.05）.结论 PEG10基因上调可能是早期PE表现的分子标志之一.     

原代培养冷冻兔角膜缘上皮细胞的增殖活性研究

为探讨低温保存的兔角膜缘上皮细胞体外培养方法和增殖活性，采用不同的冷冻条件保存兔角膜缘上皮组织；通过若丹明B染色方法定量检查体外培养的原代细胞增殖活性，并对含血清培养和无血清培养、消化培养和组织块培养进行比较性研究。结果表明，二甲基亚砜浓度梯度和降温速率对冷冻角膜缘上皮原代细胞的增殖能力均无显著性影响(P&;gt;0．05)。在细胞增殖活性上，血清培养组优于无血清培养组(P&;lt;0．05)；组织块培养组优于消化培养组(P&;lt;0．05)；RPMI1640组优于MEM组和DMEM组(P&;lt;0．05)；3T3细胞滋养层组与巨噬细胞滋养层组结果相似(P&;gt;0．05)。结论：兔角膜缘上皮细胞具有血清依赖性和低温耐受性。