HPLC法测定绞股蓝中总槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量

目的：建立测定绞股蓝中槲皮素、山柰素和异鼠李素含量的HPLC方法。方法：色谱柱为Hypersil ODS2（250mm×4．6mm,5μm）;流动相为甲醇-0．4％磷酸水溶液（50：50,V／V）;流速0．78ml·min^-1;检测波长为360nm;柱温为25℃。结果：槲皮素、山柰素和异鼠李素均可达基线分离,其线性范围分别为20．02～100．10μg·ml^-1（r=0．9999）,12．16～60．80μg·ml^-1（r=0．9999）,1．45～7．26μg·ml^-1（r=0．9998）。平均加样回收率分别为97．32％（RSD=1．09％）,97．75％（RSD=1．06％）,97．29％（RSD=1．29％）。结论：该方法简单、快速、准确,可用于绞股蓝药材的质量控制。     

反相高效液相色谱-二极管阵列检测法测定驱白马日白热斯丸中槲皮素和山奈酚的含量

目的建立反相高效液相色谱-二极管阵列检测(RP-HPLC-PAD)法测定维吾尔成药驱白马日白热斯丸中槲皮素和山奈酚含量。方法色谱柱:安捷伦HC-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(47∶53);检测波长:365 nm;柱温:30℃;流速:1.0 m L·min-1。结果槲皮素和山奈酚分别在0.5~30.0μg·m L-1(r=0.999 9)和0.5~20.0μg·m L-1(r=0.999 8)浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.2%(RSD=1.18%,n=5)和96.9%(RSD=1.22%,n=5)。结论该方法简便、快速、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为该药物的定量分析方法 ,为进一步开发利用维药资源提供了参考依据。     

元宝草的化学成分研究

目的：对元宝草的化学成分进行研究。方法：利用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20和大孔树脂柱层析对化合物进行分离，并利用光谱技术和理化性质进行结构鉴定。结果：从元宝草乙醇提取液的二氯甲烷萃取物中分离得到5个化合物，鉴定为二十八烷醇（octacosanol，化合物1）、三十烷酸（triacontanoic acid，化合物2）、豆甾醇（stigmasterol，化合物3）、苯甲酸（benzoic acid，化合物4）和1-羟基-7-甲氧基咕吨酮（1-hydroxy-7-methoxy-xanthone，化合物5）；从乙酸乙酯萃取物中分离得到3个化合物，鉴定为没食子酸（3，4，5-trihydroxy-benzoic acid，化合物6）、槲皮素（quercetin，化合物7）和1，3，6，7-四羟基咕吨酮（1，3，6，7-tetrahydroxy-xanthone，化合物8）。结论：除化合物7以外，其余7个化合物均为首次从元宝草中分离得到。     

HPLC法同时测定太子金颗粒中5种成分

目的建立HPLC法同时测定太子金颗粒(太子参、枳实、砂仁等)中5种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.4%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;检测波长254 nm(金丝桃苷、槲皮素)、283 nm(橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷)。结果橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷、金丝桃苷、槲皮素分别在0.060 80~0.608 0μg(r=0.999 7)、0.009 202~0.092 02μg(r=0.998 8)、0.016 01~0.160 1μg(r=0.998 9)、0.012 80~0.128 0μg(r=0.999 2)、0.013 20~0.132 0μg(r=0.999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.20%、99.37%、98.89%、100.17%、100.46%,RSD分别为0.80%、0.97%、0.73%、1.10%、1.14%。结论该方法准确、可靠、简便,可用于太子金颗粒的质量控制。     

不同产地火炭母中槲皮素及木犀草素的含量测定

目的:建立火炭母中槲皮素和木犀草素的HPLC含量测定方法。方法:RC(研创)C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.4%磷酸(50∶50)为流动相等度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为360 nm。结果:槲皮素在0.1～1.0μg范围内具有良好的线性关系,r1=0.9998;木犀草素在0.002～0.02μg范围内具有良好的线性关系,r2=0.9990;广西玉林产的火炭母中槲皮素含量最高,广西桂林产的火炭母中木犀草素含量最高。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于药材质量控制。     

三脉紫菀化学成分的分离及其抗补体和抗炎活性的研究

目的活性导向分离鉴定三脉紫菀Aster ageratoides中具有抗补体活性的主要成分,探讨其中活性较好的化合物抗补体主要作用靶点以及抗炎活性。方法采用减压硅胶柱、凝胶sephadexLH-20柱色谱法、中压制备和半制备液相法,对三脉紫菀醋酸乙酯部位进行具有抗补体活性的化学成分分离,其结构通过1H-NMR及13C-NMR进行鉴定;采用红细胞溶血法对分离得到的化学成分进行抗补体活性及其作用靶点筛选;采用脂多糖(LPS)刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞对化合物进行抗炎活性的研究。结果分离得到14个化合物,分别鉴定为齐墩果酸(1)、槲皮素(2)、山柰酚(3)、3,5,7,3′-四羟基-4′-甲氧基黄酮(4)、山柰酚-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(5)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(7)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(8)、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷(9)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(10)、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(11)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(12)、山柰素-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(13)、芦丁(14)。抗补体实验结果表明,14个化合物都具有一定的抗补体活性,并呈现较好的构效关系。抗补体靶点研究结果表明,化合物1作用于补体系统的C1q、C5、C9组分,化合物2作用于补体系统的C1q、C2、C5、C9。抗炎活性研究表明化合物能明显抑制一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的释放,且能明显抑制诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和环氧化酶-2(COX-2)的表达。结论分离得到14个化合物,其中化合物1、4、6、9、12、13为该植物中首次发现。这14个化合物具有一定程度的抗补体活性,且化合物2具有明显的抗炎活性。     

二氢槲皮素对局灶性脑缺血损伤模型大鼠血液流变学等相关指标的影响

目的:观察二氢槲皮素(DHQ)对局灶性脑缺血损伤模型大鼠血液流变学等相关指标的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组(阳性对照,20 mg/kg)和DHQ低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),每组10只。各给药组大鼠均灌胃相应药物,假手术组大鼠灌胃等体积0.4%羧甲基纤维素钠溶液,每天1次,连续14 d。末次给药后,除假手术组外的其余各组大鼠均采用传统双侧颈总动脉结扎法复制局灶性脑缺血损伤模型。缺血24 h后,观察各组大鼠脑组织病理学变化,并检测其血液流变学指标[全血黏度(低、中、高切)、全血还原黏度(低、中、高切)、血浆黏度]、红细胞参数[红细胞压积、红细胞聚集指数(EAI)、红细胞变性指数(DI)、红细胞刚性指数(IR)]、凝血功能指标[活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(FIB)]水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织细胞疏松,间隙明显,缺血区周围神经元损伤明显,且全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红细胞压积、EAI、IR、FIB水平均显著升高,DI、APTT、PT、TT均显著降低或缩短(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠上述症状均有不同程度的改善,且尼莫地平组大鼠全血黏度、血浆黏度、EAI、IR,DHQ高剂量组大鼠全血黏度、红细胞积压,DHQ各剂量组大鼠血浆黏度、EAI,DHQ中、高剂量组大鼠IR均显著降低;尼莫地平组大鼠DI、APTT、PT、TT,DHQ各剂量组大鼠DI、APTT、TT,DHQ高剂量组大鼠PT均显著升高或延长(P<0.05或P<0.01)。而其余指标组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:DHQ对局灶性脑缺血损伤模型大鼠具有一定的保护作用,其作用机制可能与改善其血液流变学指标以及凝血功能异常有关。     

槲皮素对大鼠宫颈炎的治疗作用

目的探讨槲皮素对大鼠宫颈炎的治疗作用及机制。方法将50只Sprague Dawley大鼠随机分为正常对照组、宫颈炎组、消糜阴道泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组,每组10只。宫颈炎组、消糜阴道泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组大鼠制备宫颈炎模型,将注射器插入大鼠阴道约1 cm处,注射250 g·L~(-1)苯酚胶浆0.1 mL,每日2次,连续5 d,至大鼠阴道有白色分泌物及阴道红肿、充血时,再次注射1次苯酚胶浆。对照组大鼠阴道内注射赋形剂0.1 mL。造模成功后,消糜阴道泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组大鼠分别于阴道深处注射10 g·L~(-1)消糜阴道泡腾片溶液(50 mg·kg~(-1))、10 g·L~(-1)槲皮素溶液(25 mg·kg~(-1))、10 g·L~(-1)槲皮素溶液(100 mg·kg~(-1)),每日2次,连续10 d;对照组和宫颈炎组大鼠给予生理盐水。连续给药10 d后处死大鼠。采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠宫颈组织病理形态学改变,酶联免疫吸附试验检测大鼠宫颈组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和甘露糖结合凝集素(MBL)水平,Western blot法检测大鼠宫颈组织中核因子-κB(NF-κB) p65蛋白表达。结果 HE染色显示,正常对照组大鼠宫颈组织未见明显异常改变。宫颈炎组大鼠宫颈黏膜鳞状上皮细胞变性、坏死、脱落;黏膜及黏膜下固有层充血水肿,淋巴细胞和中性粒细胞等炎细胞浸润明显,可见部分脓性渗出物及坏死组织。与宫颈炎组比较,消糜阴道泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组大鼠宫颈黏膜病理改变显著减轻。宫颈炎组大鼠宫颈组织中ICAM-1、IL-1β及MBL水平显著高于正常对照组(P<0.05),消糜泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组大鼠ICAM-1、IL-1β及MBL水平显著低于宫颈炎组(P<0.05),消糜泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组大鼠ICAM-1、IL-1β及MBL水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组、宫颈炎组、消糜泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组大鼠宫颈组织中NF-κB p65蛋白相对表达量分别为0.13±0.02、0.68±0.03、0.39±0.02、0.37±0.02、0.38±0.02;宫颈炎组大鼠宫颈组织中NF-κB p65蛋白相对表达量显著高于正常对照组(P<0.05),消糜泡腾片组、低剂量槲皮素组和高剂量槲皮素组大鼠宫颈组织中NF-κB p65蛋白相对表达量显著低于宫颈炎组(P<0.05),低剂量槲皮素组、高剂量槲皮素组和消糜泡腾片组大鼠宫颈组织中NF-κB p65蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论槲皮素能够抑制宫颈组织中NF-κB p65、ICAM-1、IL-1β和MBL的表达,改善大鼠宫颈炎症反应,对大鼠宫颈炎有一定的疗效。     

逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的网络药理学机制研究

目的 运用网络药理学技术探讨逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的作用机制。方法 通过TCMSP、PubChem、OMIM、GeneCards以及UniProt等数据库获得逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的作用靶点；利用STRING网站得到蛋白互作网络；并通过Metascape网站对潜在作用靶点进行富集分析；使用Cytoscape软件绘制“靶点-成分-通路”可视化网络图。结果 逍遥散主要通过芍药苷、刺槐素、儿茶素、槲皮素等化学成分和文拉法辛联合作用发挥抗抑郁作用。逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的相关靶点共208个，主要为酪氨酸蛋白激酶（SRC）、信号转导和转录激活器3（STAT3）、转录因子AP-1（JUN）、丝裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）等。这些主要靶点作用于糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路（AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications）、癌症通路（pathways in cancer）等43条通路，调节对受损的应答（response to wounding）、对无机物的应答（response to inorganic substance）以及细胞成分运动的正向调节（positive regulation of cellular component movement）、血液循环（blood circulation）和有机羟基化合物代谢过程（organic hydroxy compound metabolic process）等生物学过程发挥抗抑郁作用。结论 逍遥散与文拉法辛联用通过多靶点、多通路发挥抗抑郁作用，利用网络药理学预测中西药联合治疗疾病的作用机制值得深入探讨。     

赶黄草对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用及机制

目的探讨赶黄草对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用及机制。方法随机选择140例大鼠,喂以1.5%的硫酸亚铁饲料进行饲养,并进行灌胃乙醇制作酒精性脂肪肝大鼠模型。将所有大鼠随机分为正常对照组、模型组、赶黄草提取物高剂量、低剂量组、槲皮素高剂量、低剂量组、硫普罗宁组共七组,用药大鼠均灌胃给药,1次/d,连用6 w。计算肝脏系数,并行肝组织油红O染色,于光镜下观察肝脏脂肪浸润情况,对比肝细胞脂滴面积,并检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)含量。结果 1相比正常对照组,模型组大鼠反应迟钝,体重明显减轻,肝脏指数明显增加(P0.05);相比模型组,各用药组大鼠体重增加显著,肝脏指数明显下降(P0.05)。2油红O染色脂滴半定量分析后显示,赶黄草提取物各剂量组同模型组比较均有明显差异(P0.05)。3相比正常对照组,模型组血清ALT、AST、TC、TG水平均增加(P0.05);相比模型组,各用药组血清ALT、AST、TC、TG水平均降低(P0.05);相比槲皮素各组,赶黄草各提取物组ALT、AST、TC、TG水平均降低(P0.05)。结论赶黄草对大鼠酒精性脂肪肝有明显保护作用,与其中含有的槲皮素及其他化学成分有关。