十字饱碱逆转耐药性KB细胞多药抗药性的机制

目的:研究蛋白激酶C抑制剂十字饱碱(staurosporine,ST)逆转耐长春新碱KB细胞(简称KB/VCR)的机制。方法:用MTT法比较ST作用前后KB/VCR细胞耐药性的改变,用流式细胞术观察KB/VCR药物代谢的变化,用RTPCR法和免疫组织化学方法研究耐药膜糖蛋白(Pglycoprotein,Pgp)、耐药相关蛋白(multidrugresistanceassociatedprotein,MRP)和肺耐药蛋白(lungcancerresistancerelatedprotein,LRP)在细胞mRNA水平和蛋白水平上的表达。结果:1ng/mLST使KB/VCR细胞耐药性下降了158倍。亲本株KB/S细胞几乎不表达Pgp,而KB/VCR细胞却近100%强表达Pgp,P=0.004;ST使KB/VCR细胞的Pgp表达强度明显降低,但阳性率未见明显改变。MRP在两种细胞的基因转录水平和蛋白水平均呈现弱表达,ST也不影响其表达。1ng/mLST作用24h后,KB/S和KB/VCR细胞的LRP在mRNA水平及蛋白水平上表达指数均明显地高出用药前,P=0.006。结论:ST可通过降低Pgp表达强度和药物外排功能来逆转肿瘤细胞的多药抗药性,但这种作用可部分地被LRP蛋白表达增强所抵消。     

肺癌组织中P-选择素和nm23蛋白的表达及其与肿瘤转移的关系

目的探讨P-选择素和nm23蛋白的表达与肺癌转移的关系。方法用免疫组化法检测20例癌旁肺组织和76例肺癌组织中P-选择素和nm23蛋白的表达。结果P-选择素在肺癌各组织学类型、组织学分级中表达差异无统计学意义,χ2=0.308,P=0.857;在肺癌淋巴结转移组中表达率62.00%(31/50),显著高于无淋巴结转移组34.62%(9/26),χ2=5.145,P=0.023;肺癌Ⅲ期、Ⅳ期中阳性率分别为71.43%(15/21)、82.35%(14/17),显著高于Ⅰ期23.81%(5/21)、Ⅱ期35.29%(6/17),χ2=17.000,P=0.000。nm23蛋白在肺癌各组织学类型、组织学分级、TNM分期中表达差异无统计学意义,χ2=2.952,P=0.086;在癌旁组织和肺癌中表达差异无统计学意义,χ2=1.868,P=0.172;在肺癌淋巴结转移组中表达率60.00%(30/50),显著低于无淋巴结转移组88.46%(23/26),χ2=6.566,P=0.010。结论P-选择素高表达提示肺癌高浸润风险,nm23蛋白对肺癌淋巴结转移起抑制作用,P-选择素高表达和nm23蛋白低表达有明显相关性。     

Survivin基因与肿瘤治疗策略

Survivin基因是近年来发现的重要的凋亡抑制基因,具有抑制凋亡和参与细胞周期调控的双重功能。大量的研究报道了在基础和临床实验中survivin基因与放、化疗的敏感性的密切关系。由于survivin基因的重要功能,加之其具有基因治疗最理想的条件,即它在肿瘤组织中表达率高,与正常组织中的表达相比,它同时具有高特异性的特点,因而目前研究关注于以survivin基因为靶点的基因治疗,抑制survivin基因的表达,增加肿瘤的自发性凋亡和放、化疗诱导的凋亡,抑制肿瘤生长,提高肿瘤对放、化疗的敏感性。基因治疗途径包括:1)改变survivin基因功能区的关键位点,使其不能生成正常功能的蛋白。2)通过黄素蛋白(flavopividol)抑制周期素依赖蛋白激酶(Cdc2)活性,使其不能对survivin Thr(34)位点磷酸化,从而抑制了survivin蛋白的正常功能。3)从RNA水平抑制survivin表达的基因沉默技术。上述研究已得到了可喜的结果,过渡到临床实验是进一步努力的目标。肿瘤防治杂志,2005,12(19):1513-1516     

宫颈病变组织中E-cad和β-cat的表达及其意义

目的:研究上皮性钙黏附蛋白 (epithelial cad,E cad)和β 连接素(β catenin,β cat)在宫颈上皮内瘤样病变 (cervicalintraepithelialneoplasia,CIN)和 宫颈鳞癌中的表达及其意义。方法:应用 SP法检测E cad和β cat在正常宫颈上 皮、CINⅠ级、CINⅡ～Ⅲ级及宫颈鳞癌组 织的表达。结果:正常宫颈中E cad和β cat为膜表达。E cad表达在正常宫颈 CINⅠ级、CINⅡ～Ⅲ级和宫颈鳞癌中分别 为86%(12/14)、82%(9/11)、54%(7 13)和21%(8/38);β cat膜表达率分别为 79%(11/14)、64%(7/11)、23%(3/13)和 11%(4/38);E cad表达在正常宫颈与鳞 癌之间、CINⅠ级与鳞癌之间的差异有统 计学意义,P<0.05;在鳞癌的不同病理学 分级和肌层浸润深度之间的差异有统计 学意义,P<0.05。β cat表达在正常宫颈 与CINⅡ～Ⅲ级、宫颈鳞癌以及CINⅠ级 与鳞癌之间差异有统计学意义,P<0.05 在宫颈鳞癌的不同病理分级之间差异有 统计学意义,P<0.05。宫颈鳞癌中,E cad与β cat的表达形式具相关性,P< 0.001。结论:E cad和β cat异常表达是 宫颈上皮性肿瘤进展的早期事件;在宫颈 浸润性鳞癌中,它们的异常表达可能与肿 瘤的侵袭潜能有关。     

p27kip1的过表达对肾癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究外源性 p27kip1 基因对肾癌细胞周期、细胞凋亡及增殖的影响。方法:将含p27cDNA的质粒在脂质体介导下在体外转染肾癌GRC 1细胞,Western Blot、FCM及MTT检测分析外源性 p27kip1 蛋白在细胞内的表达,观察其对细胞周期、凋亡及细胞增殖的影响。结果:体外转染 GRC 1 细胞 48 h 后, p27 蛋白在p27kip1转染后的 GRC 1 细胞中高表达。FCM检测表明,细胞停滞于 G1 期,实验组 G1 期细胞占66 9%,并出现亚G1 凋亡峰;而空白对照组和转染空载体组 G1 期细胞分别为 32 2% 和33 8%。MTT 法检测表明,转染 p27cDNA 后,实验组细胞增殖明显受抑。结论: p27kip1 基因在体外转染GRC 1细胞并过表达p27kip1蛋白,抑制细胞由G1 期向 S期过渡,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

纤维支气管镜抽吸物中检测HnRNP A2/B1在肺癌诊断中的价值

目的:研究纤维支气管镜(简称纤支镜)抽吸物中异质性细胞核核糖蛋白A2/B1(HnRNP A2/B1)的表达与肺癌的相关性及其用于肺癌诊断的可行性。方法:利用免疫细胞化学的方法检测经病理学或(和)细胞学确诊的肺癌患者和非肺癌患者的纤支镜抽吸物中HnRNP A2/B1的表达情况,并分析其表达水平的差异性。结果:1) HnRNP A2/B1 在肺癌组和非肺癌组患者纤支镜抽吸物中表达阳性率分别为68. 6%(83/121)和13. 6%(3/22),两组比较差异有统计学意义,P<0. 05。2) HnRNPA2/B1在不同病理类型中表达阳性率也不同,鳞癌为67. 6% ( 50/74 ), 腺癌为60. 0%(18/30),小细胞癌为88 2%(15/17),差异有统计学意义,P< 0 .05。结论: HnRNP A2/B1 在肺癌患者纤支镜抽吸物中表达的敏感性为68 .6%(83/121),特异性为86. 4%(19/22),可用于肺癌的诊断。     

热休克对人胶质瘤热休克蛋白70表达水平的影响

目的:应用热休克人胶质瘤细胞的方法,观察热诱导热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)在人胶质瘤细胞的表达。方法:经43℃热处理2h的人胶质瘤细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)及免疫组化技术检测HSP70mRNA及蛋白的表达情况。结果:热休克蛋白人胶质瘤细胞表达阳性率为(39.40±14.40)%,对照组为(8.50±4.60)%及HSP70mRNA表达光密度值为0.23±0.05,对照组为0.13±0.03与内参照βactin比值经单因素方差分析q检验显示与对照组相比有明显的升高。结论:热休克的方法可以明显诱导人胶质瘤细胞HSP70的表达。     

环丙沙星临床应用中需要注意的问题

环丙沙星(ciprofloxacin)为合成的第三代喹诺酮类抗菌药物，具有杀菌力强，抗菌谱广，在组织中易于分布等特点，临床应用日益广泛。为了更安全有效合理地使用环丙沙星，笔者认为在临床应用中需注意以下几个问题：     

寡糖对免疫系统作用的研究进展

介绍了寡糖对非特异性免疫系统中巨噬细胞自然杀伤细胞以及补体的激活作用;寡糖对特异性免疫系统中B细胞和T细胞的调节作用;以及寡糖在抗肿瘤、作为人类免疫缺陷病毒(HIV-1)疫苗方面的应用。     

含马兜铃酸植物药的毒性概述

马兜铃酸( Aristolochic acid)是关木通、广防己、马兜铃、天仙藤、青木香、寻骨风和朱砂莲以及铁线莲马兜铃、蛇根马兜铃、印度马兜铃等 10余种马兜铃科马兜铃属植物药中的一类菲类化合物,主要由马兜铃酸 A、 B、 C、 D、 E等及其衍生物组成.近年来,随着因服用含马兜铃酸的植物药导致肾损害的报道不断出现,人们对马兜铃酸的毒性越发关注.