红花注射液对脂多糖诱导的兔弥散性血管内凝血的作用

 目的：研究红花注射液对脂多糖（LPS）诱导的兔弥散性血管内凝血（DIC）的作用。方法：兔耳缘静脉持续滴注LPS建立兔DIC模型。采用全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间（APTT）和凝血酶原时间（PT）;凝固法测定纤维蛋白原含量;全自动血细胞分析仪进行血小板计数;发色底物法测定蛋白C及抗凝血酶Ⅲ的活性;全自动血浆分析仪测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）和血尿素氮（BUN）;ELISA法检测血浆纤维蛋白（原）降解产物（FDP）和肿瘤坏死因子 α（TNF-α）含量。结果：DIC模型组APTT和PT进行性延长,ALT活性和BUN含量显著升高,蛋白C和抗凝血酶Ⅲ的活性显著降低,血小板计数进行性减少,血浆FDP和TNF-α含量显著升高。给予红花注射液后,DIC模型兔APTT和PT的延长明显缩短,血小板计数、纤维蛋白原含量、蛋白C及抗凝血酶Ⅲ活性均明显恢复,血浆ALT、BUN、FDP和TNF-α水平均明显降低。结论: 红花注射液对LPS诱导的兔DIC有较好的拮抗作用。     

腺苷A2A受体激动剂CGS21680对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

 目的：探讨腺苷A2A受体激动剂对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠的作用。方法：采用LPS（10 mg/kg）气管内注射6 h后的ALI小鼠模型。实验动物随机分为生理盐水对照组、ALI组、CGS21680治疗组和CGS21680对照组。测定各组6 h后肺湿重/干重比值（W/D）。比色法测定各组肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性。Western blotting分析各组肺组织中细胞间黏附分子1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子1（VCAM-1）的表达。酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组小鼠血清中单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的浓度。观察各组肺组织病理改变。结果：ALI组肺W/D、MPO活性、ICAM-1及VCAM-1表达和MCP-1浓度均较对照组显著升高。CGS21680治疗组前述各项指标较ALI组有显著下降。CGS21680组较对照组各项指标无显著差异。肺组织病理显示,ALI组可见肺间质明显充血水肿,大量炎症细胞浸润,部分肺泡腔内可见红细胞。CGS21680治疗组可显著改善肺组织的病理变化。结论：腺苷A2A受体激动剂CGS21680可明显减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织的炎症反应及肺组织水肿,提示腺苷A2A受体激动剂在急性肺损伤中具有保护作用。     

布地奈德对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨布地奈德对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤的影响。方法将30只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为3组:对照组、LPS组和布地奈德组,每组10只。采用经气管插管给予LPS(5 mg/kg)制备大鼠急性肺损伤模型;布地奈德组给予LPS 24 h后经气道给予布地奈德(500μg/kg)。3组均于48 h后测定肺水清除率,称量肺湿干重比,采用酶联免疫吸附试验测定支气管肺泡灌洗液中白细胞介素1β的水平,HE染色观察肺组织病理学改变,免疫组织化学法观察细胞间黏附分子1的表达。结果与LPS组相比,布地奈德干预后,肺组织结构破坏明显减轻,炎症细胞浸润减少,肺水清除率提高(P值均<0.01),肺湿干重比降低(P<0.05),支气管肺泡灌洗液中蛋白含量及中性粒细胞、巨噬细胞等的渗出减少(P<0.05或P<0.01),细胞间黏附分子1表达减少。结论布地奈德对LPS诱导的急性肺损伤大鼠具有肺保护作用,其机制考虑与减少细胞炎症反应、减少炎症因子对内皮细胞的活化、加强肺水清除作用有关。     

辣椒素对脂多糖诱导血管内皮细胞活化的影响及机制

 目的:探讨辣椒素对脂多糖（LPS）刺激后小鼠主动脉内皮细胞活化的影响,并探讨其可能机制。方法:（1）体外分离培养小鼠主动脉内皮细胞,免疫荧光鉴定内皮细胞特异性标志。（2）以100 μg/L LPS作用于血管内皮细胞后,以不同浓度的辣椒素（50 μmol/L、100 μmol/L和200 μmol/L）进行干预,分别于12、24和48 h收集主动脉血管内皮细胞及细胞上清液。采用ELISA法检测各组细胞上清液中的可溶性细胞间黏附分子 1（sICAM-1）、可溶性血管细胞黏附分子 1（sVCAM-1）和可溶性P-选择素(sP-selectin)水平,Western blotting法检测各组主动脉血管内皮细胞核内NF-κB p65水平和胞浆p-IκBα、IκBα水平。结果:与对照组相比,LPS组细胞上清液中sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1含量显著升高（P<0.05）, LPS能够时间依赖性上调sICAM-1和sVCAM-1的含量。与同时点的LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1水平。与对照组相比,LPS作用24 h后, 细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白水平显著升高（P<0.05）,胞浆IκBα蛋白水平显著降低（P<0.05）。与同时点LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白的水平（P<0.05）,剂量依赖性上调胞浆IκBα蛋白水平（P<0.05）。结论: 辣椒素能够显著抑制LPS作用后血管内皮细胞活化水平,该效应可能是通过下调IκBα降解和NF-κB p65胞核内转位而实现的。     

骨髓来源间充质干细胞培养上清液减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

 目的:观察经尾静脉输注骨髓间充质干细胞培养上清液（MSCs CdM）对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制。方法:采用全骨髓培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,传至第3代时观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志,并且收集上清液用超滤离心管进行离心。30只BALB/c小鼠随机分为对照组、 LPS模型组和MSCs CdM治疗组。对照组腹腔内注射生理盐水（0.01 mL/g）,LPS组和MSCs CdM治疗组腹腔内注射LPS（5 mg/kg,0.01 mL/g）制备急性肺损伤模型。造模1 h后经尾静脉输注MSCs CdM（MSCs  CdM治疗组）或生理盐水 （LPS组或对照组）300 μL。6 h后处死小鼠,留取标本检测肺组织病理形态学、肺组织湿干重比（W/D）、支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量、血清及BALF中细胞因子水平和肺组织中髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果:与对照组比较,LPS处理后肺组织病理损伤严重,BALF中蛋白、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著升高。与LPS组比较,MSCs CdM治疗组肺组织病理损伤程度减轻,BALF中蛋白、血清TNF-α和IL-6含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著降低,而BALF中白细胞介素10（IL-10）和角质细胞生长因子（KGF）水平显著高于LPS组和对照组。结论:骨髓间充质干细胞培养上清液可有效减轻LPS诱导的急性肺损伤,其作用机制可能与其调节肺部TNF-α、IL-6、IL-10和KGF的水平有关。     

白茅根多糖对IgA肾病大鼠肾组织学病变及血清白细胞介素2和6的影响

目的观察白茅根多糖对IgA肾病大鼠肾组织学病变及血清白细胞介素(IL)2、IL-6含量的影响。方法 50只大鼠随机分为正常对照组、模型组、白茅根多糖低剂量组、白茅根多糖高剂量组和地塞米松组,每组10只。复合免疫法建立IgA肾病大鼠模型,于造模后第9周起白茅根多糖高、低剂量组及地塞米松组分别给予白茅根多糖20 mg·kg-1·d-1、10 mg·kg-1·d-1或地塞米松2 mg·kg-1·d-1,灌胃4周。检测各组大鼠尿红细胞、24 h尿蛋白,血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、IL-2、IL-6水平,并观察大鼠肾脏病理学改变。结果大鼠IgA肾病模型造模成功,模型组电镜观察见电子致密物沉积、系膜细胞增生、足突融合明显;尿红细胞数、24 h尿蛋白、血Scr、BUN、IL-6水平、IgA沉积水平均高于正常对照组(P<0.05或P<0.01)。各治疗组与模型组比较,尿红细胞数、24 h尿蛋白水平,血Scr、BUN均明显下降(P<0.01),白茅根多糖高剂量组血清IL-2和IL-6水平低于模型组(P<0.05或P<0.01),肾脏组织病理学异常改善。结论白茅根多糖可改善IgA肾病大鼠肾功能、降低IgA在系膜区的沉积,降低血清IL-2和IL-6水平可能是其作用机制之一。     

白细胞介素-4负调控NF-κB通路抑制炎症反应的机制研究

摘要：目的 探讨白细胞介素（IL）-4 对于脂多糖（LPS）诱导的 Ana-1 细胞髓样分化因子 88（MyD88）/核因子 （NF）-κB信号通路的影响。方法 将小鼠巨噬细胞Ana-1分为LPS组（给予50 μg/L LPS刺激）和LPS+IL-4组（10 μg/L IL-4预培养1 h后,给予LPS 刺激）。在0、0.5、1和2 h时收集细胞培养上清液。采用RT-PCR 检测MyD88和 NF-κB mRNA的相对表达水平;Western blot法检测MyD88、NF-κB总蛋白、NF-κB p65蛋白表达水平;ELISA法检测 NF-κB p65胞核/胞浆比例,以及细胞培养上清液中IL-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α含量。结果 随着细胞培养时间 的延长,LPS组MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平,NF-κB p65胞核/胞浆比例,IL-6和TNF-α水平均呈逐渐升高 的趋势（P＜0.05）;而 LPS+IL-4 组 MyD88 mRNA 表达水平无明显变化（P＞0.05）,MyD88 蛋白表达水平、NF-κB mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平则均呈先升高后降低的趋势（P＜0.05）;LPS+ IL-4组MyD88 mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平在1 h和2 h时显著低于LPS组 （P＜0.05）,而2组不同时间点NF-κB mRNA和蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 IL-4发挥 抗炎作用可能与抑制MyD88/NF-κB信号通路活化有关,IL-4可下调促炎细胞因子IL-6和TNF-α的表达。     

水飞蓟宾对内毒素血症心肌损伤的保护作用及机制

摘要：目的探究水飞蓟宾（SIL）对小鼠内毒素血症心肌损伤的保护作用和分子机制。方法24只C57BL/6小鼠分为对照（Control）组、SIL组、LPS组、LPS+SIL组,每组6只。通过腹腔注射脂多糖（LPS,10 mg/kg）制备内毒素血症心肌损伤小鼠模型。LPS注射前3 d,SIL组和LPS+SIL组每日通过灌胃方式给予SIL（100 mg/kg）,共给药3次;Control组和LPS组每日通过灌胃方式给予等量（0.2 mL）生理盐水,共灌胃3次。LPS注射6 h后超声检测各组小鼠心脏收缩功能;ELISA检测血清IL-1β和TNF-α表达水平;DHE染色观察各组小鼠心肌组织内活性氧（ROS）产量;TUNEL染色检测心肌凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase 3和NOX2表达。结果与Control组相比,LPS组小鼠左心室射血分数、左心室短轴缩短率和Bcl-2表达量明显降低,而ROS产量、NOX2、Bax、Caspase 3、IL-1β与TNF-α表达量以及心肌凋亡率明显增加（P＜0.05）。与LPS组相比,LPS+SIL组经水飞蓟宾预处理后可明显改善LPS引起的上述改变（P＜0.05）。与Control组相比,单纯给予SIL干预对上述指标的变化无明显影响（P＞0.05）。结论水飞蓟宾可有效缓解内毒素血症心肌损伤,其作用可能与抑制氧化应激、炎症反应和抗凋亡有关。     

海螵蛸多糖CPS-1对小鼠实验性溃疡性结肠炎作用的初步观察

目的:探讨海螵蛸多糖相对均一组分--CPS-1对小鼠实验性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用.方法:采用DSS诱导法建立小鼠UC模型,以SMZ-TMP为对照,通过临床症状、体质量改变、局部肠黏膜(溃疡发生)改变情况等指标对高、低剂量CPS-1对UC小鼠的保护作用进行初步观察.并采用ELISA方法测定了小鼠血清中某些内皮增殖及炎症相关的细胞因子的含量变化.结果:海螵蛸多糖治疗组小鼠模型建立后的体质量没有明显降低,小鼠的一般生长情况都良好,血清中EGF和PDGF的含量较模型建立前明显增加,而TNF-α的含量与阳性对照组相比则明显降低(P<0.05).结论:海螵蛸多糖CPS-1能够明显的提高UC小鼠血液中EGF和PDGF的含量,加速溃疡组织的愈合;同时降低TNF-α的表达,从而缓解炎症.因此,海螵蛸多糖CPS-1能够加速溃疡组织的愈合和修复过程.     

激素联合内毒素所致骨坏死微循环障碍超微结构观察

目的:观察激素联合内毒素所致骨坏死骨内微血管内皮表面的超微结构损害和血栓形成. 方法:实验动物分为模型组和正常对照组. 模型组前2 d间隔24 h于静脉缓慢注射脂多糖(LPS),每次剂量30 μg/kg;第3～8日静脉注射地塞米松,1次/d,剂量7.5 mg/kg. 对照组给予生理盐水0.5 mL/kg. 满8 wk时取材前,股骨头压力灌注肝素钠、100 mL/L中性甲醛固定液. 一半股骨头标本制备脱钙切片,苏木素-伊红染色,观察骨坏死情况. 另一半标本制备不脱钙切片,脱掉包埋剂,临界点干燥、喷金、扫描电镜观察软骨下微血管内皮表面超微结构改变. 结果:模型组股骨头软骨下微血管内皮表面凹凸不平,管腔不规则,可见管腔填塞、血栓形成;此结果与组织学观察结果一致. 结论:激素联合内毒素所致骨坏死微循环障碍的主要表现为微血管内皮损伤和微血栓形成.