β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究

为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在 Golgi复合体参与蛋白质的糖链修饰     

吲哚美辛的新应用

吲哚美辛 (Ｉｎｄｏｍｅｔｈａｃｉｎ ,ＩＭ)为非甾体抗炎药 ,是一种前列腺素 (Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ ,ＰＧ)合成抑制剂。自 6 0年代问世以来 ,主要应用于骨、关节等疾病的治疗。近年来随着研究的深入 ,其应用范围不断的扩大。由于该药对胃肠道刺激和中枢神经系统的不良反应 ,使10 %～ 2 0 %的病人不能坚持接受治疗。国内外通过改变给药途径来克服其不良反应 ,剂型较多。中国药典2 0 0 0版收载了六种剂型 ,分别是肠溶片剂、乳膏、贴片、栓剂、胶囊剂和搽剂。除此之外 ,其它剂型也有研究。以下仅就近年ＩＭ在肿瘤治疗、儿科、妇产科和…     

川赤芍实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

川赤芍与芍药共同作为《中国药典》著名药材赤芍的基原植物,具有重要的药用价值,且在花卉市场的潜力巨大。筛选稳定可靠的内参基因是开展川赤芍分子研究的必要前提。该研究从川赤芍的转录组数据中选取Actin和GAPDH 2个内参基因作为候选基因,利用实时荧光定量技术(qRT-PCR)检测2个候选基因在川赤芍的不同组织(韧皮部、木质部、茎、叶、叶柄、子房)和不同生长时期(萌动期、开花期、休眠期)的表达水平,然后利用geNorm、NormFinder、BestKeeper、ΔCT和RefFinder综合分析2个内参基因表达的稳定性,结果表明Actin和GAPDH在川赤芍不同组织和不同生长时期中的表达模式均稳定。该研究进一步检测川赤芍转录组数据中8个基因(Pv-TPS01、Pv-TPS02、Pv-CYP01、Pv-CYP02、Pv-CYP03、Pv-BAHD01、Pv-UGT01、Pv-UGT02)在不同组织中的表达水平,结果表明,以Actin和GAPDH分别作为内参基因,8个基因在川赤芍不同组织部位的表达趋势均一致,验证了Actin和GAPDH作为川赤芍内参基因的可靠性。综上,该研究发现Actin和...     

血脂与体外血栓形成的关系

应用国产ＤＪＨ－Ｉ型调速单型血栓形成仪，对４７４名４５岁以上成人体外血栓形成进行了检测，同时检查血脂水平。另外对部分隐性体外血栓阳性者及正常人的红细胞膜荧光偏振度（Ｐ）和微粘度（η）进行比较。结果表明：隐性体外血栓阳性者中血脂增高者为５７／１０９（５４．１２％），其中一级血栓３２／７５（４２．６％），二级血栓１１／１６（６８．７％），三级血栓１４／１８（７７．７％）。红细胞膜Ｐ和η在隐性体外血栓阳性者与正常人之间有显著差异（Ｐ＜０．０５）。提示：隐性体外血栓检测对临床心脑血管的血栓性疾病的早期预防、治疗有较大的参考价值     

新生隐球菌荚膜基因CAP60与荧光蛋白融合表达系统的构建

荚膜是新生隐球菌的主要毒性因子 ,目前Ｃｈａｎｇ等已克隆了 4种荚膜基因 :ＣＡＰ5 9、ＣＡＰ6 4、ＣＡＰ6 0及ＣＡＰ10。已知这 4种基因对新生隐球菌的荚膜形成都是必须的 ,缺失任何一个基因都会使新生隐球菌变成无荚膜表型。搞清荚膜形成的任何一个生理、生化机制都将在新生隐球菌的临床诊断和治疗上带来突破性的进展。我们建立荧光蛋白作为标记与荚膜基因ＣＡＰ6 0融合表达 ,为进一步的研究创造条件。根据已知的ＣＡＰ6 0基因序列设计ＰＣＲ引物 ,上游为 5′ ＡＴＴＧＣＴＡＧＣＴＴＣＧＡ ＣＡＧＡＣＡＴＴＧＡＧＣＣＣＴ 3′ ,下游引…     

阴道炎患者HPV6/11-DNA定量分析

目的：了解女性阴道炎患者人乳头瘤病毒6／11型（HPV6／11）的感染情况。方法：荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）技术检测258例门诊患者阴道分泌物中HPV6／11的病毒拷贝数。结果：共检出HPV6／11阳性者94例,阳性率36．43％,拷贝数在10^5以上者78例,占阳性者中82．98％,40岁以上年龄组阳性率高且病毒复制量均在10^5以上。结论：（1）中老年阴道炎患者就诊晚,感染重。（2）FQ－PCR检测HPV敏感,快速,准确,特别是其定量特点对临床很有意义。     

三磷酸腺苷生物荧光液闪测定法检测活细胞计数

为建立一种检测活细胞数的方法,作者采用三磷酸腺苷(ATP)生物荧光液闪测定法检测小鼠纤维瘤细胞株L929.ATP标准曲线工作范围为10 -9～10-5mol/ml,相关系数r=0.9963(P＜0.001);当活细胞数在3×1 02～106个/ml时与发光计数值有良好的线性关系,r=0.9922(P＜0.001),变异系数 CV = 1%～3%.用ATP生物荧光液闪测定法检测活细胞数灵敏、简便、准确、重复性好,用液闪计数仪即可完成测定,有较大的实用价值.     

吲达帕胺过量致阿-斯综合征1例

1 病例报告：患男,80岁。因反复胸闷、心悸、气急3年,加重10天,伴夜间阵发性呼吸困难就诊。体检：血压180／80mmHg,颈静脉显露,两肺底有湿罗音,心界向左扩大,心尖区有抬举样搏动,心率60次／分,律齐,未闻杂音。心脏摄片：心脏横径增大,呈普大型,心胸比例0．6,两肺纹理增多、紊乱、模糊。心电图：窦性心律,完全性右束支传导阻滞伴左前分支阻滞。诊断：高血压性心脏病,心功能不全。给予吲达帕胺(重庆药友药业有限公司生产)2．5mg,1日1次,症状逐渐消失。由于患年迈不清,10天竟误服44片(110mg),于服药第11天凌晨突然神志不清,手足乱动。     

基因DNA双链四色荧光单道测序的实验研究

作者采用四色荧光单道法对ＰＣＲ产物双链直接测序,通过改进操作方法,获得成功。1　材料与方法1.1　材料手术留标本或纤维支气管镜钳取病变或可疑病变组织,用生理盐水于4℃保存,同时送病检对照。310型ＤＮＡ测序仪,2400型ＰＣＲ仪为美国ＰＥ公司产,微量高速离心机为北京六...     

7-硝基吲唑对大鼠脑缺血再灌流保护作用的研究

目的：探讨神经元型一氧化氮合酶抑制剂（ｎＮＯＳＩ）７－硝基吲唑（７－ｎｉｔｒｏｉｎｄａｚｏｌｅ,７－ＮＩ）对脑缺血再灌流保护作用的机理。方法：选用体重１８０－２２０ｇ的雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分组,左颈外动脉管腔内置渔线经颈内动脉送至大脑中动脉内,使之闭塞。