α2-巨球蛋白减轻X射线所致人骨髓间充质干细胞成骨分化障碍

目的:初步探讨α2-巨球蛋白(α2M)对X射线导致的人骨髓间充质干细胞(h BMMSCs)成骨分化障碍的作用。方法:体外培养h BMMSCs,取第4代细胞经8 Gy X射线照射后,进行成骨诱导并以0.5和1.0 g/Lα2M分别作用于照射后的h BMMSCs。成骨诱导的第7天检测碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-q PCR法检测Runt相关转录因子2(RUNX2)的mRNA表达;成骨诱导的第14天采用Western blot检测骨甘氨酸(OGN)的蛋白表达;成骨诱导的第21天采用茜素红染色法检测钙结节的形成情况。此外,正常培养的h BMMSCs于8 Gy X射线照射后加入α2M作用24 h,提取细胞检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,Western blot检测含锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)的蛋白表达。结果:h BMMSCs经8 Gy X射线照射后给予0.5和1.0 g/Lα2M处理,与未加入α2M的单独照射组比较,ALP活性、RUNX2的mRNA表达、OGN和Mn SOD的蛋白表达及SOD活力均升高,钙结节形成增多。结论:α2M可明显提高放射损伤后h BMMSCs的成骨分化能力,上调SOD活力和Mn SOD的蛋白表达水平。     

羧甲基壳聚糖温敏凝胶诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化北大核心

背景:壳聚糖生物材料能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,壳聚糖衍生物羧甲基壳聚糖是否也能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化尚不清楚。目的:探讨羧甲基壳聚糖温敏凝胶对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响及其可能的机制。方法:取传至3代的大鼠骨髓间充质干细胞用不同质量浓度(0,50,100,150,200,500 g/L)羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液培养,对照组不添加羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液。MTT法检测不同质量浓度羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞增殖的影响,Western blot检测150 g/L羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞NSE、Nestin、GAFP、Vimentin、NF-M、MAP-2、β3-tubulin以及Notch通路信号分子Notch1,Jag1表达水平的影响。结果与结论:(1)羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液促进骨髓间充质干细胞增殖,在质量浓度为150 g/L时,增殖率达到最高水平;(2)150 g/L羧甲基壳聚糖温敏凝胶组NSE、Nestin、GAFP、Vimentin、NF-M、MAP-2、β3-tubulin的蛋白表达水平明显高于对照组,表明羧甲基壳聚糖温敏凝胶能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化;(3)羧甲基壳聚糖温敏凝胶组Notch1和Jag1的蛋白表达水平明显低于对照组,表明其在诱导分化过程中能抑制Notch信号通路的活性。     

MDSC在自身免疫疾病中的作用

髓系抑制细胞（Myeloid derived suppressor cells,MDSC）是具有抑制功能的髓系来源的细胞群。在自身免疫疾病中,MDSC显著增多,并在体外有抑制功能,然而在体内研究中,MDSC的研究存在争议。最新研究发现具有抑制功能的MDSC的显著增多并不能有效缓解自身免疫疾病,而且在某些情况下甚至促进疾病的进展。因此,MDSC在自身免疫疾病的作用有待进一步研究。本文根据已有文献,综述了MDSC在不同的自身免疫疾病中的改变及机制。     

脂多糖调控Notch 信号通路作用于人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的实验研究

目的:探讨脂多糖调控Notch 信号通路对人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的影响及机制。方法:从牙髓组织中分离出人牙髓干细胞(hDPSCs),CCK8 实验检测0、0.1、1、10 μg/ ml 的脂多糖处理hDPSCs 1、3、5、7 d 后细胞的增殖情况;RT-PCR 检测1 μg/ ml 的脂多糖处理hDPSCs 0、3、7、14、21 d 后矿化相关基因ALP、DSPP、DMP1 的mRNA 表达情况;流式细胞仪检测1 μg/ ml 的脂多糖处理hDPSCs 0、7、14、21 d 后的细胞凋亡情况;Western blot 检测Cleaved caspase3、Notch1、Hes1 的蛋白表达。结果:不同浓度的脂多糖刺激hDPSCs 1、3、5 d 后细胞的增殖均无显著差异,培养至第7 天时,0.1、1、10 μg/ ml 的脂多糖组细胞的增殖均显著低于0 滋g/ ml 的脂多糖组(P<0.01);脂多糖处理hDPSCs 3 d 时ALP、DSPP、DMP1 的mRNA 表达与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),7、14、21 d 时ALP、DSPP、DMP1 的mRNA 表达均显著高于对照组(P<0.01);脂多糖处理hDPSCs 7、14、21 d 时细胞的凋亡率及Cleaved caspase3、Notch1、Hes1 蛋白表达均显著高于对照组(P<0.01),21 d 时ALP、DSPP、DMP1 的mRNA 表达及细胞凋亡率和Cleaved caspase3、Notch1、Hes1 蛋白表达均有下降趋势。结论:脂多糖可降低hDPSCs 的增殖,促进其矿化和凋亡,其机制与激活Notch 信号通路有关。     

辅助性T细胞亚群的分化调节

ＴＨ１细胞促进细胞免疫,ＴＨ２细胞促进体液免疫,维持ＴＨ１细胞与ＴＨ２细胞之间的平衡有重要的生理意义。正常情况下,机体主要通过ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ及ＩＬ－１２调节ＴＨ１细胞和ＴＨ２细胞之间的平衡。ＣＤ２８分子、Ｂ７分子、Ｔ细胞受体、ＩＬ－１０以及抗原递呈细胞等因素也与调节。     

氧自由基与癌症的再分化治疗

人体正常代谢及病理条件下均可产生氧自由基。越来越多的研究显示氧自由基参与了癌症的发生、发展及转归等各个过程。更新的研究表明,氧自由基可以促使人类的大敌——癌症得以逆转,即癌细胞再分化为正常或接近正常的细胞。这为人类征服癌症提供了全新的观念和思路。     

定向诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化

目的:采用骨髓间充质干细胞体外转化为心肌样细胞,为心衰的干细胞移植治疗提供基础。方法:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,5-氮杂胞苷诱导24h后正常培养,通过形态学、PAS反应、磷钨酸苏木素染色(PTAH)、免疫细胞化学染色作鉴定。结果:诱导细胞以梭形、柱状为主,部分细胞有分支,单个核、卵圆形、居中,似心肌细胞,PAS及PTAH染色均为阳性。诱导后培养2周的细胞表达Sarcomeric Actin和Connexin-43较弱,以后表达逐渐增强,而且1、3、5代细胞均稳定表达。结论:骨髓MSCs可在体外被诱导分化为心肌样细胞,有望成为心衰干细胞移植治疗的理想细胞材料。     

伴有肉瘤样成分的生殖细胞肿瘤

性腺和性腺外生殖细胞肿瘤中存在肉瘤样成分是一种少见的现象，临床后果和生物学意义尚不清楚。作者报道了46例伴有肉瘤样成分的生殖细胞肿瘤（GCTSC），21例位于性腺（睾丸18例、卵巢3例）、纵隔23例和腹膜后2例。男性43例、女性3例，年龄17～74岁，平均27岁。组织学上，91％GCTSC（42例）为成熟或未成熟畸胎瘤，单纯型或混合型，其中25例为单纯型，17例为混合性各种其他类型的生殖细胞肿瘤和畸胎瘤，剩下的为不伴有畸胎瘤样成分的生殖细胞肿瘤。肉瘤样成分包括胚胎性横纹肌肉瘤29例、血管肉瘤6例、平滑肌肉瘤4例、未分化肉瘤3例、[第一段]     

P53和P21在PC12细胞分化中的作用

目的探讨P53及其下游P21蛋白在PC12细胞分化中的可能作用机制。方法用反转录病毒质粒pBabe-P53/m175转染未分化PC12细胞,经筛选后建立野生型P53蛋白功能丧失的细胞系PC12(P53/m175);利用倒置相差显微镜、流式细胞术及Western blot等方法,比较两种细胞在神经生长因子(NGF)作用后,细胞分化表型、细胞周期及相关蛋白表达的改变。结果NGF作用于正常PC12细胞组,P53/P21蛋白表达持续升高,细胞G1期阻滞出现的时间与蛋白表达开始增加的时间相一致;而在NGF作用的PC12(P53/m175)细胞组,细胞不能表达P21蛋白,且细胞周期G1期阻滞的程度也出现显著下降。NGF作用下,两组细胞都能观察到神经突起的生长,表现出明显的分化表型。结论PC12细胞经NGF作用后出现P53及P21蛋白持续表达增加,主要介导了细胞分化过程中细胞周期G1期阻滞这一特征的出现,但并不是导致神经突起进行性生长这一特征的必需条件。     

骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗塞的实验研究

目的研究自体骨髓间充质干细胞(MSC)经冠脉内注射治疗急性心肌梗死(AMI)的有效性和可行性。方法球囊阻塞法制成AMI模型。经冠脉注入标记的MSC,4周后核素心肌断层显像检测相对心肌梗死面积、心肌灌注评分和射血分数,经导管检测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、压力升高最大速率( dP/dt)和压力下降最大速率(-dP/dt)。免疫荧光法分析MSC的植入和分化。结果与对照组相比,细胞治疗组射血分数显著增加(P<0.05),心肌灌注评分和相对心肌梗死面积显著降低(P<0.01,P<0.05),LVSP、 dP/dt和-dP/dt显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01),LVEDP显著降低(P<0.05)。标记的MSC在心肌中阳性表达肌凝蛋白重链、连接蛋白43、平滑肌肌动蛋白和Ⅷ因子相关抗原。结论MSC在体内分化为心肌和血管组织,可改善AMI猪的心功能。