胎鼠脊髓神经干细胞的分离培养、鉴定与诱导分化

目的 探讨胚胎大鼠脊髓神经干细胞分离、培养、传代及鉴定的方法.方法显微解剖分离E14d胚胎大鼠脊髓组织,用机械吹打法制成单细胞悬液,接种于含有表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bF-GF)及N2的DMEM/F12(1:1)无血清培养基中培养,待形成克隆球后进行传代培养.取第3代培养的细胞分别进行Nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定.结果 E14d胚胎大鼠脊髓组织细胞培养72h后可形成悬浮生长的神经球,7～10d后即可传代.经传代扩增后得到大量同源的Nestin免疫阳性的细胞克隆球,经诱导分化后大部分细胞分化为GFAP免疫阳性的星形胶质细胞和CNPase免疫阳性的少突胶质细胞,少量细胞分化为β-Ⅲ-tubulin免疫阳性的神经元.结论成功从胚胎大鼠脊髓组织中分离出神经干细胞,为进一步开展脊髓疾病的细胞移植治疗研究奠定了基础.     

Wistar大鼠胚胎脑源性神经干细胞分离、培养及其鉴定

目的 分离培养、鉴定Wistar大鼠胚胎脑源性神经干细胞.方法 从Wistar大鼠胚胎脑组织中分离胚胎脑源性神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养、传代,应用免疫细胞化学染色对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定.结果 分离培养获得大量悬浮生长的细胞团,该细胞具有连续增殖的能力,并能分化为神经元和神经胶质细胞,经传代培养8代后仍具干细胞特性.结论 Wistar大鼠胚胎脑组织中可成功分离培养神经干细胞,该细胞在体外适宜的条件下能够大量增殖,并具有多向分化潜能.

Abstract：

Objective To isolate and culture the brain-derived neural stem cells (NSCs) from Wistar rat embryos and identify the ability of proliferation and differentiation of NSCs. Methods The neural stem cells were obtained from the brain of Wistar rat embryos. They were cuhured and passaged with serum-free medium. Cultured and differentiated cells were identified with immunocytochemistry staining. Results Clusters of neural stem cells were obtained in suspension and these cells could be continuously proliferated. And the cells could be differentiated into neurons and astrocytes which maintaining the main characteristics of NSCs after 8 passages of culture. Conclusions The neural stem ceils derived from rat embryonic brains are able to proliferate and multiple potent for differentiation.     

小儿常感冒须防肾小球肾炎

引起急性肾炎的原因有很多,感冒时,人体内的免疫细胞会吞噬入侵体内的细菌及病毒,形成一种抗体,而后死亡,达到消灭病菌的功能,以确保人体不受影响。但小孩体质弱,免疫功能还不强,因此免疫细胞有时不能吞噬病菌,而是暂时把病菌包容起来,身体中的病菌抗体与病菌本身结合成一种免疫复合物,随着血液循环,到达肾脏时,会沉积到肾小球的基底膜,对肾脏造成损害,使大量蛋白流失,最终导致肾炎。     

风疹病毒R16株体外感染人胚晶状体上皮细胞的初步研究

目的观察风疹病毒R16株体外感染人胚晶状体上皮细胞的生物学特性。方法利用相差显微镜、透射电子显微镜、免疫细胞化学技术观察风疹病毒R16株在人胚晶状体上皮细胞中的形态学及生长特性。结果风疹病毒R16株体外感染人胚晶状体上皮细胞后,细胞不产生明显的病变效应。受病毒感染的人胚晶状体上皮细胞生长速度较慢,10d后可在细胞质内观察到呈不规则球形、由单层脂质膜包绕、直径60～80nm的病毒颗粒,包括致密核心和无致密核心两种颗粒。而在胞核中未发现病毒颗粒。结论风疹病毒R16株能在人胚晶状体上皮细胞中增殖,为进一步研究风疹病毒感染后先天性白内障的发生机制打下基础。     

能保护肠胃道的免疫细胞

据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2008／12／23）报道,美国华盛顿大（the University of Washlngton）的研究人员发现,免疫系统中的自然杀伤细胞（Natural killer cells,NK cells）能够协助细胞增生并修复肠道中受损的组织。     

CHST2在胶质瘤中的表达及临床意义

目的 探讨糖磺基转移酶2(CHST2)在人脑胶质瘤中的表达情况及其临床意义.方法 从Gliovis在线网站获取TC-GA、CGGA、Rembrandt数据集,分析CHST2表达水平与胶质瘤病理特征、生存预后、免疫细胞浸润的关系.结果 胶质瘤母细胞瘤(GBM)组织CHST2表达水平较低级别胶质瘤(LGG)明显增高(P＜0...     

咪唑克生干预对EAE脊髓免疫细胞及IFN-γ与IL-10水平的影响

目的探讨咪唑克生(Ida)对Lewis大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的中枢神经系统(CNS)炎症的影响。方法实验分Ida按体重16 mg/kg2、mg/kg两组和对照组。用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)诱发Lewis大鼠EAE,并于给予GPSCH当日开始分别腹腔注射Ida(Ida组)和生理盐水(对照组)连续10 d,观察EAE症状并评分。第15天处死动物,用免疫组化法测定腰髓中表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的阳性细胞数;用ELISA法测定颈髓IFN-γ和IL-10含量。结果按体重2 mg/kg Ida能促进腰髓星形胶质细胞增殖活化,使表达iNOS的炎症细胞减少,并能增加颈髓中IL-10的含量,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。而按体重16 mg/kg Ida也有类似作用,但与对照组比较差异无统计学意义。结论按体重2 mg/kg Ida对Lewis大鼠EAE炎症具抑制作用。     

基于生物信息学分析探究盘状红斑狼疮的关键通路、基因及免疫细胞浸润

目的:采用生物信息学方法寻找盘状红斑狼疮(DLE)中的差异表达基因(DEGs)和免疫细胞浸润矩阵明确其功能,探讨DLE的发病机制.方法:从GEO中获取GSE81071芯片数据,以P＜0.05及IlogFCl＞ 1.5为条件筛选DEGs;采用CIBERSORT反卷积法分析表达谱中22种免疫细胞浸润比例.结果:共筛选出DE...     

体外诱导胎儿骨髓间充质干细胞向胰岛β样分泌细胞的分化

背景：体外诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛样细胞,目前尚无成熟的鉴定方案。 目的：探讨胎儿骨髓间充质干细胞在适当的条件下体外分化为胰岛样分泌细胞的可能性。 方法：将胎儿骨髓间充质干细胞与胎儿胰岛素细胞分别接种于Transwell 双层细胞培养板上下层共培养。对照组中的骨髓间充质干细胞仅用胰岛细胞培养基培养。倒置相差显微镜观察胎儿骨髓间充质干细胞、胎儿胰岛细胞的形态,放射免疫分析法检测共培养刺激下胰岛素的分泌情况。 结果与结论：未经诱导的骨髓间充质干细胞呈长梭形贴壁生长,与胰岛细胞共培养的骨髓间充质干细胞逐渐变圆,并聚集成团,共培养9 d后骨髓间充质干细胞经RAI检测分泌大量胰岛素,DTZ染色为阳性,细胞免疫化学检测阳性。而对照组无胰岛素释放。提示在适当的培养条件下,胎儿骨髓间充质干细胞具有向胰岛素分泌细胞分化的能力。     

海马神经干细胞不同传代方法的比较

背景：体外培养神经干细胞,在悬浮培养时由于自身增殖特性会形成球,传代时将会面临如何将细胞球分离成单细胞的问题。 目的：寻求理想的大鼠海马神经干细胞传代方法,以获得大量可增生的神经干细胞以供研究。 方法：分离新生1 d SD大鼠海马神经干细胞,原代培养至五六天时,分别用机械吹打法、胰蛋白酶、TrypLE和Accutase消化法分离神经干细胞球。之后每7 d传代1次,连续传代3次。分别于每次传代后第1天和传代后第4天计数活细胞比例和细胞球数目,实验重复3次。 结果与结论：神经干细胞球经3种酶消化后获得的均是单细胞;经机械吹打后既有单个细胞,也有小细胞球分布于培养液中。在酶消化法中,Accutase消化法传代后神经干细胞的活细胞比例明显高于胰蛋白酶消化(P < 0.01)和TrypLE消化法 (P < 0.05)。同时,Accutase消化法传代后新形成的细胞球数目也较其余各组多(P < 0.01)。提示在实验条件下,Accutase消化法能够较好地将神经干细胞球分离成存活率较高、能快速形成新的克隆球的单个细胞,是较为理想的神经干细胞分离传代方法。