应用激光显微分离技术在骨肉瘤组织原位筛选噬菌体肽库

目的将激光显微分离(laser capture microdissection, LCM) 技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选过程,建立一种可以直接在天然组织中筛选肽库的方法。方法将新鲜人骨肉瘤组织块在噬菌体肽库溶液振荡孵育后制成组织冰冻切片,免疫组化染色检测噬菌体在组织中的浸润扩散。改进常规LCM切片处理方法,以冻干法替代酒精/二甲苯法脱水,以期在LCM操作过程中提高切片上噬菌体的存活率。LCM法分离摄取骨肉瘤切片上的肿瘤靶细胞,转染回收这些细胞上特异结合的噬菌体。滴定法检测所筛选的噬菌体对特异性细胞的亲和力。结果利用LCM技术,可以由肿瘤冰冻切片上收集到足够的与特异性噬菌体短肽,应用于噬菌体表面呈现肽库筛选。经过3轮筛选后所获得的噬菌体与人骨肉瘤组织的特异性亲和力提高16倍。结论本研究首次将LCM技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选,可以使我们直接在新鲜人肿瘤组织中筛选与特定细胞群甚至单个细胞亲合的短肽;同时又避免了天然组织中其他杂质细胞的污染,为研制细胞特异性导向载体提供了一个新的途径。     

危重病人营养支持的实施

危重病人的营养支持是一门新兴的科学领域,也是现代医学的重要进展之一,已广泛用于临床。营养支持治疗是指在机体营养状况异常或病人营养不足的情况下,维持或补充各种营养物质的需要,特别是维持能量的需要和氮的平衡。通过中心静脉或周边静脉进行的营养支持,称为胃肠外营养,亦称人工肠道。通过胃肠道进行的营养支持,称为胃肠内营养。     

重组人生长激素对老年人骨盆骨折蛋白质代谢及免疫功能的影响

目的 探讨应用重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)对接受常规肠内营养支持的老年骨盆骨折患者蛋白质代谢及免疫功能的调理作用.方法 选择多发性骨盆骨折(骨折3处以上),年龄＞70岁患者30例,随机分为2组: 治疗组15例,采用标准肠内营养 rhGH[rhGH 0.2U/(kg·d)皮下注射,共计8天];另外15例作为对照组,治疗前和治疗后的第8天,分别测定血清白蛋白、血清转铁蛋白、血清前白蛋白浓度、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8),并统计医院获得性肺炎的发生情况.结果 治疗组患者在治疗后第8天的血清白蛋白、血清转铁蛋白和血清前白蛋白水平比对照组显著升高(P＜0.05), IgA、IgG、IgM、CD3、CD4、CD4/CD8与对照组相比有明显增高(P＜0.05);治疗组患者医院获得性肺炎的发生率也较对照组显著降低(P＜0.05).结论 在肠内营养支持下加用rhGH可以明显促进老年骨盆骨折患者的蛋白质合成代谢,并改善免疫功能,增加肌肉的收缩力,增强排痰力度,减少医院获得性肺炎的发生率.     

纯母乳喂养对新生儿黄疸的影响

新生儿黄疸包括生理性黄疸和病理性黄疸。我院在开展母乳喂养过程中 ,发现有 2 0 %～ 40 %正常足月新生儿出生后 3～ 4天血清胆红素超出正常生理性黄胆范围。为此 ,我们对10 0例纯母乳喂养的正常足月新生儿进行了血胆红素的观察1　临床资料1 1　对象 :选择 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 0年 10月出生 ,胎龄 >37W ,体重 >2 5 0 0 g ,阿氏评分 8～ 10分的正常足月新生儿。侧切分娩 5 8例 ,剖宫产 42例。1 2　研究方法和结果 :新生儿出生后均早接触、早吸吮 ,2 4小时母婴同室 ,纯母乳喂养 ,不定时按需哺乳。每天记录新生儿哺乳和大小便次数、称体重 …     

31例代谢综合征患者的心率变异性观察

目的　探讨代谢综合征患者的心率变异性。方法　对 3 1例代谢综合征患者 (观察组 )采用 2 4h动态心电图获取心率变异性指标的时域参数进行观察 ,设 3 1例健康对照组作比较。结果　观察组的SDNN、SDANN、SDNNindex、PNN50 、RMSSD参数比对照组明显降低 (P <0 .0 1或 0 .0 5 )。结论　代谢综合征患者的心率变异性明显减退 ,可能与存在胰岛素抵抗和糖尿病或糖耐量减退有关。     

基础生化中有关代谢的教学方法探讨

基础生化中有关代谢的教学方法探讨青海省卫生学校孟青妹，刘建强长期以来，在基础生化教学中，由于各种因素，普遍存在“教师教得吃力，学生学得勉强”的现象，特别是对有关代谢方面的内容，学生反响一直很大，主要症结在于反应步骤繁多、课时较紧、理解和记忆难度较大，...     

天然产物中的抗致突物

从陆生和海生植物以及其它生物中发现了某些次代谢产物显示对鼠沙门氏菌的致突物如2-氨基蒽(2AN)、甲基磺酸乙酯(EMS)和苯并-[α]芘(B[α]P)致突能力的抑制作用。本抗致突性测定的灵敏度可先以粗提取物来评价,提取物的精制也很容易。提取分离得到的抗致突化合物的主要类型包括类黄酮、香豆素和 Cymopols。     

病理性损伤因素对肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的 :观察低血清、高糖、高蛋白刺激下肾小管上皮细胞向间叶性细胞的表型转化 ,探讨损伤的肾小管上皮细胞在肾小管间质纤维化中的作用。方法 :以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为对象 ,分别用含低血清(0 .2mol·L-1小牛血清 )、高葡萄糖 (4.5 g·L-1)、高白蛋白 (15 g·L-1)的培养液培养 7d ,透射电镜检测细胞形态变化 ;免疫组化和Westernblot检测细胞表型改变 ,包括CK、Vimentin、α SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原 ,原位杂交检测Ⅰ型胶原mRNA表达 ,同时检测细胞TGFβ1蛋白表达。 结果 :低血清、高糖、高蛋白直接刺激下 ,肾小管上皮细胞出现明显形态学改变 ,包括细胞变为长梭形 ;透射电镜下细胞内线粒体明显减少 ,粗面内质网明显增加 ,并出现actin样微丝。免疫组化染色和Westernblot显示CK表达明显减弱 ,Vimentin、Ⅰ、Ⅲ型胶原、α SMA和TGFβ1表达增强。原位杂交显示Ⅰ型胶原mRNA表达增强。结论 :低血清、高糖、高蛋白可直接引起人近端肾小管上皮细胞TGFβ1表达增加 ,并发生向间叶性细胞的表型转化