滤纸法测定淡色库蚊乙酰胆碱酯酶活性的实验研究

用滤纸法根据颜色变化测定淡色库蚊敏感品系和抗性品系的乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性情况，以区分单个蚊虫的抗性情况。结果显示：敏感品系个体的ＡＣｈＥ随杀虫剂浓度的增高而被抑制（不显色）；抗性品系个体则不被抑制（显色明显）。说明两品系间ＡＣｈＥ的含量和活性有所不同。此法可快速地测定淡色库蚊内的ＡＣｈＥ活性，简单易行，可作为一种淡色库蚊抗药性定性测定的方法，便于在现场中推广应用。     

小鼠大脑皮质和海马结构内胆碱能纤维的分布及增龄变化

用乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）组织化学方法和体视学测量技术，研究胆碱能纤维在小鼠大脑皮质和海马结构内的分布及增龄变化。结果显示，小鼠大脑皮质和海马结构内ＡＣｈＥ阳性纤维呈不同的板层样分布，老年小鼠（２４月龄）额－顶皮质第Ⅲ、Ⅴ层和海马ＣＡ１、ＣＡ３区分子层及齿状回分子层ＡＣｈＥ阳性纤维密度明显低于成年小鼠（１３月龄）和青年小鼠（３月龄）（Ｐ＜０．０１），后两组间除成年小鼠海马ＣＡ３区分子层纤维密度稍低外，其他各区无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明，胆碱能纤维在小鼠大脑皮质和海马结构内的分布具有年龄相关性和区域特异性。     

毒蕈样乙酰胆碱受体基因在大鼠胃粘膜表达的检测

目的：检测了毒蕈样乙酰胆碱Ⅰ（ＭＲ１）和Ⅲ型受体（ＭＲ３）基因在大鼠胃粘膜的表达情况。方法：ｐＳＰ７３和ｐＳＰ７２质粒分别含有ＭＲ１和ＭＲ３ｃＤＮＡ，其用ＥｃｏＲⅠ或ＨｉｎｄⅢ线性化后，加入逆转录反应体系中制备地高辛标记的ｃＲＮＡ受体探针。胃粘膜ＭＲ１和ＭＲ３ｍＲＮＡ的定位检测采用原位杂交免疫组织化学方法。结果：ＭＲ１和ＭＲ３ｍＲＮＡ仅在大鼠胃粘膜固有层细胞表达，粘膜上皮细胞（腺体细胞）上无阳性的ＭＲ１和ＭＲ３ｍＲＮＡ杂交信号表达。结论：提示，胃粘膜上皮细胞（包括壁细胞和主细胞）可能缺乏乙酰胆碱受体，乙酰胆碱对胃酸分泌的刺激调节作用，可能是通过粘膜固有层的免疫细胞（淋巴细胞）介导的     

吡拉西坦影响幼年大鼠慢性癫痫与学习记忆复合动物模型脑海马乙酰胆碱含量和胆碱乙酰转移酶活性变化的量效作用(英文)

背景:脑内投射至海马结构的胆碱能系统与学习记忆有关。吡拉西坦具有保护和修复大脑神经细胞的作用,可抵抗因物理因素、化学因素所致的脑功能损伤,改善学习记忆能力。目的:制备幼年慢性癫痫与学习记忆复合动物模型,观察大鼠脑海马乙酰胆碱含量、胆碱乙酰转移酶活性变化以及吡拉西坦的干预效应。设计:随机对照实验,非盲法评估。单位:河北医科大学第二医院儿科,河北医科大学中医药研究院。材料:实验于2004-07/12在河北医科大学及河北师范大学生命科学学院完成。选择Wistar幼年大鼠50只,清洁级,雌雄各半。方法:肌注马桑内脂注射液复制大鼠慢性癫痫大发作模型。每间隔3天重复肌注1次,在造模期间连续3次出现后肢站立的全身阵挛性惊厥或站立伴摔倒或全身强直-阵挛性发作的动物改为每隔14天肌注1次。选取10只大鼠为正常对照组,不进行造模,其余40只大鼠造模3个月时随机分为4组:吡拉西坦2.4g/L组、吡拉西坦4.8g/L组、苯妥英钠6g/L+吡拉西坦4.8g/L组、造模组,每组10只。各组于造模3个月开始连续灌胃给药,1次/d,10mL/kg。吡拉西坦2.4g/L,4.8g/L组分别灌服吡拉西坦混悬液2.4g/L,4.8g/L;苯妥英钠6g/L+吡拉西坦4.8g/L组灌服苯妥英钠6g/L及吡拉西坦悬浮液4.8g/L。造模组、正常对照组灌服10mL/kg生理盐水。用药1个月后进行相关指标检测。Morris水迷宫测试癫痫大鼠发现平台时间及搜索距离,连续测试3d,2次/d。水迷宫实验结束后,断头取脑,测定双侧海马乙酰胆碱含量,胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性用放射免疫法。主要观察指标:①Morris水迷宫测试各组大鼠发现平台时间及搜索距离。②各组大鼠海马乙酰胆碱含量,胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性。结果:50只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠搜索平台时间比较:造模组各组次相应平均搜索时间比正常对照组有不同程度的增加(63±11)s,(40±8)s;(61±9)s,(38±7)s;(57±8)s,(36±9)s;(55±11)s,(33±10)s;(52±7)s,(30±9)s;(49±9)s,(27±6)s,P<0.01。苯妥英钠6g/L+吡拉西坦4.8g/L组,吡拉西坦4.8g/L组6次搜索时间均比造模组有不同程度的减少(44±9)s,(45±9)s;(43±9)s,(42±8)s;(42±7)s,(42±7)s;(40±9)s,(39±9)s;(38±7)s,(35±9)s;(35±6)s,(34±8)s,t=2.352～4.029,P<0.05～0.01。各给药组内随训练次数增加平均搜索时间逐渐减少。②各组大鼠平均搜索距离比较:造模组各组次相应平均搜索距离较正常对照组明显增加(793±74)cm,(420±81)cm;(763±89)cm,(418±57)cm;(690±67)cm,(382±69)cm;(623±81)cm,(356±71)cm;(592±98)cm,(330±69)cm;(550±54)cm,(301±97)cm,P<0.01。苯妥英钠6g/L+吡拉西坦4.8g/L组,吡拉西坦4.8g/L组6次平均搜索距离均比造模组有不同程度的减少(586±91)cm,(510±89)cm;(566±70)cm,(497±76)cm;(521±84)cm,(455±56)cm;(480±74)cm,(421±63)cm;(437±51)cm,(396±79)cm;(392±79)cm,(385±48)cm,t=2.364～4.230,P<0.05～0.01。各给药组随训练次数增加平均搜索时间逐渐减少。③各组大鼠脑海马乙酰胆碱含量及胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱脂酶活性:造模组均较正常对照组明显降低(2.2±0.7)nmol/g,(3.8±0.9)nmol/g;(503.3±103.3)pkat/g,(778.3±125.0)pkat/g;(190.0±51.7)μkat/g,(368.3±86.7)μkat/g,P<0.01。苯妥英钠6g/L+吡拉西坦4.8g/L组,吡拉西坦4.8g/L组脑海马乙酰胆碱含量和乙酰胆碱脂酶活性明显高于造模组(2.7±0.6)nmol/g,(2.9±0.6)nmol/g;(256.7±58.3)μkat/g,(306.7±88.3)μkat/g,t=3.445～4.148,P<0.01。吡拉西坦4.8g/L组脑海马胆碱乙酰转移酶活性(668.3±118.3)pkat/g明显高于造模组(P<0.01)。吡拉西坦2.4g/L组各指标与造模组基本一致。结论:慢性癫痫大鼠大发作模型具有空间学习、记忆能力下降的特点,同时伴有脑海马乙酰胆碱含量及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性降低,说明已是学习功能障碍的良好复合模型,应用4.8g/L吡拉西坦后可增加模型大鼠脑海马乙酰胆碱含量及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性,改善学习和记忆能力,但2.4g/L吡拉西坦效果不明显。     

急性有机磷农药中毒抢救进展

我国有机磷农药中毒病人占中毒病人的80～90％，其特点：大多数为服毒自杀，死亡率高。有机磷农药进入体内后抑制了胆碱酯酶活性，使胆碱能神经的化学传递介质（递质）乙酰胆碱大量蓄积，作用于胆碱能受体导致胆碱能系统功能紊乱；此外，也可直接作用于胆碱能受体。如治疗不及时，胆碱酯酶在短期内发生老化，即使应用复能剂也无效。抢救急性有机磷农药中毒是一个复杂的综合治疗过程，目前提高急性有机磷农药中毒救治水平，减少中毒病人死亡。     

1例重症肌无力危象病人的急救护理

重症肌无力(MG)是一种神经-肌肉接头部位的乙酰胆碱传递障碍的自身免疫性疾病。肌无力危象(MGC)是指重症叽无力病人急骤发生呼吸肌或／和由延髓支配的肌肉严重无力导致呼吸、咳嗽困难和威胁病人生命安全的一种征象。临床表现为呼吸微弱、咳嗽无力、语音低调及烦躁、发绀等缺氧症状。我科于2004年3月成功抢救了1例重症肌尢力危象病人现将护理体会报告如下。     

新型胆碱酯酶抑制剂对阿尔茨海默病作用的生物化学研究

目的：探讨新型胆碱酯酶抑制剂(活性物质)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)海马结构的生物化学影响，为AD患者的临床治疗提供可靠的基础研究资料。方法：实验选用40只3—5月龄雄性Wistar大鼠，其中30只大鼠切断穹窿海马伞制作AD动物模型。术后第8天静脉给予新型胆碱酯酶抑制剂进行治疗，然后采用分光光度计对各组海马结构分别进行生化检测。结果：海马结构细胞胞浆的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定：活性物质组的酶活A／蛋白A的均值为0．223&;#177;0．058，每毫克蛋白酶活A为0．881&;#177;0．051。单纯损伤组分别为0．402&;#177;0．193和1．558&;#177;1．299，两组比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。红细胞膜AchE活性测定：单纯损伤组的酶活A／蛋白A的均值为0．62&;#177;0．09。给药后的活性物质组为0．55&;#177;0．08，石杉碱甲组为0．62&;#177;0．14。活性物质组与单纯手术组比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：新型胆碱酯酶抑制剂(活性物质)具有较强的抑制乙酰胆碱酯酶的作用，其抑制作用大于石杉碱甲，并对AD具有一定的治疗作用。     

阿尔茨海默病患者血小板线粒体谷氨酸载体活性的变化和乙酰胆碱等药物的影响

研究表明,谷氨酸在阿尔茨海默病（AD）的发病中有重要作用,线粒体膜上的谷氨酸载体不仅影响到谷氨酸作为神经递质而发挥的作用,而且还可能参与谷氨酸对神经细胞产生兴奋性毒性作用的过程。血小板的生物化学和药理方面类似于神经元,已被用来作为研究AD的外周模型。我们于2004年6月至2006年6月,观察AD患者血小板线粒体膜谷氨酸载体活性和乙酰胆碱等药物对其影响，探讨线粒体膜上的谷氨酸载体功能在AD中的作用。     

长时间失血性休克大鼠肾脏糖皮质激素受体与磷酯酶A2改变及意义

用放射配体分析法，研究长时间失血性休克大鼠肾脏组织糖皮质激素受体（ＧＲ）变化并检测磷酯酶Ａ２（ＰＬＡ２）变化。结果显示：休克２小时后，ＧＲ的最大结合容量（Ｒ０）开始下降，并随休克时间延长而继续下降，于８小时后，ＧＲ的Ｒ０仅为对照组的２１％。对糖皮质激素（ＧＣ）的亲和力也下降。同时肾脏ＰＬＡ２上升，与ＧＲ的Ｒ０下降呈负相关（ｒ＝０．７１．Ｐ＜０．０５）。说明ＧＲ功能下降所致受体水平ＧＣ功能不全对长时间失血性休克的发生、发展及与休克后肾功能损害可能有关。     

长托宁和阿托品治疗有机磷农药中毒的利弊

急性有机磷农药中毒(AOPP)是我国农村地区常见的中毒之一,具有发病快、毒性大等特点,患者病死率高达10％以上,主要通过消化道、呼吸道及皮肤黏膜等多种途径进入体内而引起中毒.有机磷农药的毒理作用是抑制神经系统的胆碱酯酶活性,使胆碱神经的传递介质乙酰胆碱大量蓄积,蓄积的乙酰胆碱作用于神经突触及其支配的效应器细胞上的胆碱能受体,从而产生多汗、流泪、流涕及肺部啰音等毒蕈碱样症状,皮肤苍白、肌肉颤动、心率加快及肌无力等烟碱样症状和中枢神经系统症状,患者严重时可导致昏迷,以致呼吸衰竭而死亡[1].目前主要的治疗措施是以胆碱能拮抗剂和胆碱酯酶复能剂为基础的综合治疗,但抗胆碱药使用的种类和剂量,各地差别甚大,应根据各个药物的药理作用特点和患者实际情况,采取个体化治疗.