大鼠胰腺癌和非癌胰腺组织Skp2和p27表达研究

目的建立大鼠胰腺癌模型,研究大鼠胰腺癌和非癌胰腺组织中Skp2和p27表达及其意义。方法应用二甲基苯并蒽(DMBA)置入大鼠胰实质内(A组)及设立曲古霉素(TSA)干预组(B组),3~5个月内处死观察胰腺癌发生情况,应用SP免疫组化法研究胰腺癌和非癌胰腺组织中Skp2和p27表达。结果3~5个月内A组发癌率为48.7%(18/37),B组为33.3%(12/36),A组和B组各1例纤维肉瘤外,余均为胰腺导管癌;A组肿块最大径大于B组(P<0.05);非癌胰腺组织中A组导管上皮中至重度不典型增生者(52.6%)高于B组(33.3%),但差异无显著性(P>0.05);C组胰腺和A或B组鼠胰腺外主要脏器均无明显病变。A组和/或B组胰腺导管癌Skp2表达阳性率均明显高于A组和/或B组非癌胰腺组织(P<0.05);但胰腺导管癌p27表达阳性率明显低于非癌胰腺组织(P<0.01);Skp2阳性和p27阴性的非胰腺组织导管上皮均呈中至重度不典型增生;C组胰腺导管上皮Skp2均阴性表达和p27均阳性表达。结论DM-BA置入胰实质内可在短期获得较高的SD鼠胰腺癌发生率,TSA能抑制胰腺癌发生和生长。Skp2和p27表达水平与SD鼠胰腺癌发生发展有密切关系。     

大鼠胰腺炎相关性急性肺损伤模型的探讨

目的研究重组纳豆激酶(recombinant nattokinase,r-NK)大剂量重复给药对Beagle犬和小型猪凝血和纤溶系统的不同影响。方法用血球计数仪测定血小板相关参数;用血凝仪采取凝固法依次测定纤维蛋白原(Fib)含量、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间 (TT);以ELISA法分别测定纤溶酶原(PLG)、纤溶酶原激活因子(t-PA)活性。结果药物对Beagle 犬和小型猪有相似的血管刺激作用。给药1周后Beagle犬血小板计数下降,PT明显延长,Fib含量明显降低,PLG活性升高。而药物对小型猪的各项参数均无明显影响。结论不同动物对相同剂量r-NK毒性反应存在较大的差异性,r-NK大剂量重复给药可破坏Beagle犬的凝血/纤溶系统平衡,而不影响小型猪凝血/纤溶系统功能。     

有机磷类杀虫剂存在其他作用靶分子

目的：研究有机磷类杀虫剂对大鼠脑G蛋白偶联受体激酶2介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体磷酸化的影响,揭示有机磷类杀虫剂存在的其他作用靶分子或作用途径.方法：制备亲和层析柱;利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱m2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体或β-肾上腺素受体,G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-p32]ATP与对氧磷（PO）、氧毒死蜱（CPO）共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果.结果：氧毒死蜱完全抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,其半数抑制浓度为（IC50）70μmol/L;对氧磷不抑制m2受体的磷酸化;氧毒死蜱和对氧磷都不抑制β-肾上腺素受体的磷酸化.结论：氧毒死蜱有选择性地抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,说明某些有机磷杀虫剂的毒性作用存在其他靶分子或作用途径.     

冠状动脉内注射国产替罗非班治疗冠状动脉介入治疗后无复流成功一例

患者男,82岁。因阵发性心前区压榨样不适4个月并加剧1．5d就诊。心电图示窦性心律,Ⅱ、Ⅲ、AVF导联ST段抬高0．05 mV伴异常Q波,相关导联T波双向；心肌酶谱：肌酸磷酸激酶(CPK)220 U/L,磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)28U/L,天冬氨酸转氨酶(AST)45U/L,肌钙蛋白阳性。拟诊急性下壁心肌梗死(恢复期)。入院后口     

HSV-TK/GCV系统在难治性卵巢癌裸鼠移植瘤模型中的实验研究

目的:建立人难治性卵巢癌荷瘤裸鼠模型,用HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗模型动物,观察疗效及协同因素。方法:常规培养携带HSV-TK基因的重组逆转录病毒包装细胞PA317,测定病毒滴度。在移植瘤内多点注射包装细胞,观察GCV、ATRA、TPT对移植肿瘤独立及协同治疗后的肿瘤体积变化。治疗结束后分析移植肿瘤组织病理,PCR检测TK基因在NIH3T3细胞及移植肿瘤组织的转导。结果:人卵巢癌标本裸鼠原代移植成功率16.7%,鼠间传代移植成功率89.7%;重组逆转录病毒滴度为6×104cfu/ml;HSV-TK/GCV系统或TPT治疗后肿瘤生长受到抑制(P<0.05),两者联合治疗后,抑制更明显(P<0.05);ATRA灌胃未显示独立或协同治疗作用(P>0.05);HSV-TK/GCV组、TPT组及两者联合组有明显的治疗反应;PCR检测证实,TK基因在NIH3T3细胞及肿瘤组织中的转导。结论:HSV-TK/GCV系统及TPT对人难治性卵巢癌荷瘤裸鼠有单独及协同治疗作用,全反式维甲酸灌胃对人难治性卵巢癌荷瘤裸鼠疗效不明显。     

c-kit+肠间质细胞在先天性巨结肠及其同源病中分布状况的研究

先天性巨结肠及其同源病肠动力障碍的发病机制尚未完全阐明。ICCs被认为是肠道的起搏细胞，能产生自发性慢波，引起肠道的蠕动。最近的研究发现，ICCs的基因表达产物e-kit（kit——一种编码酪氨酸激酶膜受体的原癌基因）可以特异性的标记胃肠道的ICCs细胞和肥大细胞口]。本实验中，我们应用针对e-kit的免疫组化方法标记ICCs，研究e-kit^＋ ICCs在先天性巨结肠及其同源病中结肠壁内的分布情况，进一步探讨该细胞与这二种疾病的关系。     

心衰患者的心肌和淋巴细胞GRK2表达硬活性均增高

目的：G蛋白偶联受体激酶-2（GRK2或β-ARKl）调节着心脏β肾上腺素能受体（β-AR）。在心衰（HF）患者中，这种激酶在心脏的表达升高。本文意在探讨已经被用于研究心脏β-AR的白细胞可否用于监测心肌中GRK2的水平和活性。此外，作者亦有意探讨心肌和淋巴细胞的GRK2水平是否与β-AR功能失常和HF严重程度相关。方法和结果：在人心衰心脏外植体的心肌活检标本中，GRK活性与β-AR介导的cAMP生成呈负相关（r^2=0．215，P〈0．05，n=24）。     

绿茶多酚类化合物诱导表皮角质细胞分化与p57／KIP2和半胱天冬酶14协调表达的相关性

绿茶中多酚类化合物表桔儿茶素-3-桔酸酯（EGCG）通过诱导细胞凋亡起到化学防癌作用，且其能通过上调p57／KIP2加速正常人表皮角质细胞（NHEK）分化。p57／KIP2是一种能阻止细胞生长和分化的细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白，半胱天冬酶（caspase）14与NHEK分化和屏障形成等有关。因此作者应用体外NHEK模型，即口腔鳞状细胞癌系OSC2和由OSC2衍生的、p57／KIP2稳定表达的亚细胞系，研究EGCG诱导的p57／KIP2与半胱天冬酶14表达之间的相互关系，同时检测半胱天冬酶14在正常人和牛皮癣患者皮肤中的表达。     

抗癌药Sorafenib

Ras/Raf/MEK途径作为调控细胞生长及存活的信号传导系统,当被激活时会引起一系列自细胞表面至胞核的连锁反应,最终影响细胞的增殖、凋亡、分化和转化。其中MEK为MAP/ERK激酶,而ERK为胞外信号器相关激酶;Raf是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,为Ras的下游效应器酶,一旦被激活,继而激活MEK     

cyclinD1和CDK4在低氧心肌中的表达及意义

目的研究低氧心肌细胞周期及缺氧过程中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)表达的变化,探讨缺氧心肌在凋亡前是否存在增殖能力和自身修复。方法采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立心肌缺血模型,实验分正常对照、缺血6 h和缺血12 h三组;以四唑盐比色试验(MTT)检测心肌细胞活力,流式细胞术测定细胞周期,免疫组化检测cyclinD1和CDK4表达。结果与对照组比较,心肌细胞缺氧处理6 h后,细胞周期中S 期比例增高(P<0 01),12 h后,S期比例下降(P<0 05);cyclinD1胞浆表达和CDK4 胞核表达增加。结论在缺氧所致死亡、凋亡过程中心肌细胞经历了一定程度的增殖过程,cyclinD1 和CDK4 表达增加参与了细胞增殖,缺氧损伤可刺激心肌细胞增殖能力。