革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

侧柏叶挥发油β-环糊精包合物制备工艺

目的优选侧柏叶挥发油β-环糊精包合物制备最佳工艺条件。方法采用L9（34）正交试验,以包合物收得率、挥发油包合率为筛选指标,考察挥发油与β-环糊精的比例、包合温度、包合时间3个因素对饱和水溶液法制备β-环糊精包合物工艺的影响。结果最佳工艺条件：挥发油与β-环糊精的比例为1：6（ml：g）,包合温度为40℃,包合时间为2 h。结论包合工艺简单,所得包合物包合率和收得率较高。     

氨苄西林耐药流感嗜血杆菌β-内酰胺酶基因分析

目的了解深圳市宝安区氨苄西林耐药流感嗜血杆菌β-内酰胺酶基因分布特征,为临床合理用药提供依据。方法用K-B法检测氨苄西林耐药性,头孢硝噻酚纸片法检测β-内酰胺酶,TEM型和ROB-1型基因采用PCR扩增和序列分析法。结果检出62株氨苄西林耐药流感嗜血杆菌,其中60株β-内酰胺酶阳性。60株β-内酰胺酶阳性株中58株检出TEM-1型基因,占96.7%,1株检出ROB-1型基因,占1.7%,1株未检出基因型。结论产TEM-1型β-内酰胺酶是流感嗜血杆菌主要耐药机制,但β-内酰胺酶阴性氨苄西林耐药株的出现更值得关注。     

连续性血液净化对多器官功能障碍综合征患者免疫功能的影响

目的探讨连续性血液净化(CBP)对多器官功能障碍综合征(MODS)患者C-反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)表达和T淋巴细胞亚群的影响。方法20例符合MODS诊断标准的患者,均行CBP治疗。于CBP前,CBP后第1、3、5、7天清晨,分别测定CRP、SAA和T淋巴细胞亚群。结果CBP治疗后,存活组CRP和SAA均呈下降趋势(P<0.05或P<0.01),CD3 、CD4 、CD4 /CD8 均有不同程度的升高(P<0.05或P<0.01),CD8 呈逐渐下降趋势(P<0.05)。死亡组在CBP治疗前后CRP和SAA均呈先下降后升高趋势,CD3 、CD4 、CD4 /CD8 均有不同程度的升高,CD8 在CBP治疗前后呈下降趋势。结论CBP可降低MODS患者的CRP和SAA水平,维持T淋巴细胞亚群间的平衡。     

Visfatin Protects Rat Pancreatic β-cells against IFN-γ-Induced Apoptosis through AMPK and ERK1/2 Signaling Pathways

ObjectiveInterferon-γ (IFN-γ) plays an important role in apoptosis and was shown to increase the risk of diabetes.Visfatin, an adipokine, has anti-diabetic, anti-tumor, and regulating inflammatory properties. In this study we investigated the effect of visfatin on IFN-γ-induced apoptosis in rat pancreatic β-cells. MethodsThe RINm5F (rat insulinoma cell line) cells exposed to IFN-γ were treated with or without visfatin. The viability and apoptosis of the cells were assessed by using MTT and flow cytometry. The expressionsof mRNA and protein were detected by using real-time PCR and western blot analysis. ResultsThe exposure of RINm5F cells to IFN-γ for 48 h led to increased apoptosis percentage of the cells. Visfatin pretreatment significantly increased the cellviability and reduced the cell apoptosis induced by IFN-γ. IFN-γ-induced increase in expression of p53 mRNA and cytochrome c protein, decrease in mRNA and protein levels of anti-apoptotic protein Bcl-2 were attenuated by visfatin pretreatment. Visfatin alsoincreasedAMPK and ERK1/2phosphorylation and the anti-apoptotic action of visfatin was attenuated by the AMPK and ERK1/2 inhibitor. ConclusionThese results suggested that visfatin protected pancreatic islet cells against IFN-γ-induced apoptosis via mitochondria-dependent apoptotic pathway. The anti-apoptotic action of visfatin is mediated by activation of AMPK and ERK1/2 signaling molecules.     

Clinical Observation and Mechanism Study on Treatment of Senile Dementia with Naohuandan(脑还丹)

Seniledementia(SD),namely,Alzhei mer sdisease(AD)isakindofdegenera tioninthenervesystemthatoftenoccursinmid oldagedpersons,beingoneofthecom monestdiseasethatinducesdementia,andmainlycharacterizedbyintegralfunctionaldisorderofcognition,especiallythememorydisorder,changesinbehaviorandpersonali ty,aswellasaffectationofdailylivingca pacity(1).Alongwiththedevelopmentoftheagingpopulationintheworld,anincreasingtrendwasshownintheoccurrenceofAD.Becauseofitsunclearpathogenesis,theWesternmedicalapproa…     

细胞焦亡在新生儿坏死性小肠结肠炎中的致病作用

目的 探讨细胞焦亡是否参与新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)发病,并分析其可能的作用机制.方法 将50只新生1d的SD大鼠按随机数字表法分为2组(n=25):正常对照组、坏死性小肠结肠炎新生大鼠组(NEC组).正常对照组与母鼠同笼,不予处理;NEC组采用缺氧、冷刺激及人工喂养的方式建立模型.新生鼠于第1、2、3天固定时间点测量体质量,第4天处死大鼠,HE染色观察回盲部肠组织病理学变化并评分;qPCR检测NLRP3、IL-1β、IL-18基因表达水平;Western blot检测Caspase-1表达及激活情况;ELISA检测肠组织匀浆IL-1β、IL-18水平.结果 与正常对照组相比,NEC组大鼠体质量明显降低,肠上皮损伤明显;NLRP3及IL-1β、IL-18基因表达增高(分别为0.33 ±0.06 vs 1.11 ±0.12,0.40 ±0.15 vs 1.25 ±0.13,1.04 ±0.16 vs 2.35 ±0.17,P ＜0.05);激活的Caspase-1仅在NEC组中表达,且下游炎症因子IL-1β及IL-18水平亦高于正常对照组(分别为300.4 ±76.5 vs 74.4 ±17.5,214.4±28.1 vs 23.9±19.3,P＜0.01).结论 细胞焦亡参与了NEC的发病,其具体机制可能与焦亡发生后IL-1 β、IL-18的水平升高有关.     

罗格列酮对OLETF大鼠肺组织TGF-β1／JNK信号转导途径的影响

目的 探讨罗格列酮对自发性2型糖尿病OLETF大鼠肺组织转化生长因子-1β（TGF-β1）／c—Jun氨基末端激酶（JNK）信号转导途径的影响。方法将16只30周龄成模OLETF大鼠分为OLETF组和罗格列酮治疗组（OLETF／L纽）,设LETO大鼠8只为对照组。免疫组织化学分析肺组织TGF—p1、磷酸化（P）-JNK、I型胶原表达。结果与LETO组大鼠相比,OLETF组大鼠肺组织TGF—β1、P—JNK表达（7．4438±0,6397vs1．1844±0．2066、5．7025±0．5530VS1．5875±0．1727）及Ⅰ型胶原的阳性面积比、平均光密度（0．1705±0．0110VS0．0550±0．0048、0．0597±0．0066VS0．0292±0．0019）均显著增加（P〈0．05）。与OLETF组大鼠相比,OLETF／L组大鼠肺组织TGF-β1、PJNK表达（1．8398±0．3591VS7．4438±0．6397、1．7500±0．1690vs5．7025±0．5530）及Ⅰ型胶原的阳性面积比、平均光密度（0．0856±0．0068VS0．1705±0．0110、0．0351±0．0059VS0．0597±0．0066）均显著减少（P〈0．05）。结论罗格列酮可能通过调控TGF-β1／JNK信号转导途径改善糖尿病肺纤维化。     

TGF-β1、CTGF在胆管缺血性损伤修复过程中的表达及意义

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）及结缔组织生长因子（CTGF）在胆管缺血性损伤修复过程中的表达及意义。方法建立大鼠胆管缺血损伤修复模型,随机分为对照组和实验组,并分别于术后1、3、5和8周后取材,运用免疫组化技术检测胆管组织中TGF-β1和CTGF的阳性表达部位,并采用病理图像分析系统计算胆管缺血性损伤修复过程中各组阳性细胞数。结果对照组表现为胶原纤维的平行密集排列,未见明显的无炎性细胞浸润;实验组胶原纤维增生明显、层次紊乱,疏松结缔组织中可见大量毛细血管及炎性细胞浸润;TGF-β1及CTGF在术后各期均有显著表达,但术后各期表达对比差异无统计学意义（P〉0．05）;TGF-β1及CTGF在正常对照组无表达或者仅轻微表达,与术后各期TGF-β1及CTGF表达比较差异有统计学意义（P〈0．01）;Spearman相关分析：实验组术后各期TGF—β1和CTGF的表达呈正相关性。结论TGF-β1和CTGF在胆管缺血损伤修复过程中相伴表达且与良性胆管狭窄的形成密切相关．为防治瘢痕增牛和良件胆管狭窄提供了-条新的愚路和涂释．     

肠杆菌科细菌SDD菌株特征及替加环素药敏结果分析

目的 分析医院肠杆菌科细菌剂量依赖性敏感(SDD)菌株的药物敏感性情况和检出分布特征,并检测产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对替加环素的敏感性,以指导临床对SDD菌株的抗菌药物及对ESBLs产酶株替加环素的选择.方法 采用VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及仪器法抗菌药物敏感性试验.对50株ES-BLs阳性大肠埃希菌和50株肺炎克雷伯茼分别采用微量肉汤稀释法、MTS测试条法、Vitek2仪器检测法、纸片扩散法检测替加环素的敏感性.结果 采用M100-S24标准头孢吡肟判断为敏感的肠杆菌科细菌有3.58％～12.50％的菌株为SDD菌株;ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的SDD菌株检出率分别为13.31％和8.60％,显著高于ESBLs阴性菌株(P＜0.05);所有肠杆菌科细菌SDD菌株最低抑菌浓度(MIC)4 mg/L菌株检出率显著高于SDD菌株MIC 8 mg/L茼株检出率(P＜0.05);ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯采用微量肉汤稀释法和MTS测试条法的敏感率均为100％.结论 当肠杆菌科细菌头孢吡肟MIC为4 mg/L或8 mg/L时,实验室应在检验报告提示SDD菌株的检出.替加环素对ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的敏感率为100％.