细胞内抗原免疫金银染色技术的改进

为解决细胞内抗原应用免疫金银法染色时背景过重的问题,建立了甘氨酸二次阻断的处理方法,效果较好。     

细胞因子Midkine融合蛋白的表达及其单克隆抗体的制备与应用

目的:克隆细胞因子midkine(MK)基因,表达其融合蛋白,制备抗MK单克隆抗体(mAb)并检测MK在肿瘤细胞中的表达。方法:利用MK基因的特异性引物,通过RT-PCR从人肾癌组织mRNA中扩增人MKcDNA分子。将其定向克隆于原核表达载体中,在大肠杆菌中表达MS2-MK融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,用传统的杂交瘤技术,进行细胞融合、筛选、克隆化并制备mAb腹水。用ELISA法分析其Ig亚类,用免疫细胞化学染色法检测MK在肿瘤细胞中的表达。结果:成功地克隆出MK基因并表达了MS2-MK融合蛋白。通过免疫和筛选,获得2株分泌小鼠抗人MKmAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb的Ig亚类分别为IgG1和IgG2a。免疫细胞化学染色显示,2株mAb与人胃癌细胞株MGC803和胃癌组织呈强阳性反应。结论:在原核细胞中获得MS2-MK融合蛋白的表达,并制备出抗MK的mAb,为研究MK的生物学活性提供了条件。     

免疫组化和组织化学双重染色技术在组织芯片上的应用

组织芯片是从组织块中挑选典型部位的组织以获得数百个圆柱状的样本，并按次序排列在一个新的石蜡块上，制作成HE切片，然后按研究的需要进行免疫组化及原位杂交等研究。组织芯片技术最重要的特点是：一次可以同时对多个组织块检测研究而对原来的组织材料破坏很小。此外，利用组织芯片仪还可以进行组织切片的精确定位和多种类型的分子生物学分析。     

嵌合型21三体综合征一例及其家系临床分析

病例：先证者，男，9岁，主因智力低下伴抽搐前来我院查染色体，经无菌采静脉血，无菌接种培养基、72h收获、制片、G显带、姬姆萨染色，其核型为46，XY／47，XY，＋21。其一名舅父一同做染色体检查，核型为46，XY。随后对其进行家系调查，绘制家系图谱如下。     

染色体着丝粒特异性蛋白质的研究进展

着丝粒是细胞有丝分裂或减数分裂中期姐妹染色单体相互联系在一起的特殊部位，为一DNA-蛋白质复合体。在调控细胞分裂和染色单体分离机制中具有重要作用。它携带的蛋白质是其功能得以正确发挥所必不可少的功能元件。本文主要对近几年来着丝粒特异性蛋白质的研究予以综述。     

皮肤中弹性纤维三种染色方法的比较

弹性纤维广泛分布于纤维结缔组织 ,尤其集中分布于椎弓间黄韧带、声带、肺泡壁、动脉壁及弹性软骨等处 ,赋予所在的组织以良好的弹性。弹性纤维可被多种试剂着色 ,如地衣红、醛复红、苯胺黑、Ｓｃｈｉｆｆ试剂等染成不同的颜色。下面我们就分别用Ｇｏｍｏｒｉ醛复红染色法、Ｓｃｈｍｏｒｌ染色法 (Ｗｅｉｇｅｒｔ间苯二酚 品红染色法 )及地衣红染色法 3种染色法 ,对ＳＤ大鼠皮肤中的弹性纤维染色效果做一简单比较。1　材料和方法1 1　试剂　碱性品红、石碳酸、间苯二酚、三化铁、盐酸、聚乙醛、地衣红。1 2　实验方法1 2 1　Ｇｍｏｒｉ醛…     

组织工程血管基质的制备与改性

目的：完全脱除猪胸主动脉细胞，对脱细胞血管基质进行改性，增强基质的力学强度，制备组织工程血管支架材料。方法：取家猪的新鲜去除外膜胸主动脉20根，随机分成4组，分别采用胰蛋白酶、TritonX-100及十二烷基硫酸钠（SDS）作为脱细胞试剂对猪胸主动脉进行脱细胞处理，并对脱细胞后的血管基质进行改性，采用HE染色、弹力纤维染色、力学性能测试，以评价脱细胞效果以及材料的力学性能。结果：采用1％TritonX-100单独作用84h既能完全脱除细胞，同时又可完整保留血管基质的三维结构，对胶原纤维、弹力纤维的损伤小，是一种较理想的脱细胞方法。对脱细胞后的基质进行冷冻干燥及真空热交联处理，能有效提高材料的机械强度，冷冻干燥24h后真空120℃下热交联处理12h所获得的材料的机械强度最好，断裂强度可达到1．70MPa。结论：以脱细胞血管基质经冷冻干燥和真空热交联处理后，可以作为血管组织工程的支架材料。     

微波二次固定提高肿瘤组织冰冻切片及苏木素—伊红染色质量的研究

冰冻切片质量的好坏直接关系到能否准确及时地作出病理诊断,以指导手术治疗方式,近年来,国内外学者对如何提高冻冻切片及染色质量做了大量工作,但仍然存在着组织结构被冰晶破坏,对比染色差,细胞核着色不清晰等缺点,我们应用微波加热固定液对组织块进行预固定,切片后再次固定的“二次固定技术”处理肿瘤组织,获得了比单纯脱脂固定切片更好的效果.1 材料与方法1.1 材料 选用我院1994～1995年外科送检需要急诊冰冻的乳腺、胃、肠、卵巢、甲状腺及脑等处的肿瘤组织,取材2cm×1.5cm×0.5cm数块.YWY781A型医用微波炉为浙江临安爱迪电子仪器厂产品,有8个功率选择开关,最大输出功率为500W.1.2 方法(1)将肿瘤组织分为不处理和处理组,处理组分别用生理盐水,10%甲醛和Bouin液在80℃恒温水浴固定5min,用微波2档(输出功率250W)固定1min.(2)将上述肿瘤组织用恒冷切片机切成5μm厚的冰冻切片数张,贴片稍于后分成不固定组和固定组,固定组分别用酒精-冰醋酸-甲醛固定液(AAF).改良的     

转移性Merkel细胞癌

1　临床资料患者女性 ,6 2岁。因“右腰部皮肤溃疡 2年”于 2 0 0 2年9月 13日首诊于四川大学华西医院。 2年前患者右腰部皮肤无诱因出现一“黑痣” ,高出皮面 ,直径约 1cm。因瘙痒抓破皮肤后形成经久不愈的溃疡 ,直径扩大至 5cm ,并伴剧痛。手术切除后病理报告为“低分化鳞癌 ,表面有曲菌感染”。术后 1月在化疗过程中发现右腹股沟处一皮下包块 ,大小为 2 5cm× 2cm ,质硬不活动 ,行活检 ,病理诊断为“淋巴结低分化鳞癌转移”。 2 0 0 3年 2月再次发现右腹股沟包块而入院行手术摘除 ,术中见右腹股沟皮下 3枚实性包块 ,直径 0 5～ 5cm ,呈…     

冷冻切片常遇到的问题及解决对策

目的 提高制作冷冻切片质量，确保实验结果科学性。方法 通过对切片机工作室温度设置选择，防卷板的调整应用及切片常遇到的问题分析，阐述提高制作高质量冷冻切片的方法。结果 通过对冷冻切片机有关参数的设定，提高了切片质量。结论 冷冻切片常遇到的问题，通过及时调整切片机相应设置，可以便捷解决。