促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌、孕激素受体及其mRNA表达的影响

目的 :了解促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、孕激素受体 (progesteronereceptor,PR)及其mRNA表达的影响。方法 :应用光学显微镜检测着床窗口子宫内膜、采用免疫组化及原位杂交方法检测正常及多囊卵巢综合征 (polycysticovariansyndrome ,PCOS)妇女促排卵治疗后子宫内膜黄体中期ER、PR及其mRNA的表达 ,放射免疫法测定同期血中雌激素 (estradiol,E2 )及孕激素 (progesterone,P)水平。 结果 :正常妇女黄体中期子宫内膜组织形态 2 2例中有 2 0例为分泌中期改变 ,2例为分泌早期改变。ER、PR弱表达 ,ERmR NA及PRmRNA的表达也较弱 ,而PCOS妇女治疗后黄体中期氯米芬 9/人绒毛膜促性腺激素组及氯米芬 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组各 15例分别有 8/ 15及 7/ 15光镜下为分泌中期改变 ,其它为分泌早期改变。ER、PR的表达增强 ,其基因的表达也明显增强 ,血清P的水平相对较低。促性腺激素释放激素激动剂 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组共 10例 ,E2 、P及P/E2 接近对照组 ,上述标志物的表达与对照组相似。但 3组PCOS分泌中期子宫内膜均有不同程度的间质增生、致密 ,腺体与间质发育不同步 ,且间质致密处ER、PR及其mR NA表达均下降。结论 :氯米芬 /人绒毛膜促性腺     

急性淋巴细胞白血病患者脑脊液中白血病淋巴细胞内DNA、RNA的定量分析

目的：观察脑脊液白血病淋巴细胞脑鞘注治疗前后细胞内DNA、RNA相对含量的变化。方法：采用激光扫描共聚焦显微术（LSCM）对15例急性淋巴细胞性白血病患者脑脊液中550个白血病淋巴细胞和鞘注治疗后脑脊液中380个白血病淋巴细胞内DNA、RNA相对含量进行定量检测,同时用荧光强度地形分布图像表示,并与正常脑脊液中小淋巴细胞内DNA、RNA相对含量进行对比。结果：脑脊液白血病巴细胞内DNA、RNA相对含量显著高于正常对照（P＜0．01）;鞘注治疗后细胞内DNA、RNA相对含量明显低于治疗前（P＜0．01）。且三者DNA、RNA荧光强度地形分布立体图像也存在着显著的判别;治疗前似圆柱菜,其顶部显强白色荧光,连成一片,完整无损,治疗后呈锯齿状,顶部显白色荧光,较治疗前弱,山峰较多,分散,连连;对照组似圆锥形,顶部显白荧光。结论：利用LSCM对脑脊液白血病淋巴细胞内DNARNA相对含量的定量分析可为CNLL诊断,鉴别诊断以及化疗药物的筛选、疗效评价,预后判断提供可靠的实验室依据。     

豚鼠内淋巴囊上皮细胞Na+,K+-ATP酶不同β亚基的mRNA表达

目的　进一步研究内淋巴囊上皮细胞Na ,K -ATP酶不同 β亚基的表达。方法　采用豚鼠内淋巴囊冰冻切片、原位杂交的方法检测Na ,K -ATP酶不同 β亚基mRNA在内淋巴囊上皮细胞中的表达。结果　在内淋巴囊上皮细胞胞浆内可见Na ,K -ATP酶不同 β亚基的阳性颗粒 ,β1亚基表达较弱 ,β2 亚基表达较强。结论　结合其他报道 ,内淋巴囊上皮细胞具有多种亚基异构体组成的Na ,K -ATP酶的表达 ,而结肠上皮、肾小管上皮的Na ,K -ATP酶几乎仅有α1β1型 ,提示其离子转运过程可能不同。     

血管内皮生长因子165反义RNA治疗人脑胶质瘤的实验研究

目的 探讨应用血管内皮生长因子１６５（ＶＥＧＦ１６５）反义ＲＮＡ治疗人脑胶质瘤的可行性。方法 构建和鉴定反义ＶＥＧＦ１６５真核表达载体;将其转染入人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４,检测其转染前、后的生物学性状;比较转染前、后ＳＨＧ４４细胞的裸鼠皮下致瘤性;分别应用免疫印迹、免疫组织化学、微血管计数、电镜和流式细胞仪检测上述改变。结果 成功构建反义ＶＥＧＦ１６５真核表达载体并在ＳＨＧ４４细胞获得表达,该细胞     

改良一步法从甲醛固定-石蜡包埋组织中提取RNA

作者利用自行改良的一步法(异硫氰酸胍方法),从甲醛固定石蜡包埋组织提取ＲＮＡ并获得成功,现报道如下。一、材料与方法1组织材料及细胞:35例胆囊组织石蜡包埋标本在手术中切下后常规10%甲醛固定2～10ｈ,石蜡包埋。标本在常温下已保存1～7年。ＫＢＶ1细胞株是人类Ｈｅｌａ细胞的子代细胞。从ＫＢＶ1细胞抽提的ＲＮＡ用作逆转录聚合酶链式反应(ＲＴＰＣＲ)实验的对照组。2.从石蜡包埋组织中分离ＲＮＡ:实验过程从一步法[1]中改良得来。根据蜡块中组织块的大小取40～100μｍ组织切片。经脱蜡、离心和梯度乙醇清洗后获取组织。组织干燥后加入0.…     

丙型肝炎产妇乳汁中HCV RNA和HCV抗体检测

应用多聚酶链反应 (ＰＣＲ)对产妇血清中ＨＣＶＲＮＡ检测 ,以及用酶免疫方法对其乳汁和血清中抗ＨＣＶ抗体的检测 ,以探讨乳汁和血清中ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ的关系。1　材料与方法1 1　检测对象　均来自本院 1996年～ 1999年产前检查产妇 1612例 ,其中有 189例曾有输血史或献血浆史的产妇。住本院 31例血清ＨＣＶＲＮＡ阳性产妇 ,年龄 2 4～ 32岁 ,以及 64例血清ＨＣＶＲＮＡ阴性产妇 ,年龄 2 3～ 32岁。1 2　检测标本　血清均为产妇分娩前清晨静脉血。乳汁标本处理 :先用温水清洗一下 ,再用消毒巾消毒乳头 ,然后…     

大肠腺癌DNA和RNA测定与转移及预后的关系

探讨大肠腺癌DNA和RNA含量的变化意义及预后的关系。方法 :对我院 1985年～ 1992年收治的术后随访 74例病人的大肠腺癌石腊标本重新切片 ,用流式细胞技术进行DNA和RNA含量测定 ,探讨其变化意义与转移预后的关系。结果 :大肠腺癌DNA异倍体与组织学类型无关 ,RNA含量与组织学类型关系密切。DNA异倍体和RNA含量大肠腺癌的Dukes’分期、淋巴结转移、其它脏器转移和根治术后复发均有关。术后生存 5年以上病人的DNA异倍体出现率和RNA含量较术后 1年内死亡病人为低 ,两者有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :DNA和RNA含量测定可作为判断大肠腺癌的恶性程度、估价预后的客观可靠指标。     

卵母细胞基因表达系统的应用研究

目的 :建立研究神经生理及药理的卵母细胞表达模型 ,并对鸡脑mRNA在卵母细胞上表达的氨基酸类受体进行研究。方法 :采用盐酸胍或异硫氰酸胍法抽提总RNA ,经寡聚脱氧胸苷 (oligo -dT)纤维素柱纯化得mRNA。mRNA微注射到卵母细胞内进行表达 ,以双电极电压钳技术研究表达的受体。结果 :模型能明显表达外源性mRNA表达的受体 ,而阴性对照无表达。在卵母细胞膜上表达的γ -氨基丁酸 (γ -aminobutyricacid ,GABA) ,甘氨酸(Glycine ,Gly)及红藻氨酸 (Kainate ,KA)受体 ,施加GABA ,Gly及KA均能引起一剂量依赖的内向电流 ,相应的拮抗剂可阻断其电流。剂量效应曲线显示GABA及KA诱导电流的半有效浓度 (EC5 0 )分别为 2 .9× 10 -5mol/L及 6 .3× 10 -5mol/L。结论 :卵母细胞可明显表达鸡脑mRNA编码的KA ,Gly及GABA受体 ,其药理特性与天然受体相似 ,是一个良好的神经生理及药理研究模型。     

江西省丙型肝炎病毒的基因型分布

目的：探讨江西地区HCV基因型分布。方法：限制性片断长度多态性分析（RFLP）分析89例HCV－RNA阳性病人HCV的基因型。结果：89例HCV－RNA阳性中,HCVⅡ型81例,占91．01％（81／89）;HCVⅢ型7例,占7．87％（7／89）;HCVⅡ／Ⅲ混合型1例,占1．12％（1／89）。HCVⅡ型81例中,急性丙型肝炎5例,慢性丙型肝炎75例,占92．6％,肝功能正常,HCV慢性携带1例。HCVⅢ型7例中,急性丙型为3例,慢性再型肝炎4例,占57％,HCVⅡ／Ⅲ混合型1例,为急性丙型肝炎。结论：江西省丙型肝炎基因基以Ⅱ型为主,占91．1％,与HCVⅢ相比较,HCVⅡ型感染与慢性肝炎有更密切关联。     

丙肝患者外周血单个核细胞中HCVRNA的检测及临床意义

为探讨外周血单个核细胞中HCVRNA的检测对诊断丙型肝炎病毒感染及评价丙肝抗病毒治疗效果的临床意义 ,采用RT -PCR法对 96例慢性丙肝患者进行了血清及外周血单个核细胞 (PBMC)中HCVRNA的检测。结果血清HCVRNA( +) 40例 ,PBMC中HCVRNA( +) 32例 ,其中 16例为血清HCVRNA( -)。 40例慢性丙肝患者进行了抗病毒治疗 ,治疗后有 8例患者血清及PBMC中HCVRNA半年内未检出。认为PBMC中病毒序列的检测可能增加检测到HCV感染的机会 ,同时检测血清及PBMC中HCVRNA有助于预测抗病毒治疗的效果