青蒿琥酯诱导瘢痕成纤维细胞凋亡的实验研究

目的探讨青蒿琥酯（artesunate，Art）诱导皮肤瘢痕成纤维细胞凋亡的作用及机制。方法取自愿捐献的人耳垂增生性瘢痕，采用组织块贴壁法进行细胞培养。经免疫组织化学染色鉴定后，取第3～5代成纤维细胞，采用含60、120和240mg／LArt培养液各5ml培养作为实验组，仅加入等量的培养液作为对照组。于倒置显微镜及透射电镜观察，采用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期。另取第3～5代成纤维细胞，实验组采用30、60和120mg／LArt培养液，对照组仅加入等量的培养液，观察细胞内钙离子的变化。结果原代成纤维细胞呈典型的梭形贴壁生长，免疫组织化学鉴定细胞波形蛋白呈阳性表达；倒置显微镜下观察Art在60～240mg／L浓度范围内抑制成纤维细胞生长且呈剂量及时间依赖性，细胞出现凋亡征象；透射电镜观察，各实验组出现染色质浓缩，沿着核膜排列，甚至核碎裂现象。细胞周期分析显示各实验组与对照组比较，凋亡细胞比例、处于G0～G1、S、G2～M期细胞数差异均有统计学意义（P〈0．05），实验组均出现典型的凋亡峰，且随药物浓度增加，峰值越大。Art在30～120mg／L作用成纤维细胞24h可引起细胞内钙离子浓度持续增加，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Art通过作用于成纤维细胞周期诱导细胞凋亡，细胞内钙离子浓度升高可能是其诱导成纤维细胞凋亡的机制之一。     

蛙皮素对PC-3细胞骨架及细胞内游离Ca~(2+)的影响

目的:观察蛙皮素(BBS)对前列腺癌PC-3细胞骨架形态及细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)浓度的影响。方法:①利用免疫荧光法(IH),结合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测10-5mol/L浓度BBS处理的PC-3细胞角蛋白(CK)的表达,以反映其对细胞骨架形态的影响;②应用Fluo-3/AM荧光标记技术和LSCM检测不同浓度BBS(10-9、10-7、10-5mol/L)处理的PC-3细胞[Ca2+]i浓度。结果:①10-5mol/L浓度的BBS可促进PC-3细胞CK表达及伪足形成;②BBS可提高PC-3细胞[Ca2+]i浓度,并具有浓度依赖性。结论:实验证明一定浓度的BBS可明显提高PC-3细胞[Ca2+]i浓度及CK表达,进而影响PC-3细胞骨架形态。本研究为探索BBS应用于肿瘤研究以及BBS作用后细胞内信息传递途径提供了基础。     

一种新型抗HIV-1药物筛选方法的建立

目的用细胞共培养和流式细胞仪检测建立新型抗HIV－1药物筛选方法,并判断这种方法在筛选抗HIV－1药物中的应用前景。方法把JLTRG细胞和H9／HTLV－ⅢB细胞按照不同比例共培养24,48,72和96h。在荧光显微镜下观察细胞绿色荧光强度和密度,同时用流式细胞仪测定绿色荧光的表达,并确定培养体系中最佳细胞比例和培养时间。通过选出的最佳条件结合药物半衰期检测恩夫韦肽（T20）和依非韦伦（EFV）的有效性及药物半数抑制量（IC50）。采用HIV－1P24抗原荧光定量PCR法检测病毒载量,并采用Spearman秩相关性分析法判断其与药物浓度及平均荧光强度之间的相关性。结果实验结果显示,JLTRG细胞与H9／HTLV—ⅢB细胞按照10：1的细胞数量比例共培养72h为最佳培养比例和时间。以T20和EFV对共培养体系进行验证,结果显示随着T20和EFV浓度的改变,共培养体系中JLTRG细胞感染HIV－1的程度不同,其IC50分别为10nmol／L和5nmol／L。T20和EFV药物浓度与平均荧光强度以及病毒载量呈负相关（r=－1,－0．986和－1,－l,P〈0．01）;平均荧光强度与病毒载量呈正相关（r=0．986和l,P〈0．01）。结论本研究建立的新型抗HIV一1药物筛选方法具有耗时短、操作方便等优点,可为抗HIV－1药物的筛选提供新的选择。     

The pre-transplant anemic condition is independent of long-term outcome in living-related kidney transplantation

The relationship between pre-transplant Hemoglobin (Hb) concentration and long-term outcome of living-related kidney transplantation is far from well addressed. A retrospective cohort study was conducted by reviewing the medical profile of the patients who received living-related kidney transplantations at our center from January 2006 to January 2013. Patients were divided into two groups: high Hb group (≥10?g/dL) and low Hb group (<10?g/dL). Cox regression model was utilized to analyze the effect of pre-transplant hemoglobin concentration on the patient and graft survival. About 422 patients were of Hb level <10?g/dL (78.30?±?14.18?g/dL), 280 were >10?g/dL (116.2?±?14.43?g/dL) (p?p?=?0.096; and 4.04% vs. 2.14%, p?=?0.165, respectively). Cox regression model revealed that pre-transplant Hb level <10?g/dL was independent of increased overall mortality (HR?=?3.379; 95% CI: 0.706–17.172) and increased death censored allograft failure risk (HR?=?1.556; 95% CI: 0.595–4.069). Pre-transplant Hb concentration <10?g/dL is independent of poor long-term outcome of living-related kidney transplantation.     

米非司酮调控乳腺癌细胞增殖的研究

目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T47D1、2、3d后,观察细胞形态变化,以及检测各组细胞生长曲线。结果米非司酮对乳腺癌MCF-7和T47D细胞均有抑制作用,其抑制率均随着米非司酮浓度的增加而变化,存在明显的量效关系。通过对两种细胞抑制率(IR)值直线回归分析,米非司酮对MCF-7细胞的IC50为51.21μmol/L,对T47D细胞的IC50为54.29μmol/L。形态学观察发现,各组细胞体积变小,细胞间的链接消失,细胞内明显有黑色小颗粒聚集。25和50μmol/L浓度米非司酮对MCF-7乳腺癌细胞株生长抑制作用明显,特别是50μmol/L干预24h后在高倍镜下可见明显的核质浓缩。结论米非司酮对病理分型、激素受体型不同的乳腺癌MCF-7和T47D细胞均具有抑制增殖的作用,并呈时间和剂量依赖效应。     

Assessing the impact of blood alcohol concentration on the rate of in-hospital mortality following traumatic motor vehicle crash injury: A matched analysis of the National Trauma Data Bank

Background

The purpose of this study was to compare the outcomes of trauma patients who were injured in a motor vehicle crash and tested positive for alcohol upon hospital arrival versus those who tested negative.

环丙沙星-固体脂质纳米粒的制备及抗菌效果

目的 制备环丙沙星固体脂质纳米粒并检测其抑菌效果。方法 以胆固醇为脂质,以吐温80为表面活性剂,采用乳化-低温固化法制备固体脂质纳米粒并对其进行表征,包括粒径、Zeta电位、载药量、包封率、分散性以及体外缓释。使用二倍稀释法测定药物对大肠杆菌的最低抑菌浓度。结果 透射电镜扫描可见环丙沙星-固体脂质纳米粒粒径呈球形,直径40~70nm;Zeta电位（-21.8±1.3） mV;包封率为77.54%;载药量31.10%;紫外-可见光谱见纳米粒中环丙沙星280nm处特征性吸收波峰;体外缓释72h的累计释放度为78.6%。环丙沙星固体脂质纳米粒的最低抑菌浓度为0.8μg/mL,环丙沙星最低抑菌浓度为1.6μg/mL。结论 采用乳化-低温固化法成功制备环丙沙星固体脂质纳米粒,方法简便。固体脂质纳米可提高环丙沙星抑菌效果。     

脐动脉血气pH值对剖宫产新生儿住院期间并发症的预测价值

目的:分析脐动脉血气pH值对剖宫产新生儿住院期间并发症的预测价值。方法:本研究为回顾性队列研究,选择2017年1月1日至6月30日在北京大学第一医院剖宫产娩出并完成脐动脉血气分析的新生儿为研究对象,主要观察终点是新生儿住院期间并发症发生率。按照新生儿是否发生住院期间并发症将研究对象分为两组,比较两组间脐动脉血气pH值。收集母婴围产期的资料和新生儿住院期间并发症的资料,采用ROC曲线分析脐动脉血气pH对新生儿住院期间并发症的预测价值。结果:共纳入872例新生儿(择期541例、急诊331例),新生儿住院期间并发症的总体发生率为14.1%,其中发生率最高的3项分别为感染、吸入性肺炎及心肌损伤。无并发症组pH值平均为7.31,有并发症组pH值平均为7.29,组间比较差异有统计学意义(P<0.001)。本研究中pH≤7.20的总体比例为3.1%(27/872),其中无并发症组pH值≤7.20的比例为1.6%(12/749),有并发症组pH值≤7.20的比例为12.2%(15/123),组间比较差异有统计学意义(P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,早产(OR=8.224, 95%CI: 4.910~13.777, P<0.001)、妊娠期高血压(OR=1.886, 95%CI: 1.004~3.546, P=0.049)、宫内生长受限(OR=4.429, 95%CI: 1.280~15.330, P=0.019)、急诊剖宫产(OR=2.711, 95%CI: 1.682~4.369, P<0.001)、脐动脉血气pH值≤7.20(OR=7.420, 95%CI: 2.951~18.655, P<0.001)及5分钟Apgar评分小于10分(OR=11.849, 95%CI: 3.977~35.128, P<0.001)是新生儿发生住院期间并发症的危险因素。脐动脉血气pH值预测全部新生儿、择期新生儿及急诊新生儿住院并发症的ROC曲线下面积分别为0.570(95%CI: 0.508~0.633, P=0.012)、0.559(95%CI: 0.465~0.652, P=0.189)及0.617(95%CI: 0.538~0.697, P=0.002)。结论:脐动脉血气pH值≤7.2与剖宫产新生儿住院并发症发生率增加有相关性,但是ROC分析显示其预测价值较低。     

Sodium removal and sodium concentration during peritoneal dialysis: effects of three methods of sodium measurement.

BACKGROUND: Sodium removal (NaR) may have a major impact on the survival of peritoneal dialysis patients. The dialysate/plasma sodium concentration ratio (D/P(Na)) is an indirect index of transcellular water transport by aquaporin channels, and thus of ultrafiltration. Sodium concentration can be assessed by means of flame photometry (F), and direct (D-ISE) or indirect ion-selective electrodes (I-ISE), but these methods have different properties. I-ISE is being used increasingly in clinical laboratories. The aim of this study was to evaluate NaR and D/P(Na) using the three different measurement methods. METHODS: We performed peritoneal equilibration tests (PETs) in 44 peritoneal dialysis patients and calculated the NaR. We also calculated D/P(Na) during the test; plasma and dialysate sodium concentrations were measured by F, D-ISE and I-ISE. RESULTS: NaR was lower (P<0.001) with D-ISE (69+/-29 mmol) than with F (81+/-29 mmol) or I-ISE (79+/-28 mmol). D/P(Na) was also lower at baseline (0.92+/-0.02 vs 0.95+/-0.02 and 0.95+/-0.02; P<0.001), after 60 min (0.87+/-0.03 vs 0.90+/-0.03 and 0.90+/-0.03; P<0.001) and at the end of PET (0.88+/-0.04 vs 0.92+/-0.04 and 0.92+/-0.04; P<0.001) when measured by D-ISE in comparison with F and I-ISE, respectively. CONCLUSIONS: NaR and D/P(Na) were lower when measured by the D-ISE method compared with the F and I-ISE methods. NaR and D/P(Na) were similar when measured by F or I-ISE. I-ISE can be used reliably in the evaluation of NaR and D/P(Na) in everyday clinical practice of peritoneal dialysis.     

青海省环境中氡及其子体浓度所致居民内照射剂量

本文对青藏高嫌北部的青海省室内外氡-222及其子体进行了测量。采用闪烁法测氡浓度, 托马斯三段法测氡子体α潜能浓度。测量了162个居室和161个室外的氡及其子体浓度。全省室内外氡的平均浓度分别为：20.94Bq·m^-3和8.01mq·m^-3。