人MxA基因重组真核载体抗乙型肝炎病毒作用的实验室研究

目的:研究重组真核载体PcDNA3.l-MxA体外抗HBV的作用,为研究MxA基因(myxovirus-resistant A)治疗慢性HBV感染奠定基础.方法:将构建成功的重组真核载体PcDNA3.l-MxA转染入HepG 2.2.15.将HepG 2.2.15分为实验组(转染PcDNA3.1-MxA的HepG 2.2.15)和对照组(转染PcDNA3.1的HepG 2.2.15),应用RT-PCR方法检测两组HepG2.2.15内MxAmRNA(P<0.01),并应用ELISA法检测两组HepG2.2.15内HBsAg、HBeAg的水平.结果:RT-PCR扩增结果显示实验组的MxAmRNA水平均较对照组明显升高,实验组HBsAg、HBeAg水平明显低于对照组(均P<0.01).结论:转染重组真核载体PcDNA3.l-MxA HepG2.2.15内MxA蛋白明显抑制了HBV DNA的复制及表达,为进一步研究MxA蛋白体内抗病毒作用提供理论.     

HBV侵入PBMC后对乙肝患者细胞免疫功能的影响

为探讨ＨＢＶ侵入ＰＢＭＣ后对乙型病毒性肝炎患者细胞免疫功能的影响，本文应用ＰＣＲ技术和生物素—链霉亲合素（ＢＳＡ）系统分别检测９７例乙肝患者的外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）内ＨＢＶ—ＤＮＡ和ＣＯ＋３、ＣＯ＋４、ＣＯ＋８、ＣＯ＋４／ＣＯ＋８及经ＰＨＡ诱导前后膜白介素—２受体（ｍＩＬ—２Ｒ）的表达水平。结果显示乙型病毒性肝炎患者Ｔ细胞亚群及ｍＩＬ—２Ｒ水平与正常对照相比较，均显著降低（Ｐ＜０．０１）。ＰＢＭＣ内ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性组与阴性组相比较，ＣＯ＋３、ＣＯ＋４百分率降低、ＣＤ＋８百分率增高、ＣＯ＋４／ＣＯ＋８比值下降及ｍＩＬ—２Ｒ表达水平低下，二组差别有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。说明乙型病毒性肝炎患者细胞免疫功能明显低下，ＨＢＶ感染ＰＢＭＣ后可引起乙肝患者的细胞免疫功能紊乱     

乙型肝炎病毒(adw_2)亚型全基因组的分子克隆

应用基因克隆技术,使高纯度的HBV DNA(adw_2)的EcoRI酶切片段分别与经同种限制性内切酶切割的PBR322和pUC18质粒DNA片段重组,转化到相应的E.coli受体菌中,经筛选和鉴定,得到了含有完整HB V(adw_2)基因组的分子克隆。     

TTV与HBV、HCV的重叠感染与HCC家庭聚集性的关系研究

目的:探讨广西肝癌高发区输血传播病毒(TTV)与乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)的重叠感染在原发性肝细胞癌(HCC)家庭聚集性中的作用.方法:分别采用巢式PCR和RT-PCR技术对研究对象外周血清中TTVDNA、HBVDNA和HCVRNA进行检测,应用χ2检验进行统计学分析.结果:HCC高发家庭成员组及无癌家庭成员组中TTVDNA、HBV DNA、HCVRNA阳性率分别为35.4%(46/130)、29.2%(38/130)、10.0%(13/130)和 24.6%(32/130)、10.8%(14/130)、3.8%(5/130),两组间TTVDNA、HBVDNA、HCVRNA阳性率差异有统计学意义(χ2=4.12、P=0.04、RR=1.81、95%CI=1.018～3.219;χ2=14.97、P=0.000 1、RR=3.765、95%CI=1.88～7.54;χ2=3.91、P=0.048、RR=2.84、95%CI=0.972～8.29).两组TTV与HBV、HCV重叠感染率分别为7.7%(10/130)、3.8%(5/130)和1.5%(2/130)、1.5%(2/130),TTVDNA HBVDNA感染率在两组间差异有统计学意义(χ2= 5.591 4、P=0.018 0、RR=5.33、95%CI=1.15～24.84);而TTVDNA HCVRNA阳性率在两组间差异无统计学意义(χ2=1.321 3、P=0.250 4、RR=2.56、95%CI=0.49～13.44).结论:TTV、HBV、HCV感染以及TTV和HBV的重叠感染与广西HCC家庭聚集性存在一定的相关关系,但 TTV和HBV重叠感染在致肝癌上无明显协同作用.     

辅助性T细胞17及调节性T细胞在慢性乙型肝炎患者外周血的变化及意义

目的 探究辅助性T细胞17及调节性T细胞在慢性乙型肝炎病毒感染患者外周血的变化及意义。方法 以2016年5月—2017年5月在深圳市龙华区中心医院肝病房收治的120例慢性乙型肝炎病毒感染患者为研究对象,根据慢性乙型肝炎诊断标准分为轻、中、重度三组患者,其中轻度患者31例,中度患者48例,重度患者41例,同时选取本院60例健康体检者作为对照组。采用流式细胞仪对辅助性T细胞17（Th17）及调节性T细胞(Treg)进行监测,同时对各组患者的肝功指标:血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)进行检测,对四组患者的以上指标进行比较分析。结果 中度组ALT和AST的含量要高于轻度组,差异存在统计学意义（t=8.264、10.237,P<0.05）,重度组ALT和AST要高于中度组,差异存在统计学意义（t=11.036、17.209,P<0.05）。中、重度组乙型肝炎病毒感染者的Th17表达率均要高于健康对照组（t=16.230、18.714,P<0.05）;各感染组的Th17表达率差异存在统计学意义（F=22.783,P<0.05）;轻、中和重度组感染乙肝病毒的患者Treg表达率要高于健康对照组（t=3.201、3.784、4.115,P<0.05）,而不同程度地感染乙型肝炎的各组之间无差异（P>0.05）; 轻、中和重度组感染乙肝病毒的患者Th17/Treg 比值要高于健康对照（t=21.306、24.397、28.001,P<0.05）,且不同程度地感染乙型肝炎的各组之间差异存在统计学意义（F=35.067,P<0.05）。结论 慢性乙型肝炎病毒感染的患者随着病情的发展Th17和Treg细胞水平会呈现一定的上升趋势,Th17/Treg比值较单一的 Th17、Treg 表达率更能反映肝脏受侵害的病情发展。     

伴或不伴肝硬化原发性肝癌临床特点的对比分析

目的 :探讨伴和不伴肝硬化的原发性肝癌的临床特点。方法 :对 2 81例伴肝硬化和 14 7例不伴肝硬化的肝癌患者的临床资料及实验室检验指标进行对比分析。结果 :与不伴肝硬化的肝癌患者相比 ,伴有肝硬化的肝癌患者起病隐匿、HBV感染率更高 (85 1%vs 6 7 3% ,P <0 0 1) ,AFP以及AST升高明显 (P <0 0 5 ) ,手术切除机会少。结论 :伴肝硬化的肝癌与HBV感染有更强的相关性 ,监测AFP对发现肝硬化癌变意义大 ,而早期B超对不伴肝硬化的肝癌诊断更为重要。     

PCR微流芯片与基因芯片、基因测序在HBV基因型、病毒变异上应用比较

目的 对PCR微流芯片与基因芯片、基因测序在HBV基因型、病毒变异上应用进行比较。方法 分别采用PCR-微流芯片、基因芯片法对15例临床考虑拉米呋定耐药的患者血清进行HBV多点变异检测,从中随机抽取8例患者标本采用PCR-微流芯片、基因测序法进行HBV基因型、HBVYMDD检测。结果 基因芯片法与PCR--微流芯片检测HBV多点变异9／15三项完全一致,3／15两项一致;8例患者双份标本两种方法检测HBV基因型结果完全一致均为IIBVC型;基因测序法8例患者中1例HBVYMDD阳性,PCR微流芯片法8倒患者中栓出2倒HBVYMDD。结论 PCR-微流芯片法与基因芯片法、基因测序法有较好的一致性．适用于临床和流行病学调查研究。     

Chemoprevention of liver cancer by plant polyphenols

Primary liver cancer or hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most frequent tumors representing the fifth commonest malignancy worldwide and the third cause of mortality from cancer. Currently, the treatments for HCC are not so effective and new strategies are needed for its fight. Chemoprevention, the use of natural or synthetic chemical agents to reverse, suppress or prevent carcinogenesis is considered an important way for confronting HCC. Many of the chemopreventive agents are phytochemicals, namely non-nutritive plant chemicals with protective or disease preventive properties. In this review, we focus on plant polyphenols, one of the most important classes of phytochemicals, their chemopreventive properties against HCC and discuss the molecular mechanisms accounting for this activity.     

PegIFN-α2a for the treatment of chronic hepatitis B and C: a 10-year history

Chronic HBV and HCV are progressive diseases leading to cirrhosis and liver transplantation. Persistent viral eradication or suppression can positively affect the natural course of the infection, by preventing disease progression. Since its introduction more than 30 years ago, IFN-α has represented the foundation of HBV and, lately, anti-HCV treatment. Pegylation of the IFN-α molecule (PegIFN-α2a) has provided improvements in both efficacy and administration schedule, thus becoming part of the standard-of-care regimen for HCV and HBV therapy in the last 10 years. Currently, treatment of finite duration with PegIFN-α2a may achieve a sustained virological response off-treatment and HBsAg seroconversion. PegIFN-α2a will most likely remain the backbone of HCV treatment for the next few years, despite the availability of direct-acting antivirals that are expected to improve cure rates. However, many efforts are concentrated on developing new compounds, with the goal of administrating all oral regimens and eliminating PegIFN from anti-HCV treatment.