蓬子菜总黄酮对氧化损伤人脐静脉内皮细胞NF-κB/IκB信号途径的影响

目的:研究蓬子菜总黄酮(FGV)对过氧化氢(H2O2)损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)保护作用的机制。方法:采用体外培养的HUVECs,取对数生长期的细胞调整细胞密度为7.5×104/m L,置培养箱中培养至细胞达80%融合时,将细胞随机分为5组:空白组、模型组(仅加入浓度为100μmol·L-1的H2O2培养4 h),FGV保护组(质量浓度分别为12.5,25,50 mg·L-1的FGV培养24 h,之后加入浓度为100μmol·L-1的H2O2培养4 h),每组设4个复孔。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制率;荧光分光光度法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)的含量;酶联免疫分析方法(ELISA)检测血栓调节蛋白(TM)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的分泌水平。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测核因子-κB(NF-κB)/NF-κB抑制因子(IκB)mRNA表达。结果:模型组细胞MDA,TM,VEGF分泌水平以及NF-κB mRNA表达均显著升高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01);FGV保护组可显著降低模型细胞增殖抑制率,MDA,TM,VEGF分泌水平以及NF-κB mRNA表达(P<0.05,P<0.01),提高SOD活性(P<0.01)。结论:FGV具有明显的抗氧化损伤及保护HUVECs的作用,其机制可通过对NF-κB/IκB信号途径的调节。     

Novel Flavanone Glucoside with Free Radical Scavenging Properties from Galium fissurense

Abstract

From the herb of Galium fissurense, a new flavanone glucoside was isolated and characterized as 5,7,3′-trihydroxy-flavanone-4′-O-β-D-glucopyranoside (1) from spectroscopic evidence. In addition, three known compounds (luteolin, apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside, naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside) were isolated for the first time from this plant. The free radical scavenging properties of the four compounds were studied by use of in vitro electron spin resonance spectrometry. The new compound showed potent antioxidant activity.     

中药蓬子菜的研究进展

本文就近年来有关蓬子菜的生莼学研究、化学成分研究、药理活性及临床应用研究等方面作一综述，为该药的进一步研究和开发奠定基础。     

蓬子菜黄酮类化合物对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的机制研究

目的 探讨莲子菜黄酮类化合物香叶木素-7-O-β-D-木糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(DXG)对人肝癌细胞株HepG2增殖的抑制作用及其诱导HepG2细胞凋亡的机制.方法 台盼蓝染色法检测DXG对HepG2细胞生长的影响;MTT法检测DXG对细胞增殖的抑制作用;吖啶橙/溴乙(AO-EB)荧光染色法观察DXG对HepG2细胞凋亡的形态学影响;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA图谱变化;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因bcl-2及bax的表达.结果 台盼蓝染色和MTT检测显示,DXG 50、100、200 μg/mL能明显抑制HepG2细胞增殖,与对照组相比差异显著(P＜0.05).AO-EB染色可见DXG诱导HepG2细胞凋亡并发生形态学改变,且随DXG的质量浓度升高,凋亡细胞的比例显著增加.琼脂糖凝胶电泳显示,HepG2细胞经DXG 100、200 μg/mL处理48 h后,可见DNA“梯形”碎片条带.RT-PCR实验表明,DXG下调细胞凋亡的抑制基因bcl-2 mRNA表达,促使凋亡基因bax mRNA表达增强.结论 DXG具有显著抑制人肝癌细胞HepG2增殖、诱导其凋亡的作用,其作用机制与调控bax/bcl-2的表达有关.     

蓬子菜的化学成分

目的 对茜草科拉拉藤属植物蓬子菜（Galium verum L.）全草的乙醇提取物进行分离并鉴定。方法 经反复纯化制备化合物,并通过化合物的理化性质分析、波谱解析、对照品比较及与文献报道对比鉴定化合物的化学结构。结果 分离得到7个化合物,根据理化性质和波谱学解析分别鉴定为东莨菪素(1)、阿魏酸(2)、对羟基苯丙酸(3)、香豆酸三十二烷酯(4)、正三十二烷醇(5)、β-谷甾醇(6)和胡萝卜苷(7)。结论 化合物1~5为从本属首次分离得到。     

蓬子菜水溶液对股动脉硬化闭塞症家兔模型血清C-反应蛋白的影响

目的:观察蓬子菜水溶液对股动脉硬化闭塞症家兔模型的血清C-反应蛋白的影响,进一步探讨蓬子菜水溶液治疗动脉硬化闭塞症的作用机理。方法:采用复合手段制成股动脉硬化闭塞症家兔模型,观察蓬子菜水溶液对其血清血清C-反应蛋白的影响。结果:蓬子菜水溶液可降低股动脉硬化闭塞症家兔血清C-反应蛋白,并且明显优于对照组(P0.01)。结论:蓬子菜水溶液可降低血清C-反应蛋白,对动脉硬化闭塞症的发生发展有着很好的抑制作用,起着积极的治疗作用。     

蓬子菜中香叶木苷抗急性血瘀作用及机制研究

目的 研究蓬子菜活性成分香叶木苷抗急性血瘀作用及其作用机制。方法 采用sc盐酸肾上腺素复合冰水浴制备大鼠急性血瘀模型,ig给予不同剂量香叶木苷(45、90、180 mg/kg),阿司匹林为阳性药,应用血液流变测试仪、全自动血沉仪检测血液流变学指标:全血黏度、血浆黏度、红细胞比容、血沉及红细胞聚集指数;采用试剂盒法检测血浆炎症因子C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果 与模型组比较,香叶木苷能不同程度降低全血黏度、血浆黏度、红细胞比容、血沉及红细胞聚集指数,明显改善血瘀大鼠血液流变学指标;显著降低炎症因子CRP、TNF-α和IL-1β水平。结论 香叶木苷有效改善急性血瘀大鼠血液流变学异常,减少炎症因子释放,从而治疗急性血瘀及静脉炎症,改善微循环。     

蓬子菜总黄酮诱导NB4细胞凋亡作用及机制

目的 观察蓬子菜总黄酮（FGVL）诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株（NB4）细胞凋亡作用,并探讨其作用机制。方法 FGVL（50、100、200 μg/mL）作用于体外培养的NB4细胞,Hoechst染色观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡状况;RT-PCR检测NB4凋亡相关基因Mel-18、Sall4、Bmi-1 mRNA表达。结果 细胞形态学观察显示,NB4细胞经FGVL处理48 h后,与对照组比较,FGVL各剂量组NB4细胞凋亡比例均明显升高（P<0.05）,呈现细胞核固缩、核碎裂及凋亡小体等典型的细胞凋亡特征;与对照组（2.3%）比较,50、100、200 μg/mL FGVL组NB4细胞凋亡率（分别为9.3%、13%、20.4%）明显升高（P<0.05）;细胞周期检测结果显示,与对照组比较,50、100、200 μg/mL FGVL组NB4细胞G0/G1期细胞比例（分别为43.92%、37.26%、29.15%）减少,S期细胞比例（54.16%、62.23%、70.46%）增多;与对照组比较,100、200 μg/mL FGVL组NB4细胞Mel-18 mRNA表达水平升高,Sall4、Bmi-1 mRNA表达水平明显降低。结论 FGVL可阻滞NB4细胞于S期,抑制细胞增殖,通过调节Mel-18、Sall4、Bmi-1等凋亡相关基因表达诱导细胞凋亡。     

八仙草化学成分研究

目的对中草药八仙草（Galium aparineL.）全草的60%乙醇提取物进行化学成分研究。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及制备薄层等方法进行分离纯化,通过波谱解析和理化鉴别进行结构鉴定。结果分离鉴定了11个化合物,分别为对羟基苯甲酸（1）,香草酸（2）,原儿茶酸（3）,胞嘧啶（4）,胞嘧啶核苷（5）,尿嘧啶（6）,尿嘧啶核苷（7）,腺嘌呤核苷（8）,1,3-二羟基蒽醌（9）,1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-新橙皮糖苷（10）,1,4-二羟基-3-异戊烯基-2-萘酸甲酯双葡萄糖苷（11）。结论化合物1-11均为首次从该植物中分离得到。     

蓬子菜总黄酮调节 miR - 205 保护心肌微血管内皮细胞损伤的机制研究

目的 研究蓬子菜总黄酮（FGVL）对缺氧/复氧（H/R）诱导的心肌微血管内皮细胞损伤的影响及机制。方法 实验分为对照（Con）组、缺氧/复氧组、蓬子菜总黄酮低、中、高浓度（H/R + FGVL - L、M、H）组、H/R + miR - NC组、H/R + miR - 205组、H/R + FGVL + anti - miR - 205组。试剂盒检测乳酸脱氢酶（LDH）水平、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹（western blot）法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR（RT - qPCR）检测miR - 205表达水平。结果 低、中、高浓度蓬子菜总黄酮处理后,缺氧/复氧诱导的心肌微血管内皮细胞中LDH水平降低,MDA含量降低,SOD活性升高（P＜0.05）;细胞凋亡率降低,Bcl - 2表达水平升高,Bax表达水平降低,miR - 205表达水平升高,且呈浓度依赖性（P＜0.05）。miR - 205过表达可抑制缺氧/复氧诱导的心肌微血管内皮细胞氧化应激和凋亡。抑制miR - 205表达逆转了蓬子菜总黄酮对缺氧/复氧诱导的心肌微血管内皮细胞损伤的作用。结论 蓬子菜总黄酮可能通过上调miR - 205表达保护缺氧/复氧诱导的心肌微血管内皮细胞损伤。