生晒参超微饮片对脾虚小鼠小肠黏膜形态学的影响

目的观察生晒参超微饮片对脾虚小鼠小肠黏膜形态学的影响。方法选用雄性昆明种小鼠,随机分为正常组、空白对照组、生晒参汤剂组、生晒参超微饮片全剂量组(含生药2.5g/kg)及生晒参超微饮片1/2剂量组(含生药1.25g/kg),采用利血平法制备脾虚动物模型,分别给予生理盐水、生晒参超微滤液及生晒参传统汤剂,造模及给药后处死小鼠,取小肠空肠段作光镜HE染色观察小鼠小肠黏膜形态改变,电镜观察小肠超微结构变化。结果用药后生晒参超微饮片全剂量组能明显改善脾虚小鼠小肠上皮微绒毛,改善细胞质和细胞器结构,有显著的修复作用。结论生晒参超微饮片对脾虚小鼠小肠黏膜的修复作用优于生晒参传统汤剂。     

p21-EGFP 融合基因表达载体与卵母细胞的表达定位

目的:通过构建绿色荧光蛋白p21-EGFP融合基因表达载体,观察其在小鼠卵母细胞中的表达及定位,为研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21对小鼠卵母细胞细胞周期的影响提供实验基础.方法:以含有p21的全长序列的质粒为模板PCR扩增p21cDNA , 应用基因重组技术与EGFP 基因融合, 构建以绿色荧光蛋白EGFP为报告基因的重组表达质粒pEGFP-p21.利用显微注射方法注射到小鼠卵母细胞中进行表达,用荧光显微镜直接观察pEGFP-p21融合蛋白在细胞中的分布和定位, Western Blot 方法检测其蛋白的表达.经酶切证实插入片断的正确性.结果:荧光显微镜观察结果显示在空载体pEGFP-C3转染的小鼠卵母细胞中,绿色荧光呈弥散分布,而经注射重组质粒pEGFP-p21 的小鼠卵母细胞中, 绿色荧光主要集中在细胞核内.同时用Western Blot 证实了pEGFP-p21 融合基因的表达.结论:成功的构建了pEGFP-p21 融合表达质粒.同时证明小鼠卵母细胞能高效表达pEGFP-p21 融合基因, 且主要定位于细胞核内.     

血府逐瘀汤联合5-氟尿嘧啶治疗小鼠移植性肿瘤的实验研究

目的探讨化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合血府逐瘀汤治疗小鼠移植性肿瘤的效果。方法72只小鼠常规移植肿瘤细胞H22制作移植肿瘤模型后,随机分为6组,并予生理盐水、5-Fu注射及血逐瘀汤低、中、高剂量灌胃和5-Fu与血府逐瘀汤的剂量联合应用观察其抑瘤作用和肿瘤坏死情况。结果联合治疗可以降低5-Fu的毒副反应,且小鼠抑瘤率明显高于血府逐瘀汤组和血府逐瘀汤组小鼠肿瘤可见明显的较大面积坏死区。结论抗血管生成制剂血府逐瘀汤联合5-Fu治疗小鼠移植性肿瘤有较好疗效。     

呼吸道合胞病毒诱发的哮喘小鼠模型的建立

[目的]探讨建立呼吸道合胞病毒诱发的哮喘小鼠模型的方法，为研究哮喘发病机理、筛选有效的治疗药物奠定基础。[方法]随机将BALB／C小鼠分成正常对照和模型组两组。用福尔马林灭活的呼吸道合胞病毒（FI-RSV）致敏、激发模型组小鼠，观察激发后小鼠的哮喘症状；分别于激发后0、24、48、72h处死动物，摘眼球取血分离血清，ELISA测定血清IgE、IL-4、IFN-γ水平；取肺组织行HE染色，观察支气管黏膜及黏膜下炎症细胞浸润及EOS的浸润情况。[结果]模型组小鼠激发即刻可见典型的哮喘症状。激发后24h肺组织炎症细胞浸润最多。模型组小鼠血清IgE、IL-4水平均低于正常对照纽；IFN-γ均高于正常对照组；模型组小鼠激发后24h血清IgE、IL-4水平最高，IFN-γ水平最低（P〈0．05或P〈0．01）。结论：FI-RSV复制BALB／C小鼠哮喘模型成功可行，且24h小鼠哮喘模型较理想。     

滋补脾阴方药含药血清对内质网应激神经元损伤的保护作用及机制研究

目的:运用中药血清药理学方法研究滋补脾阴方药含药血清对内质网应激的保护作用并探讨其机制。方法:以N-糖链抑制剂衣霉素(tunicamycin,Tm)刺激小鼠神经瘤母细胞Neuro2a建立内质网应激模型,滋补脾阴方药含药血清为干预组,采用逆转录聚合酶链式反应方法观察葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)和凋亡促进因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/EBP homologousprotein,CHOP)的mRNA表达;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放试验观察Tm、星形孢菌素(staurosporine,STS)刺激Neuro2a细胞后的LDH泄漏率。结果:各浓度滋补脾阴方药含药血清预处理组GRP78及CHOP mRNA表达与Tm(5μg/ml)组相比,表达水平明显下调,差异有统计学意义(P<0.05),因此滋补脾阴方药含药血清可以抑制Tm诱导内质网应激时GRP78及CHOP mRNA的表达。各浓度滋补脾阴方药含药血清预处理组与Tm组相比,LDH泄漏率明显下降(P<0.05),因此滋补脾阴方药含药血清可以降低Tm和STS刺激后的LDH泄漏率。结论:滋补脾阴方药具有神经保护作用,其机制可能是通过抑制内质网应激及线粒体损伤。     

小鼠脾细胞在混合骨髓移植中的作用

目的:观察同异基因小鼠脾细胞输注比例和输注量在混合半相合骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)和嵌合状态的影响.方法:受鼠全身照射后,经尾静脉回输同基因和半相合异基因供鼠骨髓及两者不同比例脾细胞.A组未加入异基因供鼠脾细胞,B组加入的同异基因供鼠脾细胞量相等,C组加入异基因供鼠脾细胞量是同基因供鼠脾细胞量的两倍.回输后观察GVHD临床表现,取肝、皮肤、小肠送病理学检查评定GVHD分级.测定 70天、 150天嵌合率.监测造血重建和受鼠生存率.结果:混合骨髓移植各组小鼠生存期均超过50天.其中A组,临床和病理无GVHD表现, 150天嵌合水平大幅度下降.B组,临床和病理无明显GVHD表现, 150天嵌合水平中等幅度下降.C组病理有GVHDⅡ级表现, 150天嵌合水平下降不明显.半相合骨髓移植对照组小鼠出现典型的GVHD临床和病理表现,仅20%小鼠生存期超过50天.结论:小鼠混合半相合骨髓移植中,同异基因小鼠脾细胞输注比例和输注量对移植排斥和GVHD有协调作用.     

3种建立人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型方法比较

目的建立3种人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型,优选建模方法。方法采用Bal/c裸鼠,分别通过直接注射细胞悬液(方法一)、肿块包埋(方法二)和经过引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液(方法三)3种方法建立人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型,并取瘤组织进行病理检查。结果方法一成瘤率为53.3%,成瘤时间平均为(14.5±1.64)天,2周时肿瘤平均大小为(147.2±8.7)mm3;方法二成瘤率为93.3%,成瘤时间平均为(10.5±0.87)天,2周时肿瘤平均大小为(198.3±17.2)mm3;方法三成瘤率为76.7%,成瘤时间平均为(11.2±0.87)天,2周时肿瘤平均大小为(182.4±5.6)mm3,3组的瘤组织病理检查无明显差别。结论经过引瘤后原位细胞培养,然后注射细胞悬液,是建立肾癌模型和进行生物治疗研究的合理方案。     

白细胞三烯对小鼠肝组织损伤作用研究

[目的]观察白细胞三烯对小鼠肝组织的损伤作用,探讨Ⅰ型超敏反应在肝炎发生发展过程中对肝组织的损伤作用.[方法]每日给实验组小鼠尾静脉注射6μg/kg白细胞三烯D4,给予对照组小鼠0.2mL生理盐水,动态观察各组小鼠血清中ALT,AST值和肝组织的病理变化.[结果]第3周起实验组小鼠血清中ALT,AST值明显升高,与对照组比较有显著性差异;实验组小鼠肝组织细胞出现不同程度的病理变化,且随着时间的延长,病理变化亦更显著.[结论]白细胞三烯可直接引起小鼠肝组织的损伤,Ⅰ型超敏反应在肝炎的发生发展过程中可直接引发肝组织损伤和细胞坏死.     

4～5周龄D2BF1小鼠的血液学参考值、主要脏器重量及脏器系数的测定

目的测定4~5周龄D2BF1小鼠血液学参考值,且与同龄DBA/2、C57BL小鼠比较,并提供D2BF1小鼠主要脏器重量、脏器系数的参考值。方法随机选取4～5周龄D2BF1小鼠雌雄各10只,分别称重,摘除眼球采血后,颈椎脱臼处死,摘除主要脏器称重,并将测定的血液学值与同龄的C57BL和DBA/2小鼠进行比较分析。结果D2BF1小鼠雌雄之间血液值MCV有显著性差异（P〈0.05）,其余无显著性差异（P〉0.05）。与同龄的C57BL小鼠相比,血液值WBC、Lymph%、Gran%有极显著性差异（P〈0.01）。其余无显著性差异（P〉0.05）。与同龄的DBA/2小鼠相比,WBC、Mid%、RBC、MCH有极显著性差异（P〈0.01）,Mid有显著性差异（P〈0.05）。其余无显著性差异（P〉0.05）。结论D2BF1代小鼠白细胞及分类明显低于C57BL和DBA/2小鼠,值得进一步研究。     

KDR启动子驱动双自杀基因诱导胃癌细胞凋亡的体内实验研究

目的 探讨KDR启动子驱动双自杀基因体系对胃癌细胞凋亡和增值的影响。方法建立小鼠SCG7901胃癌细胞膜型，随机分为4组。治疗结束后，称取瘤重并计算抑瘤率。用电镜和TUNEL法检测双自杀基因体系作用下SCG7901胃癌细胞的凋亡。结果实验组（B组）肿瘤体积逐渐缩小，而对照组（A、C和D组）肿瘤体积逐渐增大。透射电镜下可见实验组出现凋亡细胞，TUNEL法显示实验组肿瘤细胞凋亡率显著高于对照组，P〈0．01。结论 KDR启动子驱动双自杀基因体系对裸鼠皮下移植瘤有明显的生长抑制作用，其机制可能与双自杀基因体系诱导肿瘤细胞凋亡有关。