间充质干细胞成血管因子受体表达特征及其意义

目的:探讨间充质干细胞成血管因子受体表达特征及其意义。方法:采用经典的全骨髓贴壁法培养骨髓源间充质干细胞(MSC),通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞分析其表面标记(CD34、CD90、CD29)等鉴定MSC特征;以P1-P17MSC为实验材料,利用RT-PCR的方法检测PDGFR、VEGFR和NRP1的表达。利用Transwell体外迁移体系初步探索VEGF在MSC迁移中的作用,同时利用MTT法评价VEGF对MSC增值的作用。结果:培养的MSC呈现出CD90、CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;强表达PDGFR-β和NRP1、不表达VEGFR(Flk1和Flt1)和PDGFR-α,VEGF促进了MSC的增殖和迁移。结论:VEGF可能通过PDGFR-NRP1促进了MSC的增值和迁移。     

脱甲氧基姜黄素对血管生成影响的实验研究

目的：从脱甲氧基姜黄素对内皮细胞增殖和迁移的影响角度，探讨脱甲氧基姜黄素抗血管生成的作用机制。方法：用MTT法检测脱甲氧基姜黄素对牛主动脉内皮细胞及人胃腺癌细胞系SGC-7901细胞增殖的影响；用琼脂糖刮除法检测脱甲氧基姜黄素对牛内皮细胞迁移的影响。结果：脱甲氧基姜黄素能明显抑制牛内皮细胞增殖，对非内皮细胞与肿瘤细胞也有抑制作用，但与前者相比，差异有统计学意义。脱甲氧基姜黄素能显著抑制牛内皮细胞迁移，在实验浓度范围内，其抑制作用呈明显量效关系。结论：脱甲氧基姜黄素是一种特异性血管生成抑制剂。抑制内皮细胞增殖和迁移可能是脱甲氧基姜黄素抑制血管生成的机制之一。     

CXC趋化因子配体10联合顺铂抑制LL/2肿瘤肺转移的实验研究

目的 研究CXC趋化因子配体10(CXCL10)联合顺铂对荷瘤小鼠LL/2肿瘤肺转移的治疗效果.方法小鼠Lewis肺癌LL/2肿瘤模型建立在C57BL/6小鼠上.实验小鼠随机分4组:CXCL10 顺铂组;CXCL10组;顺铂组;PBS对照组.CXCL10按25 μg/(kg·d)使用,皮下注射,连用30 d.顺铂采用腹腔内注射[5 mg/(kg·week)],于CXCL10治疗的第14、21天使用,连用2个周期.观察肿瘤体积与小鼠生存时间,观察各组小鼠肺表面的肿瘤转移结节数.结果 CXCL10治疗明显抑制了Lewis肺癌的肺转移,肺表面的肿瘤结节数少于对照组(P＜0.05).联合治疗组表现较强的抗肿瘤疗效,其肿瘤生长速度减慢,治疗效果(P＜0.01)优于顺铂或者CXCL10组(P＜0.05).结论 CXC趋化因子配体10联合顺铂更有效地抑制LL/2肿瘤肺转移和延长生存期.     

血管生成在疾病治疗中的应用与展望

血管生成与新生参与了许多疾病的发生、演变和进展,包括最常见和致命性心血管疾病、癌症、糖尿病、炎症及眼科疾病等。促进或抑制血管生成已经成为上述疾病的重要治疗策略。截至撰写本文时,许多靶向血管生成的药物已经获得了不同国家食品药品监督管理局的批准,用于治疗恶性疾病和眼科疾病。本文将介绍血管生成参与疾病进展的机制、靶向血管生成的新型治疗策略及其在临床应用中的挑战与展望。     

胶质细胞瘤诊断及介入治疗研究进展

MRI与超声技术在胶质细胞瘤的诊断中不断改进,增强了临床诊断价值.超选择血管内灌注化疗/放疗具有创伤小、局部疗效明显、不良反应较轻等优势,治疗上较重视抑制血管生成,以药物化疗为主,具有广阔应用前景.有待加强对药物作用机制、肿瘤复发机制方面的研究.降低诊断成本,提高新技术的准确性、可靠性,加强超选择血管内灌注与化疗药物配合使用的研究,在今后研究中具有重要意义.     

一种新的血管生成抑制因子-TSF的设计及表达

目的 选择PF4和TSP1的高活性片段设计融合基因－TSF，在大肠肝菌表达，细胞水平上检测表达产物的生物学活性。方法 PF4的C－末端13肽和TSP1的429－459片断31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白－TSF。采用pGEX-2T载体在E.coli JM109中表达TSF蛋白。采用MTT方法测定TSF及其相关性GST－TSF，PF4（58－70），TSP1（429－459）等对血管内皮细胞，平滑肌细胞，QGY7721人肝癌细胞，HLF人肺成纤维细胞等生长的抑制效应。结果 合成的TSF融合基因，克隆到pGEX-2T载体，转化E .coli JM109，获得了TSF蛋白的高效表达。建立了TSF蛋白的纯化复性方法，获得了GST－TSF融合蛋白及TSF蛋白。TSF，GST－TSF，PF4（58－70）和TSP1（429－59）均特异抑制血管内皮细胞的生长，其中TSF的活性最强，活性大小次序为TSF＞GST－TSF＞PF4（58－70）＞TSP1（429－459）。结论 融合表达蛋白－TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长。     

微小RNA对血管新生的调控机制研究进展

微小RNA（miRNA）是一类重要调控因子,在转录后水平调控细胞增殖分化、凋亡、分裂以及器官的发育.据估计,miRNA调节着人类细胞大约1/3的蛋白质表达,进而参与几乎所有生命体的生理及病理过程.大量研究证实,内皮特异miRNA参与调控血管新生过程各个环节,在血管新生的调控方面发挥着非常关键的作用.miR-126、miR-210、miR-424、Let-7等具有促进血管新生作用;miR-221/miR-222、miR-34a、miR-217等则具有抑制血管新生作用.并且miRNA合成过程中两个关键性酶Dicer和aDrosha也在血管新生中占居重要地位.因此,miRNA可能成为一种新的心血管疾病诊断和靶向治疗的生物学标志物.     

肝细胞癌COX-2表达与新生血管生成关系的研究

目的:探讨环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX2)表达上调与人肝细胞癌(HCC)新生血管生成的关系。方法:2002～2003年本院病理诊断为HCC的80例手术标本,采用免疫组化方法,检测癌组织中COX2和血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和CD34的表达情况,使用Weidner分析方法来计算CD34标记的肿瘤微血管密度(microvasculardensity,MVD)。结果:COX2和VEGF在HCC中表达率分别为75.00%(60/80)和62.50%(50/80)。VEGF在COX2强阳性组和中弱阳性组的免疫染色积分分别是5.98±1.16和3.30±0.22;VEGF在COX2强阳性组和中弱阳性组的表达率分别是71.43%(25/35)和28.00%(7/25),两组间差异非常显著(P<0.01),COX2与VEGF表达有明显相关性(P<0.01)。MVD在COX2强阳性组和中弱阳性组的评分分别为73.81±12.43和33.42±7.52,两组间差异非常显著(P<0.01),COX2与MVD有明显相关性(P<0.01)。结论:COX2高表达与HCC血管生成密切相关。     

针刺心肌打孔心肌血运重建术后血管生长相关因子表达和血管新生的实验研究

目的观察针刺心肌打孔(TNP)心肌血运重建术(TMR)后新生血管的变化及血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转移生长因子β(TGF-β)在缺血心肌的表达,探讨TNP心肌血运重建术的可能机制。方法开胸结扎16只犬冠状动脉左前降支,建立急性心肌缺血模型。以单纯缺血为对照组(n=8),实验组(n=8)行针刺心肌打孔。两组动物分别于术后1、2、4、8周分批处死,利用组织切片HE染色法观察心肌血管密度,并通过免疫组化抗原染色法观察VEGF、bFGF和TGF-β的变化,于显微镜下行计算机扫描计算每高倍视野显色面积(μm2/HP)。结果实验组VEGF的表达在术后2周达高峰,bFGF和TGF-β的表达则在术后1周达高峰,而心肌血管密度在术后4周达高峰。实验组各时相VEGF、bFGF和TGF-β平均蛋白表达水平及平均心肌血管密度分别明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论血管生长相关因子(如VEGF,bFGF和TGF-β)表达水平的升高可能是TNP诱导血管新生的主要作用机制之一。