国产胶原酶在小鼠胰岛分离中的效果研究#br#

目的 研究一种国产胶原酶在小鼠胰岛分离中的分离效果,探索该胶原酶在胰岛分离中应用的 可行性。方法 将国产胶原酶分别配成不同浓度的胶原酶溶液和含中性蛋白酶的胶原酶的溶液,经胰管逆行灌注胶原酶的方法进行小鼠胰岛分离,采用Ficoll液对胰岛进行纯化,计数所得的胰岛细胞团,培养 6 h后检测活性,对最佳分离结果的胰岛做同系糖尿病小鼠的肾被膜下移植,监测术后血糖和进行组织学 检查,以进口Sigma胶原酶V为对照。结果 国产胶原酶在小鼠胰腺消化时间、所得胰岛数量和活性效果 上跟进口胶原酶V有一定差距（P＜0.01）,但含中性蛋白酶的国产胶原酶组在小鼠胰岛分离数量和当量上 与进口胶原酶组无差异（P＞0.05）,分离的胰岛在体内移植后降血糖效果与进口胶原酶组无差异（P＞0.05）。 结论 国产胶原酶结合中性蛋白酶可用于小鼠胰岛的分离。     

增生性瘢痕治疗中细菌胶原酶的应用

增生性瘢痕是皮肤真皮损伤愈合后遗留的高出于周围皮肤、发红、坚硬的病理结构。迄今为止，其病因及发病机制尚不够清楚。虽然临床上治疗方法很多，如药物、手术、加压和放射治疗等，但目前尚无一种简单可靠、疗效确切的方法。手术治疗是目前治疗这类疾病的主要手段，但单纯切除后的复发率仍很高。细菌胶原酶可以直接降解瘢痕组织内的胶原纤维，可望成为一种快速有效的治疗增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的新方法。     

胶原酶研究和应用概况

介绍了胶原酶的产生菌、发酵、制备、酶学性质以及应用。     

改良原位二部法门脉胶原酶灌注分离单肝细胞

改良原位二部法门脉胶原酶灌注分离单肝细胞首都医科大学宣武医院普外实验室孙海晨李铎刘爽孙家邦单肝细胞在细胞生物和肝病研究中有广泛的用途。但肝脏组织细胞间结缔组织致密、连接紧密，单纯机械方法分离无法获得单肝细胞，故常需经门静脉胶原酶灌注获得单肝细胞。传统...     

膀胱癌中基底膜与Ⅳ型胶原酶的研究

为了探讨膀胱癌细胞基底膜与Ⅳ型胶原酶在肿瘤浸润生长中的作用和意义，应用免疫组化方法对５４例膀胱移行细胞癌中基底膜的改变与Ⅳ型胶原酶的分布作了对照研究。结果显示：基底膜在对照组乳头状瘤中完整连续，而在移行细胞癌中出现断裂与缺失，并与膀胱癌的病理分级和临床分期相关。与之相应的是，Ⅳ型胶原酶在乳头状瘤中阳性率为２０％，而在膀胱癌中阳性率为６４８％，两者比较有非常显著性差异（Ｐ＜００１），且膀胱癌中的阳性率随病理分级及临床分期而增高。提示Ⅳ型胶原酶对膀胱癌的基底膜破坏及癌肿浸润转移起重要作用。     

宫颈成熟的研究进展

人类的宫颈成熟以其软化，消失和扩张为特征，是一个生物机械性发生明显变化的过程，它不仅作为子宫收缩的产物出现，也与宫缩发动前宫颈内组织发生的一系列变化，尤其是胶原酶活性和基质成分的变化密切相关过早或过迟的宫颈成熟均可导致不良的产科后果。     

实验兔肝纤维化中肝胶原酶的检测

本文采用琼脂一胶原蛋白凝胶圆盘扩散法检测胶原酶活力。实验兔感染日本血吸虫尾蚴形成肝纤维化后,接受秋水仙碱洽疗,治疗前后检测肝胶原酶活力,结果提示治疗后肝胶原酶活力显著升高     

Expression of exogenous rat collagenase in vitro and in a rat model of liver fibrosis

AIM：The present study was conducted to test the hypothesis that the introduction of the collagenase gene into tissue culture cells and into a rat model of liver fibrosis would result in the expression of enzymatically active product.METHODS:FLAG-tagged full-length rat collagenase cDNA was PCRamplified and cooned into a mammalian expression vector.NIH3T3 cells were then transiently transfected with this construct.Expression of exogenous collagenase mRNA was assessed by RT-PCR,and the exogenous collagenase detected by Western blotting using anti-FLAGmonoclonal antibody.Enzymatic activity was detected by gelatin zymography,To determine the effects of exogenous collagenase production in vovo,the construct was bound to glycosyl-poly-L-lysine and then transduced into rats that had developed liver fibrosis as a result of CCl4 plus ethanol treatment.The hepatic expression of the construct and its effect on the formation of liver fibrosis were demonstated usingRT-PCR and immunohistochemistry.RESULTS:It was found that exogenously expressed rat collagenase mRNA could be detected in NIH3T3 cells following transfection.Enzymatically active collagenase could also be detected in the culture medium.The recombinant plasmid was also expressed in rat liver after in vivo gene transfer.Expression of exogenous rat collagenase correlated with decreased deposition of collagen types IandⅢin the livers of rats with experimentally induced liver fibrosis.CONCLUSION:The expression of active exogenous rat collagenase could be achievad in vitro and in vivo,It was suggested that in vivo expression of active exogenous collagenase may have therapeutic effects on the formation of liver fibrosis.     

不同介入方法治疗腰椎间盘突出症疗效比较

目的 采用不同的介入方法治疗腰椎间盘突出症,观察研究各种方法的治疗效果及特点。方法 将93例符合微创介入治疗适应征的腰椎间盘突出症患者,分别采用胶原酶髓核溶解术和经皮钕激光椎间盘汽化术介入治疗．在治疗前和治疗后1周、1个月,6个月、1年五个时段,对所有病例进行度节体感诱发电位(DSEP)检测。同时根据患者症状、体征恢复程度的评定标准．以优良率作为疗效指标．分别以术后1个月、1年作为早期和远期疗效评定,对所有病例的随访资料,通过统计学分析比较,研究两种治疗方法的疗效及特点。结果 经皮钕激光椎间盘汽化术与胶原酶髓核溶解术两种方法,对解除神经受压、恢复神经功能的早期疗效,无显著性差异．术后1个月两者的优良率分别为71％和66％;术后1年经皮钕激光椎间盘汽化术治疗的优良率为85％．显著高于胶原酶髓核溶解术(66％)。经过两种治疗方法后．神经电生理指标改善,潜伏期缩短,波幅延长,显示神经功能有所恢复。结论 经皮钕激光椎闻盘汽化术与胶原酶髓核溶解术,两种方法疗效确实、可靠。与胶原酶髓核溶解术相比,经皮钕激光椎间盘汽化术技术具有显效快、远期疗效好的特点。     

乌司他丁对犬胰岛的保护作用

目的 判定在机械分离纯化犬胰岛过程中，胰腺原位灌洗时应用乌司他丁（UTI）的保护作用，观察胰岛的获取产量。方法将20只犬随机分为两组，每组10只。HC-A组：胰腺经腹主动脉原位灌洗时用冷HC-A液2500ml；HC-A＋UTI组：胰腺原位灌洗时，HC-A液中加用UTI 10000U／kg。两组均经主胰管用4℃胶原酶V控压灌注，在Ricordi Chamber系统中消化，用Ficoll连续梯度离心纯化。