淫羊藿总黄酮与补肾复方对皮质酮大鼠T细胞凋亡相关基因群调控的对比研究

目的 :对比淫羊藿总黄酮 (EF)与两个含淫羊藿总黄酮的补肾复方及健脾复方对皮质酮鼠模型T细胞凋亡及其相关基因群的调控作用。方法 :采用TUNEL标记的流式细胞技术及荧光实时定量PCR技术对各组大鼠T细胞凋亡及相关基因群mRNA表达水平进行定量与比较。结果 :EF与两个补肾复方都能够降低T细胞凋亡率 ,并对促凋亡及抗凋亡基因群进行适度地调控 ,而健脾方则不能。结论 :EF对皮质酮大鼠T细胞凋亡及其相关基因的调控作用可以代表补肾复方拮抗外源性激素对T细胞的抑制作用。     

皮质酮对原代培养的海马神经元及其Ca~(2+)/CaMKII的影响

在培养液中加入 10 7、10 6和 10 5浓度(mol/L)的皮质酮,采用MTT染色测定、Fura 2 /AM的荧光标记以及Western印迹的方法,观察了不同浓度的皮质酮作用下海马神经元形态学和细胞存活率的变化以及胞浆内游离钙离子浓度 [Ca2+ ]i和CaMKII表达的变化规律, 探讨其对原代培养的大鼠海马神经元及其Ca2+ /CaMKII的影响和可能的机制。结果发现: 10 6、10 5浓度的皮质酮对海马神经元的形态学影响较大,与对照组比较,细胞存活率明显降低; [Ca2+ ]i分别为 113. 1022±16. 9716、155.3794±20. 7727;CaMKII的表达也明显减少;三者的变化均显著 (P<0. 01 ),而 10 7浓度的皮质酮对上述指标影响不大 (P>0.05)。此外,相关性分析表明: [Ca2+ ]i和CaMKII的表达呈现负相关(P<0. 05)。以上结果提示,皮质酮对大鼠海马神经元的作用存在浓度依赖效应,浓度越高,对大鼠海马神经元的损伤越大,同时也验证了皮质酮是啮齿类动物的主要的应激激素。     

颞下颌关节紊乱病的药物治疗

颞下颌关节紊乱病 (Ｔｅｍｐｏｒｏｍａｎｄｉｂｕｌａｒｄｉｓ ｏｒｄｅｒｓ,ＴＭＤ)的治疗方法很多 ,但应尽量采用保守治疗 ,减少对患者的侵犯性治疗 ,这已成为应予遵循的基本治疗原则。由于ＴＭＤ引起口颌面痛已日益受到口腔医学界的广泛重视 ,其研究内容涉及到口颌面痛的神经生理、病理多个方面。并认为除应治疗关节结构病损引起疼痛外 ,尚需同时治疗心理社会因素引起的疼痛。不少学者把药物治疗作为ＴＭＤ的早期治疗或在其它手段难以奏效而采取的方法［１］,但对其长期用药的安全性及治疗效果存在争议。本文就治疗颞下颌关节紊乱病的…     

整合素信号通路可能参与大鼠束缚应激后的恢复过程(英文)

目的筛选与束缚应激大鼠应激反应恢复速度相关的基因,探讨应激反应个体恢复的分子机制。方法观察大鼠2小时束缚应激后血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic-hormone,ACTH)及皮质酮的变化规律,根据应激结束后1小时的血浆ACTH及皮质酮下降程度将大鼠分为快速恢复组与慢速恢复组。采用微阵列技术检测快速恢复组与慢速恢复组下丘脑组织基因表达的差异,用实时逆转录-聚合酶链反应验证部分基因的表达差异。结果基因芯片分析结果显示:大部分基因在两组间并无差异表达,在11个差异表达的基因中,快速恢复组中参与整合素信号通路的踝蛋白(talin)、整合素α6和丝/苏氨酸蛋白磷酸酶PP1β催化亚基(serine/threonine pro-tein phosphatase PP1-beta catalytic subunit,PP1B)基因有1.5倍上调,而结合粘附分子1(junctional adhesion mol-ecule 1, F11r)基因有 1.5 倍下调。实时逆转录 - 聚合酶链反应结果与芯片分析结果一致。结论本研究构建了束缚应激大鼠恢复过程的下丘脑基因表达谱,结果提示整合素信号通路可能参与应激的恢复过程。     

新生大鼠海马神经干细胞培养及皮质醇和氟西汀对其增殖的影响

目的:探索新生大鼠海马神经干细胞培养及鉴定方法,观察高浓度的皮质酮和抗抑郁剂氟西汀对其增殖的影响。方法:2004-02/06在解放军军事医学科学院毒物药物研究所完成。分离新生第1天大鼠的海马组织,将其制成单细胞悬液后置于无血清条件培养基中进行培养,用免疫细胞化学技术对所培养的细胞特性进行鉴定,用四甲基氮唑兰法观察高浓度的皮质酮和氟西汀对其增殖的影响。结果:从新生大鼠海马分离得到的细胞接种于含有表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子两种丝裂原刺激因子的条件培养基中,可以持续分裂增殖形成细胞克隆(神经球),该神经球可以表达神经上皮干细胞蛋白(巢蛋白)。神经球中可以探测到外源性给与的细胞增殖特异性的标记物BrdU。撤除培养基中的丝裂原后,所培养的细胞可以分化,并且分化后可以表达成熟神经元的标志物神经元特异性烯醇化酶或星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白。四甲基氮唑兰法显示,高浓度的皮质酮(100～500μmol/L)可以使吸光度(A570nm)明显降低。而氟西汀(0.5～1.0μmol/L)则使之升高。结论:用此方法分离得到的细胞具有神经干细胞的特性。高浓度的皮质酮可以抑制新生大鼠神经干细胞的增殖,氟西汀可以促进新生大鼠神经干细胞的增殖。     

前庭功能锻炼对运动病大鼠血浆应激相关激素水平的影响

 目的：探讨前庭功能锻炼对运动病大鼠接受旋转刺激后血浆应激相关内分泌指标的变化,进一步阐明激素与运动病的内在联系。方法：旋转刺激72只雌性SD大鼠,根据大鼠条件性味觉厌恶程度判断其运动病敏感性。用放射免疫分析法测定血浆皮质酮、促肾上腺皮质激素（ACTH）、促肾上腺皮质素释放激素（CRH）和精氨酸加压素（AVP）水平,观察旋转刺激对血浆激素水平的影响。接着,进行前庭功能锻炼1个月,等大鼠对运动病产生耐受后,再观察旋转刺激对血浆激素水平的影响。结果：（1）大鼠经过1个月的前庭功能锻炼后,糖精水厌饮行为完全被抑制,说明达到了习服的效果;（2）旋转刺激可引起大鼠血浆皮质酮、ACTH和AVP水平升高（P<0.05或P<0.01）,但经前庭功能锻炼后,旋转刺激对皮质酮的升高作用明显减弱;（3）不敏感组大鼠血浆皮质酮、ACTH、CRH和AVP的水平均高于敏感组,尤其是旋转刺激后的皮质酮、ACTH水平与CRH的基础水平（P<0.05或P<0.01）。并且,经过前庭功能锻炼,皮质酮、ACTH与CRH的基础水平在2组均高于前庭功能锻炼前（P<0.05或P<0.01）,AVP基础水平也有一定程度的升高。结论：（1）给大鼠进行前庭功能锻炼可以达到习服的目的,抑制运动病的发生;（2）大鼠运动病敏感性的个体差异可能与血浆应激相关激素基础水平的高低相关。     

缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠血清皮质酮和海马caspase-3阳性细胞数量的影响

目的探讨缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠体重、行为、血清皮质醇和海马Caspase-3阳性细胞数量的影响。方法50只大鼠被分为正常对照组、未用药模型组、阴性对照模型组、阳性对照模型组和缬草治疗组,每组各10只。除正常对照组外,给予其余4组大鼠为期4周的慢性应激,以建立抑郁症模型。在整个实验期间,每周检测所有大鼠体重、自来水摄取量、1%糖水摄取量。除未用药模型组正常饲养外,其余4组大鼠在模型建立后分别灌服羧甲基纤维素钠、氟西汀以及缬草,灌药周期均为3周。灌药结束后,每组随机选取5只大鼠,采用放射免疫法检测其血清皮质酮水平;每组另5只大鼠用于caspase-3阳性细胞的计数。结果经过4周慢性应激后,与正常对照组大鼠相比,抑郁模型组大鼠的体重以及1%糖水摄取量明显降低。灌服缬草3周后,能使抑郁模型组大鼠的体重、1%糖水摄取量增加并恢复到正常对照组水平。缬草治疗组血清皮质酮水平明显降低,并恢复至正常对照组大鼠水平,同时使抑郁大鼠海马caspase-3阳性细胞总数减少到正常对照组大鼠水平。结论缬草能使抑郁大鼠恢复体重及正常行为,能降低抑郁大鼠血清皮质酮水平,并具有减少大脑海马caspase-3阳性细胞的作用。     

归脾汤对抑郁模型大鼠血清雌二醇、皮质酮及海马形态学的影响

目的:观察归脾汤对抑郁模型大鼠血清皮质酮、雌二醇(E2)水平和海马形态学的影响,初步探讨其防治抑郁症的可能机制.方法:40只Wistar雌性大鼠分为空白组、模型组、对照组、中药组.应用慢性不可预见性中等强度刺激复制抑郁症动物模型.Open-field法检测大鼠行为学得分,放免法测定皮质酮及E2含量,HE染色和扫描电镜观察海马形态学变化.结果:与空白比较,模型组和对照组大鼠的体重、行为学得分、血清皮质酮、E2、FSH、LH含量均有显著性差异,海马损伤明显,而中药组上述指标均无明显差异.结论:归脾汤的抗抑郁机制与其维持正常的皮质酮、E2分泌和海马形态有关.     

大鼠下丘脑弓状核β一内啡肽能神经元在血浆皮质酮应激反应中的作用

大鼠新生期腹腔注射谷氨酸单钠（ＭＳＧ），成年后，下丘脑弓状核（ＡＲＣ）的β一内啡肽（β一ＥＮＤ）免疫反应细胞减少６１．０％，血浆皮质酮基础值未受明显影响。在不可躲避的持续电刺激四肢足底３０ｍｉｎ后，ＭＳＧ组动物血浆皮质用水平显著升高（Ｐ＜０．０１）．这些结果与相应的对照组无明显差异，提示ＡＲＣ的β一ＦＮＤ能神经元在垂体一肾上腺皮质系统应激反应中不起重要的调节作用。     

Increased corticosterone levels in plasma and hippocampus and their relationship with hippocampal ATP depletion in senescence accelerated mice

早衰小鼠ＳＡＭＰ８９００时和１６００时，血浆皮质酮水平均明显高于正常对照小鼠ＳＡＭＲ１；大脑皮层和海马区皮质酮水平在１６００时亦显著高于ＳＡＭＲ１，而下丘脑皮质酮含量与ＳＡＭＲ１相比无差别．同时，ＳＡＭＰ８大脑海马ＡＴＰ，ＡＤＰ和ＡＭＰ水平均低下，而皮层ＡＴＰ，ＡＤＰ和ＡＭＰ水平无改变．切除ＳＡＭＰ８小鼠肾上腺６０ｈ后，海马区低水平的ＡＴＰ，ＡＤＰ和ＡＭＰ被逆转，而皮层未受影响．给切除肾上腺的ＳＡＭＰ８补充皮质酮（１０ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ，１２ｈ一次，共５次）后，海马区ＡＴＰ，ＡＤＰ和ＡＭＰ水平再次被显著降低，皮层仍未受影响．上述结果说明，ＳＡＭＰ８小鼠大脑海马ＡＴＰ水平低下是肾上腺依赖的，ＳＡＭＰ８血浆和海马区皮质酮水平升高可能与海马ＡＴＰ和ＡＤＰ水平降低有关．