基于慢病毒的SHARP-2特异的RNA干扰延长肾移植受者大鼠存活时间

Objective To investigate if rat enhancer of split- and hairy-related protein-2 (SHARP-2) short hairpin RNA interference (shRNAi) prolongs the survival time of rat kidney transplant recipients. Methods Gene recombinant procedures, transfection and co-transfection were carried out to introduce short hairpin RNA interference sequences target for SHARP-2 into 3rd generation self-inactivated lentiviral-ViraPower packaging mix. Limiting dilution method was used for viral titration. Real-time PCR was employed for quantification of gene expression. Rat kidney transplantation was utilized to investigate the effect of SHARP-2 gene silence on the recipient survival. Results A lentiviral-based shRNAi construct LV-SHARP-2iC showed 84% SHARP-2 gene silence efficiency in normal rat kidney cells. At multiplicity of infection 20, 57% T cells could be transfected by lentivirus with spinoculation method. In activated T cells, SHARP-2 g ene silence resulted in 61.3% and 68.7% reduction of intedeukin 2 (IL-2) and interferon γ (IFN-γ) gene expression. When donor kidney was perfused with 5×107 TU LV-SHARP-2iC, the median survival time prolonged for 4-5 days as compared to blank and scramble control groups. Conclusions A recombinant lentivirus LV-SHARP-2iC that effectively silence SHARP-2 gene expression is constructed successfully, leading to the inhibition of IL-2 and IFN-γ. LV-SHARP-2iC treatment can prolong the survival time of rat kidney transplant recipients.     

基于慢病毒的SHARP-2特异的RNA干扰延长肾移植受者大鼠存活时间

Objective To investigate if rat enhancer of split- and hairy-related protein-2 (SHARP-2) short hairpin RNA interference (shRNAi) prolongs the survival time of rat kidney transplant recipients. Methods Gene recombinant procedures, transfection and co-transfection were carried out to introduce short hairpin RNA interference sequences target for SHARP-2 into 3rd generation self-inactivated lentiviral-ViraPower packaging mix. Limiting dilution method was used for viral titration. Real-time PCR was employed for quantification of gene expression. Rat kidney transplantation was utilized to investigate the effect of SHARP-2 gene silence on the recipient survival. Results A lentiviral-based shRNAi construct LV-SHARP-2iC showed 84% SHARP-2 gene silence efficiency in normal rat kidney cells. At multiplicity of infection 20, 57% T cells could be transfected by lentivirus with spinoculation method. In activated T cells, SHARP-2 g ene silence resulted in 61.3% and 68.7% reduction of intedeukin 2 (IL-2) and interferon γ (IFN-γ) gene expression. When donor kidney was perfused with 5×107 TU LV-SHARP-2iC, the median survival time prolonged for 4-5 days as compared to blank and scramble control groups. Conclusions A recombinant lentivirus LV-SHARP-2iC that effectively silence SHARP-2 gene expression is constructed successfully, leading to the inhibition of IL-2 and IFN-γ. LV-SHARP-2iC treatment can prolong the survival time of rat kidney transplant recipients.     

优先治疗和普遍预防两种方案在肾移植术后巨细胞病毒感染中的疗效比较

目的 对比分析优先治疗和普遍预防两种方案在预防和治疗肾移植术后巨细胞病毒(CMV)感染中的疗效.方法 将64例肾移植受者随机分为优先治疗组(31例)和普遍预防组(33例).两组受者肾移植术后均接受14 d预防CMV感染的基础治疗(静脉滴注更昔洛韦250 mg/d).随后,普遍预防组受者继续口服更昔洛韦至术后90 d.优先治疗组中的高危受者继续口服更昔洛韦,直至术后90d;中危受者中仅CMV pp65抗原阳性受者静脉滴注更昔洛韦,至CMV pp65抗原转阴后停药,低危受者在基础治疗后不再使用更昔洛韦.研究期为6个月,此期间监测两组受者血清CMV pp65抗原和CMV DNA,以及血常规、尿常规、肝功能、肾功能和排斥反应发生情况.结果 普遍预防组15例(45.5%)出现CMV抗原血症,有5例(15.2%)的CMV DNA负荷量持续升高,其中3例(9.1%)发展成为CMV病.优先治疗组13例(41.9%)出现CMV抗原血症,有4例(12.9%)的CMV DNA负荷量持续升高,其中2例(6.5%)发展为CMV病.普遍预防组和优先治疗组急性排斥反应发生率分别为9.1%(3/33)和9.7%(3/31);其他感染总的发生率分别为15.2%(5/33)和19.4%(6/31),差异均无统计学意义(P>0.05).两组受者移植6个月时的存活率分别为97%和100%,其血肌酐的差异也无统计学意义(P>0.05).结论 根据受者CMV感染的风险状态采取优先治疗方案能有效预防和治疗肾移植术后CMV感染,其效果与普遍预防方案相当.     

两种方案预防肝移植术后巨细胞病毒再感染的临床疗效观察

目的 分析针对性预防方案（targeted prophylaxis）和普遍性预防方案（universal prophylaxis）在预防肝移植术后巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）再感染中的临床疗效。方法 回顾性分析入选本研究的62例肝移植病人的临床资料。按术后预防CMV再感染方案的不同分为A、B两组。A组（针对性预防方案）：针对高危病例术后应用更昔洛韦预防CMV再感染。B组（普遍性预防方案）：所有病例术后常规应用更昔洛韦预防CMV再感染。对两组病人的CMV再感染率、CMV再感染相关死亡率、CMV病发生率、术后平均住院时间、病人1年生存率及预防和治疗CMV再感染的相关费用作统计分析。结果 CMV再感染率为14．5％（9／62）。A组40例，术后6例（15％，6／40）发生CMV再感染，均为无临床症状的CMV活动性感染，其中5例治愈，1例死于上消化道大出血（与CMV再感染无关）。B组22例，术后3例（13．6％，3／22）发生CMV再感染，2例无临床症状病人治愈，1例CMV肝炎病人最终死于肝功能衰竭。CMV再感染率、CMV再感染相关死亡率、CMV病发生率、术后平均住院时间及病人1年生存率两组间均无明显差异（P〉0．05）。B组用于预防和治疗CMV再感染的人均费用明显高于A组（P〈0．01）。结论 肝移植术后两种方案预防CMV再感染的临床疗效相当。相比之下，针对性预防方案更为经济，适合于我国的肝移植受体。     

肾移植术后巨细胞病毒感染与排斥反应

人类巨细胞病毒(HCMV)感染是免疫抑制状态下的器官移植受者常见而严重的并发症。肾移植术后巨细胞病毒感染和排斥反应是密切相关的两过程,并通过产生一系列相似的细胞因子、化学因子和生长因子共同作用于移植肾,导致移植肾功能丧失。     

肾移植术后巨细胞病毒感染与排斥反应

人类巨细胞病毒（HCMV）感染是免疫抑制状态下的器官移植受者常见而严重的并发症.肾移植术后巨细胞病毒感染和排斥反应是密切相关的两过程,并通过产生一系列相似的细胞因子、化学因子和生长因子共同作用于移植肾,导致移植肾功能丧失.     

绝经后人乳头瘤病毒感染的宫颈鳞状上皮内病变与阴道微生态的关系

目的 探讨绝经后人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染的宫颈鳞状上皮内病变(cervical squamous intraepithelial lesion, SIL)与阴道微生态变化的相关性,进而为调节阴道微生态平衡,阻断绝经后HPV感染的SIL发生发展提供依据。方法 收集2018年4月至2019年4月在保定市第一中心医院妇科门诊就诊的绝经后女性相关情况,HPV阳性伴或不伴薄层液基细胞学检查(thinprep cytologic test, TCT)异常,进一步行阴道镜下宫颈活组织检查,诊断为SIL的122例患者作为病变组,无SIL的129例患者作为正常组。比较2组阴道微生态的检查结果。结果 病变组和正常组细菌性阴道病(bacterial vaginosis, BV)检出率分别为32.79%和12.40%(P<0.001);外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginal candidiasis, VVC)分别为14.75%和10.85%(P>0.050);阴道清洁度III~IV度分别为68.03%和46.51%(P<0.050);乳酸杆菌少分别为13.93%和20.16%(P>0.050); WBC计数>10个/高倍镜下(highest possible frequency, HPF)分别为62.30%和40.31%(P<0.001);过氧化氢(H₂O₂)缺乏分别为15.57%和22.48%(P>0.050);白细胞酯酶阳性分别为36.07%和17.83%(P<0.050);唾液酸苷酶阳性分别为19.67%和6.20%(P<0.050)。结论 BV、阴道清洁度差、WBC多、白细胞酯酶及唾液酸苷酶阳性可能与绝经后HPV感染的SIL的发生发展密切相关。     

联合检测SAA、PCT及CRP在新生儿感染早期的鉴别诊断价值

目的通过联合检测新生儿血清淀粉样蛋白A (SAA)、降钙素原(PCT)及C反应蛋白(CRP)水平,探讨其对新生儿早期感染性疾病的诊断价值。方法选取2017年1月至2018年6月深圳市罗湖区人民医院收治的166例新生儿作为研究对象,分为61例新生儿细菌感染病例(细菌感染组)、50例新生儿病毒感染病例(病毒感染组)和55例健康新生儿病例(对照组)。采集所有新生儿的血液标本,并采用酶联免疫吸附试验检测比较各组新生儿SAA、PCT及CRP水平。结果细菌感染组SAA、PCT及CRP阳性率高于病毒感染组和对照组,差异有统计学意义(P0.05)。细菌感染组SAA、PCT及CRP水平高于病毒感染组和对照组,差异有统计学意义(P0.05)。细菌感染组血清中联合检测SAA、PCT及CRP数值高于单独检测(P0.05)。结论联合检测SAA、PCT及CRP在新生儿感染早期具有更有效、更全面、更快速的检出率,能够为新生儿感染早期诊断及鉴别诊断提供强有力的检验依据。     

新型冠状病毒肺炎疫情期间定点收治患者的医院应急科研管理实践与思考

本文以深圳市定点收治新型冠状病毒肺炎(以下简称新冠肺炎)确诊患者的医院科研管理工作为例,通过总结新冠肺炎疫情期间针对疫情采取的应急科研管理举措,结合疫情期间取得的科研管理成效,分析在此次疫情中医院应急科研管理举措的有效性和存在的不足并提出相关改进建议,为我国传染病定点医院在应急科研管理方面更好的应对未来可能发生的新发、突发公共卫生事件提供参考意见。