氧化型辅酶NAD+对辐射损伤小鼠造血功能影响

目的探讨NAD+对辐射所致小鼠造血功能损伤的影响。方法将30只小鼠随机分为正常对照组、照射对照组、NAD+照射组3个实验组,以6GyX线照射小鼠建立辐射损伤模型,检测小鼠外周血白细胞数、股骨骨髓有核细胞数、骨髓细胞凋亡率、骨髓细胞Caspase-3的活性、存活率。结果NAD+照射组小鼠的外周血白细胞数、股骨骨髓有核细胞数均高于照射对照组,差异有统计学意义(P0.05)。骨髓细胞凋亡率、骨髓细胞Caspase-3的活性,NAD+照射组较照射对照组低,差异有统计学意义(P0.05)。结论NAD+对辐射所致小鼠造血功能损伤有保护和修复作用。     

应用蛋白质组学技术筛检肝癌血清差异蛋白质并分离鉴定阿朴脂蛋白AⅡ

Objective To screen differential proteins in serum from hepatocellular carcinoma (HCC) patients by Proteomic Technology and to purify and identify them. Methods Surface enhanced laser desorp-tion Ionization time of flight-mass spectrum (SELDI-TOF-MS) was employed to screen differential proteins in serum from 33 HCC patients and 33 control cases, and then to purify and identify them using isoelectric precipitation, Tricine sodium dodecyl sulphate ployacrylamide gel electrophoresis (Tricine-SDS-PAGE) and high performance liquid chromatography tandem Mass Spectrum (HPLC-MS). Result 65 protein peaks in the range of relative molecular weight from 2000 to 10 000 were found significant difference (P < 0.05) between the patient group and control group. Based on these differential protein peaks, diagnostic model for HCC detection was established and its sensitivity and specificity were 100% and 96.97 % respectively. Proteins with 8706.5 and 8579.2 relative molecular weights (the t value was 2.562 and 2.783 respectively, and P value was 0.013 and 0.015 respectively) out of the 65 differential proteins were purified and identified, and then recognized as Apolipoprotein A Ⅱ (Apo AⅡ). Conclusion Apo A II is probably a differential protein of HCC and maybe related to the pathogenesis of HCC.     

阿曼托双黄酮对辐射损伤小鼠骨髓细胞的保护作用

目的 探讨阿曼托双黄酮(amentoflavone,AF)对辐射小鼠骨髓细胞的防护作用及可能机制。方法 培养C57BL/6小鼠骨髓原代细胞,分为正常对照组、照射对照组、AF 2.5和5μmol/L组,每组3复孔,给药12 h后换成普通培养基,给予12Gy60Coγ射线一次性照射,于照后6和12 h分别用Hoechst染色法检测细胞的凋亡,用PI染色和流式细胞仪检测细胞周期,用酶联免疫吸附法检测细胞培养基中TNF-α的浓度。结果 AF对辐射后小鼠骨髓细胞凋亡及细胞周期变化无明显影响,但能显著降低辐射后细胞上清中TNF-α的浓度,且对照后6 h细胞作用明显(2.5μmol/L组P<0.05,5μmol/L组P<0.01);照后12 h也具有同样趋势,与照射对照组相比,5μmol/L组细胞上清中TNF-α表达明显降低(P<0.05)。结论 AF对C57BL/6小鼠骨髓细胞具有一定的辐射防护作用,它可能是通过抑制辐射后骨髓细胞TNF-α的表达来发挥辐射防护作用。     

早期矽肺损伤的蛋白质组学研究及 α 晶状体球蛋白 B 的表达与验证

目的：建立二氧化硅诱导早期肺损伤大鼠肺组织的二维凝胶电泳图谱,筛选在此过程中起关键作用的靶 蛋白分子并进行验证。方法：制作二氧化硅诱导大鼠早期肺损伤模型(实验组),通过HE染色观察肺部形态变化,用 双向凝胶电泳法建立二维凝胶图谱,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析鉴定差异表达蛋白 分子,用Western印迹验证差异表达蛋白分子在肺组织中的表达。结果：成功制作二氧化硅早期肺损伤模型,建立实 验组及对照组肺组织二维凝胶电泳图谱,二者蛋白表达及分布存在差异,发现差异点40个,选取重复性好,在凝胶 上位置和表达适中的共20个进行MALDI-TOF-MS鉴定及数据库搜索并筛选,鉴定出差异蛋白13种,包括α晶状体球蛋 白B、间隙蛋白I、肥大细胞蛋白酶等,进一步用Western印迹证实实验组α晶状体球蛋白B表达明显增加,与蛋白质组 学结果一致。结论：α晶状体球蛋白B在早期矽肺组织中表达明显升高,提示其可能在矽肺的发生发展中起关键作用。     

电磁辐射对生物体损伤的研究进展

电磁波目前广泛应用于无线通信、军事、医疗等领域,与此同时,电磁辐射的生物效应和对健康的影响也愈来愈受人们的重视。电磁辐射可引起机体多系统、多脏器的损伤,本文就电磁辐射的损伤机制及其对大脑、心脏、眼睛和血液等重要器官系统影响的研究进展作一综述。     

T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇全抗原的合成及鉴定

目的分别合成T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的全抗原。方法采用琥珀酸酐法对分子结构进行修饰,产生易反应的官能团,并与载体蛋白偶联,从而具备免疫条件,用高性能基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪MALDI-TOF检测偶联物及偶联蛋白的分子量,用商品化的T-2和DON免疫试剂盒与偶联物进行棋盘滴定验证。结果T-2和DON的全抗原及BSA的分子量分别为67641.6、66680.4、66297.7,偶联物与免疫试剂盒中T-2和DON的抗体均呈阳性反应。结论合成的T-2、DON全抗原为相应抗体的制备和免疫学方法的建立奠定了基础。     

急性肝衰竭大鼠肝脏的蛋白质组学研究

目的 筛选急性药物性肝衰竭大鼠肝脏组织的差异表达蛋白质.方法 将24只SD大鼠分为两组 ,12只通过腹腔注射10 g/L的D-氨基半乳糖建立大鼠急性肝衰竭模型(实验组) ,12只腹腔注射生理盐水作为对照组.提取两组大鼠肝脏组织的蛋白质 ,定量后进行IEF和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)双向凝胶电泳(2-DE)分离 ,通过软件找到差异蛋白点并使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)进行鉴定.结果 成功鉴定出27个有效的差异蛋白质点 ,其中实验组较对照组上调15个 ,下调12个.结论 急性药物性肝衰竭模型大鼠肝脏酪蛋白激酶Iα(CKⅠα)、酪氨酸蛋白激酶(PTK)、增殖细胞核抗原(PCNA)等蛋白的表达较正常大鼠存在显著差异.     

131I致分化型甲状腺癌患者唾液腺辐射损伤及其防治的研究进展

131I治疗分化型甲状腺癌（DTC）的技术成熟、效果显著,是DTC患者术后综合治疗的主要方法之一,目前已被广泛应用于临床。但其造成的唾液腺辐射损伤（口干、腮腺肿痛、味觉改变等）会对DTC患者的生活质量造成一定影响。近年来,各种唾液腺辐射损伤防护剂层出不穷,但其确切疗效较为局限,且治疗方案尚未规范统一。笔者就DTC患者术后行131I治疗对唾液腺的辐射损伤及其防治的研究进展进行综述。     

甘西鼠尾草总酚酸提取物对电离辐射血管内皮细胞损伤的保护作用及机制研究

目的 研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)对电离辐射血管内皮细胞损伤的保护作用,探讨其抗电离辐射作用机制.方法 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分别给予10000、1000、500、250、125、62.5、30、15、5、1μg/ml SPE溶液处理24 h;HUVEC细胞暴露于10 Gy60Co γ射线照射后培养30 h,分别给予125、250、500 μg/ml SPE溶液处理24 h;HUVEC暴露于10 Gy 60Coγ射线照射后培养1h,加入100 μl组织细胞淋巴瘤细胞(U937细胞)溶液,1h后除去未黏附的细胞,分别给予125、250、500 μg/ml SPE溶液处理3h.采用MTS法检测以上溶液细胞活力变化.HUVEC暴露于10 Gy60Coγ射线照射后培养6h,分别给予125、250、500 μg/ml SPE溶液处理3h后,测定活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量,继续培养6h后,采用Western印迹检测Bcl-2、Bax、THBD、γH2AX、ICAM-1、VCAM-1等蛋白表达.结果 HUVEC可耐受1000 μg/ml以下的SPE溶液.对10000 μg/ml SPE溶液,其细胞活力下降极显著(P＜0.0001).与辐射模型组相比,250和500 μg/ml SPE剂量组的辐射HUVEC活力显著升高(P＜0.01)、与U937细胞间黏附比例显著降低(P＜0.01);SPE各组的ROS、MDA水平显著降低(P＜0.01),SOD、GSH水平显著升高(P＜0.01),且效应强度与剂量均呈正相关.SPE各组Bcl-2、THBD蛋白表达显著升高,Bax、γH2AX、ICAM-1及VCAM-1蛋白表达显著降低.结论 SPE可通过调节凋亡及细胞周期相关蛋白,增强血管内皮细胞抗凋亡能力和细胞活力,通过抑制单核细胞黏附、降低脂质过氧化、减轻血管内皮细胞氧化应激及炎症损伤等机制,对电离辐射血管内皮细胞损伤具有保护作用.     

苯比芘作用于16HBE气道上皮细胞的蛋白质组学研究

目的应用蛋白质组学方法筛选出苯比芘（BaP）作用过的16HBE气道上皮细胞（处理组）与正常16HBE气道上皮细胞（对照组）的差异表达蛋白质,为阐明BaP对人体气道的致癌机制提供理论依据。方法培养人气道上皮细胞16HBE,并用BaP进行处理,采用双向凝胶电泳（2-DE）分离细胞总蛋白,运用 Image Master 2D Elite 5.0图象分析软件识别差异表达的蛋白质点,应用基质辅助电离解析飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）鉴定差异表达的蛋白质点,明确其生物学功能。结果建立双向电泳图谱,找出15个表达量有明显差异的蛋白质点,其中包括转酮醇酶、埃兹蛋白及泛素-蛋白酶体等与肿瘤发病密切相关的蛋白质。结论建立重复性较好16HBE人气道上皮细胞双向电泳图谱,并鉴定出一些与肿瘤发病机制相关的蛋白质,为阐明BaP对人体气道的致癌机制提供理论依据