Cell cycle and radiosensitivity of progeny of irradiated primary cultured human hepatocarcinoma cells

AIM: To evaluate the change of growth characteristics and radiosensitivity of irradiated primary cultured human hepatocarcinoma cells. METHODS: All tumor tissue samples were obtained from 39 hepatocarcinoma patients with a mean age of 49.6 years (range 22-76 years). We divided the samples into irradiated group and non-irradiated group and measured their plating efficiency (PE), population doubling time (PDT), radiosensitivity index SF2 and cell cycle. RESULTS: The PDT of primary culture of hepatocarcinoma cells was 91.0±6.6 h, PE was 12.0±1.4%, SF2 was 0.41±0.05%. The PDT of their irradiated progeny was 124.8±5.8 h, PE was 5.0±0.7%, SF2 was 0.65±0.09%. The primary cultured human hepatocarcinoma cells showed significant S reduction and G2 arrest in a dose-dependent manner. The progeny of irradiated primary cultured hepatocarcinoma cells grew more slowly and its radiosensitivity increased. CONCLUSION: The progeny of irradiated primary cultured human hepatocarcinoma cells grows more slowly and its radiosensitivity increases.     

当归多糖对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞的影响

目的 研究当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)的保护作用.方法 BALB/c小鼠按随机数字表法分为10组,每组24只,共计240只.正常组不作任何处理,其余9组经X射线照射后分别给予生理盐水(NS)、2 mg/kg APS和8 mg/kg APS,给药至第7、14、21天计数小鼠外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)及骨髓单个核细胞(BMNC);观察BMSC生长达80％贴壁所需时间及形成的成纤维细胞集落(CFU-F)数量;流式细胞术检测BMSC细胞周期、凋亡率及表面黏附分子CD54、CD106的表达水平.结果 与正常组比较,NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数明显减少(P＜0.05);BMSC达80％贴壁所需时间明显延长,CFU-F数明显减少(P ＜0.05);G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例显著降低(P ＜0.05);BMSC细胞凋亡率明显增高(P＜0.05);CD54、CD106表达明显降低(P＜0.05).2 mg/kg APS、8 mg/kg APS组与NS组相比,外周血各指标、BMNC数及CFU-F数明显增加(P＜0.05);BMSC达80％融合时间显著缩短(P＜0.05);G0/G1期比例明显降低,S期比例显著增加(P＜0.05);凋亡率显著降低(P＜0.05);CD54、CD106表达明显增高(P＜0.05).第21天8 mg/kg APS组各指标均恢复正常.结论 APS可能是通过提高BMSC贴壁及增殖能力,加速BMSC由G0/G1期向S期转换,降低BMSC凋亡率,上调CD54、CD106表达来促进辐射损伤后小鼠造血功能的恢复.     

蛋白质组学的相关技术研究进展

目前,生物学研究已进入后基因组时代,一个以＂蛋白质组＂为研究重点的生命科学新时代已悄然到来.近年来,蛋白质组技术发展迅速,激光捕获微切割、蛋白质芯片、同位素包被亲和标记等新技术,促进了蛋白质组学的发展.综述了近年蛋白质组学相关新技术的进展及其应用情况.     

血小板第4因子对辐射损伤小鼠骨髓细胞周期的调控机制

目的：检测小鼠骨髓细胞p53、Cyclin D1及CDK4蛋白表达量的变化，以探讨血小板第4因子（PF4）对急性辐射损伤小鼠骨髓细胞保护作用的机制。方法：雄性BALB／c小鼠随机分为3组，第1组（正常对照组）、第2组（单纯照射组）、第3组（PF4保护组），第3组在照射前26h及20h腹腔注射PF440μg／kg，第2、3组全身一次性5Gy ^60Co-γ射线照射，照射后4h取小鼠骨髓细胞，Western blot检测小鼠骨髓细胞内p53、Cyclin D1、CDK4蛋白量表达的变化。结果：第2组、第3组小鼠骨髓细胞p53蛋白量与第1组相比明显升高，而Cyclin D1、CDK4则明显降低（P〈0．05）；第2组与第3组p53蛋白表达量的表达有明显差异（P〈0．05），而Cyclin D1与CDK4无统计学意义（P〉0．05）。结论：p53蛋白在PF4对急性辐射损伤小鼠骨髓细胞周期调控作用中起一定作用。     

辐射对体外培养的小鼠成骨细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的 肿瘤放射治疗诱发骨组织损伤,辐射后成骨细胞Ⅰ型胶原的基因表达分析揭示辐射对早期和晚期的成骨细胞功能的影响.方法 在体外诱导骨髓基质细胞生成成骨细胞,对其特性进行确定.用聚合酶链式反应(PCR)方法分析了1～4 Gy照射的早期和晚期成骨细胞的Ⅰ型胶原表达.结果与对照组相比,经1～3 Gy剂量照射后的早期成骨细胞Ⅰ型...     

粗江蓠多糖对辐射损伤小鼠NK细胞的影响

目的：研究粗江蓠多糖（Gracilaria Gigas Harvey Polysaccharides,GHPS）对辐射损伤小鼠NK细胞的影响。方法：采用60Coγ射线5Gy全身照射小鼠制造辐射损伤模型,通过乳酸脱氢酶释放法检测不同剂量（10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg）的GHPS对辐射损伤小鼠NK细胞杀伤靶细胞能力的影响。结果：辐射对照组小鼠接受60Coγ射线5Gy照射后,NK细胞的活性显著低于正常对照组（P〈0.01）。经腹腔注射（10、20、40）mg/kg GHPS,再接受γ射线5Gy照射后,小鼠NK细胞活性明显高于辐射对照组（P〈0.01）,并有剂量依赖性。结论：5Gyγ射线可以抑制小鼠NK细胞杀伤靶细胞的活性,而GHPS对辐射损伤小鼠的NK细胞有保护作用。     

FTA样本洗提卡用于子宫颈癌筛查的临床应用价值

【摘要】 目的 探讨固体FTA样本洗提卡（FTA卡）在宫颈癌筛查的HPV DNA分型检测中作为储存与转运待检样本载体的临床应用价值。方法 以北京大学深圳医院宫颈门诊因HPV或细胞学检查阳性行阴道镜下宫颈活检的102例患者为研究对象,由妇科医师采集宫颈脱落细胞样本,分别使用固体FTA卡和细胞保存液作为样本储存和转运的介质,均采用PCR为基础的质量阵列基质辅助激光电离解析飞行时间质谱系统（MALDI-TOF）法进行高危型HPV分型检测,比较FTA卡与常规的液体介质作为样本储存与转运载体在宫颈癌筛查中的有效性。结果 102例患者中,液体介质保存的样本检测的HPV感染率为69.6%,FTA卡为66.7%,两组比较,差异无统计学意义（χ2=0.250,P＞0.05）。两种保存方法检测HPV阳性率有很好的一致性（Kappa值=0.932,P＜0.001）。两种方法检测的HPV型别比较,差异无统计学意义（χ2=0.250,P＞0.05）,且两者具有很好的一致性（Kappa=0.930,P＜0.001）。以病理诊断为金标准, FTA卡和液体介质保存样本检测HPV对于检出≥CIN2的曲线下面积分别为0.718和0.699（P＜0.05）;检出≥CIN3的曲线下面积分别为0.695和0.678（P＜0.05）。结论 FTA卡和液体介质保存宫颈细胞样本在HPV分型检测中具有良好的一致性,对于高级别宫颈病变的诊断效率亦相当。由于固体FTA卡体积小、便于转运、污染风险小、且简化了样本DNA的提取,故将其作为一种新的HPV检测样本储存方法用于宫颈癌筛查具有很高的临床应用价值。 【关键词】 FTA卡;高危型HPV分型检测;质量阵列基质辅助激光电     

吲哚-3-甲醇酸性代谢产物辐射防护作用的研究

目的 探讨吲哚-3-甲醇(I3C)酸性代谢产物的辐射损伤防护作用.方法 采用细胞克隆形成实验检测细胞的存活分数;采用Western Blot方法检测蛋白表达水平.结果 采用正常纤维上皮细胞184A1,发现7种I3C酸性代谢产物表现出不同的辐射损伤防护效果,其中CTET(1μmol/L)、LTET(1μmol/L)、HI-IM(1 μmol/L)和3,3'-二吲哚甲烷(DIM)(0.3 μmol/L)4种代谢产物在细胞γ-射线照射前24 h预处理细胞均不同程度地提高了辐照细胞的存活分数,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),而CT(1μmol/L)、LTr-1(1 μmol/L)和ICZ(1μmol/L)3种代谢产物则对辐照细胞存活分数无影响(P＞0.05).进一步研究发现CTET、LTET、HI-IM和DIM可导致ATM、BRCA1和NBS1蛋白磷酸化水平的改变.同样,CT、LTr-1和ICZ对这些蛋白的磷酸化水平不产生影响.另外,HI-IM可明显降低辐射损伤诱导的细胞坏死和细胞凋亡.结论 CTET、LTET、HI-IM和DIM 4种I3C酸性代谢产物可明显降低184A1细胞的辐射敏感性,即具有辐射防护作用,其机制可能与其调节DNA损伤与修复蛋白磷酸化和细胞凋亡有关.     

用足孕期畸形学指标评价毫米波辐射对小鼠植入后胚胎生长发育的影响

本实验用频率36.11GHz、功率密度为10.0mW/cm~2的毫米波,在小鼠怀孕6～15d时进行2h/d的照射,在孕期终了用足孕期畸形学指标进行分析。结果显示,毫米波照射可导致足孕期孕鼠体重、体重增加数和胎鼠体重的明显降低,胎盘重明显减轻,足孕时胎仔身长及尾长均减短,照射未导致孕鼠脑、肝、肾、卵巢等脏器重量(右肾除外)及脏器/体重比值、活胎数、死胎数、吸收数等指标发生明显变化,亦未导致胎鼠外表发生畸形、内脏发生畸形,或骨骼畸形增多。     

蝎毒多肽对辐射损伤小鼠骨髓造血干细胞及祖细胞的作用

目的探讨不同蝎毒多肽(scorpion venom peptide,SVP)组分对辐射后机体造血干细胞及祖细胞恢复的作用。方法6.0GyX射线一次性全身照射,制作辐射损伤小鼠模型。内源性脾结节法观察照射后第10天脾集落形成单位(CFU-S)的变化。用甲基纤维素半固体培养基培养骨髓混合集落生成单位(CFU-Mix),观察体内外给药方法及照射后不同时间对CFU-Mix生成的影响。结果(1)体内实验:SVPⅣ组分处理后的CFU-S数明显高于照射对照组(P<0.05);SVPⅤ组分CFU-S数量与照射对照组差异无统计学意义。照射后各SVP组CFU-Mix的数量均高于照射对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)体外实验:与照射对照组相比,体外分别单独加入SVPⅣ、Ⅴ组分以及细胞因子(IL-6和SCF)均能够促进CFU-Mix的增殖;而SVPⅣ、Ⅴ组分分别与细胞因子联合应用对CFU-Mix生成的促进作用更为明显,其中Ⅳ组分效果更强,与照射对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SVP具有保护辐射损伤小鼠造血干细胞及祖细胞,加速其增殖能力恢复的作用。