华南地区正常成人股骨远端髁扭转角测量及其临床意义

目的探讨华南地区正常成人的膝关节股骨远端髁扭转角具体数值,并分析其在性别和侧别间有无统计学差异。方法招募华南地区（往上数五代以内均生在华南地区,包括广东、广西或者海南）正常成人志愿者71例（142膝）,男38例（76膝）,女33例（66膝）,年龄20～45岁,平均30．56岁,体重40—80kg,平均59．90kg,身高151—185cm,平均167．80cm。通过螺旋CT扫描志愿者膝关节,所得原始数据（DICOM3）刻录为光盘,导入MIMICS10．01中,选择通过股骨内外上髁的层面进行测量股骨远端髁扭转角。结果所测得华南地区正常成人的股骨远端髁扭转角：男性为（6．20°±2．03°）,女性为（7．19°±1．78°）,均值为（6．66°±1．97°）,性别之间差异有统计学意义（t=3．077,P〈0．01）;左侧为（6．86°±1．92°）,右侧为（6．45°±2．02°）,侧别间无统计学差异（t=1．238,P〉0．05）。总体股骨远端髁扭转角为（2．39°～11．34°）,均值（6．66°±1．97°）。结论对华南人的人工全膝关节置换术中,传统的外旋3。截骨可能会导致对线不佳,应该适当提高旋转对线的外旋度数。     

High expression of Twist is associated with tumor aggressiveness and poor prognosis in patients with renal cell carcinoma

Aims: Twist has been reported to play crucial roles for malignant aggressiveness; however, detailed pathological significance of Twist in renal cell carcinoma (RCC) is not fully understood. The present study was to clarify clinical significance and molecular functions of Twist in patients with RCC. Methods: Twist expression was examined by immunohistochemical techniques in 156 formalin-fixed specimens. Cell proliferation, angiogenesis, and apoptosis were measured as the percentage of Ki-67-positive cells (proliferation index, PI), CD31-stained vessels (microvessel density, MVD), and TUNEL-positive cells (apoptotic index, AI). In addition, semi-quantification of matrix metalloproteinase (MMP)-2 was performed. Macrophages were identified with anti-CD68 antibody, and the tumor associated macrophage (TAM) density was calculated as CD68-positive cells per high-power field. Results: Twist expression was positively associated with grade, pT stage, and metastasis (p<0.001). We also noticed that its expression was considerably higher in cancer cells of sarcomatoid RCC and in those at the edge of the tumors. Twist expression was positively correlated with PI, MVD, MMP2 expression, and TAM density (P<0.001), but not with AI, and MMP-2 expression and TAM density were independently correlate by multi-variate analyses. Kaplan-Meir survival curves showed high Twist expression was a worse predictor for cause-specific survival (P<0.001). Conclusions: Twist plays important roles in tumor growth, progression, and survival in patients with RCC patients. Such pathological mechanisms are significantly associated with increased cancer cell proliferation, angiogenesis, MMP2 expression, and macrophage recruitment. These findings are important information for discussion of treatment and observation strategies in these patients.     

冠状动脉慢血流患者左心室旋转及扭转运动特征与心肌血流灌注的相关性分析

目的应用多巴酚丁胺负荷实时心肌造影超声心动图（RTMCE）结合二维斑点追踪（STE）技术评价冠状动脉慢血流（CSF）患者的心肌血流灌注及左心室旋转、扭转运动特征,并进一步分析二者之间的相关性。 方法选取2017年1月至2019年3月杭州师范大学附属医院因胸痛行冠状动脉造影的患者54例,冠状动脉造影结果为CSF的患者33例为CSF组,结果正常者21例为对照组。应用二维超声测量常规参数,双平面Simpson法获得左心室舒张末容积（LVEDV）及左心室射血分数（LVEF）,应用STE技术测量左心室基底水平旋转角度峰值（R_心底）、旋转达峰时间（TPR_心底）和左心室心尖水平旋转角度峰值（R_心尖）、旋转达峰时间（TPR_心尖）,并获取左心室扭转角度峰值（LVTW）及旋转延迟时间（RDD）。对所有受试者进行多巴酚丁胺负荷试验,在静息和多巴酚丁胺负荷状态下行RTMCE检查,定量分析得出心肌血容量（A值）、心肌血流速率（β值）、心肌血流量（MBF）,并获得心肌血流储备（MFR）。采用Pearson相关分析CSF患者左心室旋转、扭转与心肌血流灌注相关参数之间的相关性。 结果2组受检者LVEDV、LVEF差异均无统计学意义;与对照组比较,CSF组患者R_心尖、LVTW、RDD减小,TPR_心尖增大,差异有统计学意义（U=2.707,t=-2.379、-4.988、2.422;P均<0.05）。与对照组比较,静息时CSF组患者β值减小,差异有统计学意义（t=-2.218,P<0.05）;负荷状态下β值、MBF减小,差异有统计学意义（t=-3.791、-2.612,P均<0.05）;CSF组患者MFR较对照组减小,差异有统计学意义（t=-2.585,P<0.05）。Pearson相关分析表明静息时CSF患者R_心尖、LVTW分别与MBF存在相关性（r=0.502、0.462,P均<0.05）;负荷状态下R_心尖、LVTW分别与MBF存在相关性（r=0.436、0.368,P=0.009、0.035）。 结论CSF患者存在心肌微循环障碍,其R_心尖、LVTW降低,心肌微循环障碍可能是左心室旋转及扭转运动减低的主要决定因素之一。     

姜黄素类似物对糖尿病肾病小鼠肾纤维化的影响及机制探讨

目的:探讨姜黄素类似物对糖尿病肾病(DN)小鼠肾纤维化的影响及机制。方法:KKAy小鼠给予高脂饲料连续饲养2周构建DN小鼠模型,随机分为模型组和实验组,每组12只,10只C57BL/6J小鼠饲喂普通饲料,作为正常组。实验组小鼠灌胃姜黄素类似物H85 mg/kg,模型组和正常组均灌胃等量生理盐水,1次/d,连续干预6周。采用血糖仪检测小鼠空腹血糖(FBG),双缩脲法检测处死前24 h尿液尿蛋白(UP);过碘酸-无色品红染色(PAS染色)观察小鼠肾组织病理形态变化;蛋白免疫印迹(WB)法及实时荧光定量-聚合酶链式反应(qPCR)检测各组小鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)和IV型胶原(Col-Ⅳ)、Twist蛋白表达情况。结果:干预后,正常组、模型组和实验组小鼠肾脏指数(KI)分别为(6.24±0.32)、(14.4±2.39)、(9.14±1.43)mg/g,FBG分别为(4.96±1.25),(35.54±3.43),(27.54±1.12)mmol/L,24 h UP分别为(31.69±5.51)、(710.54±231.28)、(410.43±130.36)μmol/L;肾小球硬化评分分别为(0.00±0.00)、(3.02±0.24)、(1.69±0.21)分,组间差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组小鼠肾组织α-SMA、FN和Col-Ⅳ、Twist蛋白及mRNA相对表达量升高(P<0.05),而实验组小鼠低于模型组(P<0.05)。结论:姜黄素类似物可改善DN小鼠肾功能及肾组织损伤程度,降低纤维化蛋白表达,延缓肾组织纤维化,可能与下调Twist蛋白表达有关。     

超声斑点追踪显像技术评价高血压对左室心肌扭转-位移环的影响

5目的运用超声斑点追踪显像(STI)技术构建左室心肌扭转-径向位移环(Loop),探讨心动周期中高血压对心室扭转-位移环的影响并评价高血压患者左室功能的早期改变。方法原发性高血压患者32例和正常人24例,经胸采集心尖水平和心底水平二维图像,运用超声工作站行定量分析,构建左室心肌扭转-径向位移环(Loop),计算心肌扭转角度,径向位移。分析心动周期中扭转与径向位移之间的相关性,比较高血压患者与正常人的扭转峰值、二尖瓣开放时间点(MVO)扭转值、解旋率、收缩期和舒张早期径向位移,同时分析Loop各形态参数。结果①与正常人比较,高血压患者左室扭转峰值增大(18.26±4.2vs13.82±2.7,P<0.001),解旋率减小[(34±7.0)%/msvs(44±11.9)%/ms,P<0.001],差异均有统计学意义。②左室收缩期扭转与径向位移显著线性相关(r=0.97,P<0.05),高血压较正常组Loop收缩期斜率增大(P<0.05)。舒张早期心室解旋约40%,此期径向位移相对较小,二者呈线性相关(r=0.94,P<0.05),Loop图上舒张早期斜率较正常组大(P<0.05)。结论利用STI可以无创性的构建左室扭转-径向位移环。通过分析环的各形态参数,评估高血压患者早期左心功能变化。     

Twist基因在胃癌中表达与EMT现象的研究

目的：研究Twist、E—cadherin、N—cadherin在胃癌组织中的表达及上皮间质转化（EMT）现象,探讨其与胃癌侵袭转移的关系。方法：分别采用逆转录聚合酶链反应（RTPCR）和免疫组化方法检测58例胃癌组织和对应癌旁组织中介导EMT发生的转录因子Twist、上皮性标记基因E—cadherin以及间质性标记基因Ncadherin的表达情况。结果：胃癌组织中Twist、Ecadherin以及Ncadherin蛋白阳性表达率分别为75．8％、36．2％、44．8％,癌旁组织分别为32．7％、91．3％、12．1％,3种蛋白在胃癌组织中及癌旁组织的表达差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。与癌旁组织相比,TwistmRNA和Ncadherin mRNA在胃痛组织中表达明显上凋,Ecadherin mRNA表达下调。结论：Twist介导的EMT发生可能与胃癌的侵袭转移有关。     

Twist、E-cadherin和N-cadherin在胃癌的表达及其意义

目的研究胃癌中转录因子Twist,上皮性钙黏附素(E-cadherin)以及神经性钙黏附素(N-cad-herin)的表达及三者与胃癌侵袭转移的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测58例胃癌组织和对应癌旁组织中Twist、E-cadherin以及N-cadherin mRNA的表达水平,将结果与临床资料进行统计分析。结果Twist、E-cadherin、N-cadherin mRNA在胃癌组织中表达分别为1.55±0.51、0.86±0.21、1.53±0.54;在癌旁组织中分别为1.22±0.39、1.07±0.20、1.15±0.37;胃癌组织中3种mRNA与癌旁组织中相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。Twist、E-cadherin、N-cadherin表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05)。Twist与N-cadherin表达成正相关(r=0.365,P<0.05),Twist与E-cadherin表达成负相关(r=-0.446,P<0.01)。E-cadherin与N-cadherin表达成负相关(r=-0.359,P<0.05)。结论Twist及...     

Twist基因在结肠癌Lovo细胞奥沙利铂、氟尿嘧啶耐药中的作用

目的 探讨Twist基因在结肠癌Lovo细胞奥沙利铂、氟尿嘧啶耐药中的作用.方法 体外将siRNA-Twist、pcDNA-Twist分别转染结肠癌Lovo细胞,通过Western blot和RT-PCR方法检测细胞Twist的表达.不同浓度奥沙利铂和氟尿嘧啶、不同作用时间作用于Lovo细胞,MTT法检测细胞增殖及半数抑制浓度(IC50).流式细胞术检测Lovo细胞凋亡情况.结果 siRNA-Twist转染Lovo细胞48 h后,细胞的Twist基因表达明显降低,而pcD-NA-Twist转染后,细胞的Twist基因表达明显升高.奥沙利铂、氟尿嘧啶均呈时间、剂量依赖性抑制Lovo细胞增殖.在IC50浓度奥沙利铂和IC50浓度氟尿嘧啶作用各组Lovo细胞48 h后,siRNA-Twist组细胞生长抑制率、凋亡率明显高于空白对照组及siRNA-Control组(P＜0.05),细胞对药物耐药性降低;而pcDNA-Trwist组细胞生长抑制率、凋亡率明显低于空白对照组及pcDNA-Control组(P＜0.05),细胞对药物耐药性升高.结论 Twist基因在结肠癌Lovo细胞奥沙利铂、氟尿嘧啶耐药中发挥正向作用.     

Twist在胃癌中的表达及其与临床病理学指标关系研究

目的：检测Twist蛋白在胃癌组织中的表达及与临床病理学指标的关系，探讨Twist蛋白在胃癌诊治中的临床应用价值。方法：应用鼠抗人Twist单克隆抗体免疫组织化学方法检测98例不同类型胃癌组织及32例正常胃组织中Twist的表达。结果：在98例胃癌组织中，Twist阳性表达60例（61.2％）；在正常胃组织中其阳性表达5例（15.2％），两者比较，P=0.000（X^2=20.06）；结合临床病理资料统计分析发现，Twist在胃癌组织中表达与肿瘤的分化程度、胃壁浸润、淋巴结转移及远处转移有关（X^2分别为6.577、9.557、9.87、4.88，P值分别为0.01、0.002、0.002、0.027）；而其表达与病人年龄、性别无关（X^2分别为0.226、0.331，P值分别为0.634、0.565）。结论：Twist在胃癌诊断中作用明确，并且在判断肿瘤分化程度、浸润、淋巴结转移等方面均具有较好的辅助诊断价值。     

鼠视网膜新生血管发生过程中Twist基因的表达

目的 探讨视网膜新生血管发生过程中Twist基因的表达情况.方法 对照实验研究.将40只新生C57/BL小鼠分为两组:(1)对照组,正常空气环境中饲养;(2)高氧组,在高氧环境中制作小鼠缺氧性视网膜新生血管动物模型.将出生第7天的小鼠放人氧箱,在75%浓度的高氧环境中饲养5 d后,取出氧箱.待出氧箱第12天和第17天(视网膜新生血管发生高峰时间)分别处死小鼠,制作视网膜铺片和切片,观察小鼠视网膜新生血管发生情况.应用免疫组织化学染色检测小鼠视网膜血管内皮细胞(VE)-钙黏蛋白、波形蛋白及Twist基因表达变化情况;提取全视网膜RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测VE-钙黏蛋白、波形蛋白及Twist基因表达变化情况.应用SPSS 11.5统计学软件进行数据处理,对高氧组与对照组小鼠出生后不同时间的VE-钙黏蛋白、波形蛋白、Twist基因表达的灰度值比较,采用两因素析因设计的方差分析,以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 免疫组织化学检测结果显示,出生后第17天的小鼠,高氧组VE-钙黏蛋白表达的灰度值(65.19±8.39)与对照组(75.36±7.04)相比明显减少(F=8.616,P=0.009),波形蛋白表达的灰度值(95.09±14.13)与对照组(82.14±6.32)相比明显升高(F=6.999,P=0.016),Twist基因表达的灰度值(119.48±7.90)与对照组(93.30±6.37)相比亦明显升高(F=66.557,P=0.000).RT-PCR检测结果显示,不同处理组间波形蛋白、Twist基因表达的灰度值与检查时间存在交互作用(F=5.508,P=0.032;F=17.760,P=0.001).结论 在小鼠视网膜新生血管形成过程中,细胞转型调控的Twist基因发挥着重要作用,其作用机制可能是通过下调血管内皮细胞间的紧密连接蛋白,促进内皮细胞转型实现.