恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-2DNA疫苗诱导小鼠T淋巴细胞的增殖

目的　为了探讨恶性疟原虫FCC - 1/HN株裂殖子表面蛋白 - 2 (MSP - 2 )DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法　将重组真核表达质粒pBK/MSP - 2经骨骼肌注射BALB/c小鼠 ,小鼠经DNA疫苗免疫 8w后 ,用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化 ,并体外培养脾脏细胞 ,用夹心ELISA法测定IFN -γ和IL - 2的产生。结果　与对照组相比 ,疫苗组CD+ 4CD8+ T淋巴细胞有显著性的增高 ,体外培养的脾脏细胞IFN -γ有一个高浓度的分泌。结论　恶性疟原虫FCC - 1/HNMSP - 2DNA疫苗诱导了一个TH1的免疫应答类型     

Intranasal immunization with yeast-expressed 19 kD carboxyl-terminal fragment of Plasmodium yoelii merozoite surface protein-1 (yMSP119) induces protective immunity to blood stage malaria infection in mice

Variable protection against malaria blood-stage infection has been demonstrated in mice following parenteral immunization with the highly conserved 19 kD carboxylterminal fragment of the merozoite surface protein-1 (MSP1₁₉) using CFA/IFA and other adjuvants. Here we show that intranasal immunization of BALB/C mice with yeast expressed Plasmodium yoelii MSP1₁₉ plus a mixture of native and recombinant cholera toxin B subunit, could induce serum MSP1₁₉-specific antibodies at titres ranging from 20 000 to 2 560 000. The Ig subclass responses were predominantly G1 and G2b. Intranasal immunization led to protection following challenge (peak parasitaemia < 1%) in mice with the highest MSP1₁₉-specific titre (≥ 640 000). In two of the three protected mice, a peak parasitaemia of 0.1%–1% was followed by a boost of the antibody response whereas one of the three protected mice did not boost its antibody response after a peak parasitaemia of 0.02%. In unprotected mice, antibody levels rose, then fell, following the detection of parasites in the peripheral blood. CD4⁺ T cell-depletion abrogated the ability of the mice to boost their antibody response following challenge. These data demonstrate the potential for intranasal immunization with MSP1₁₉ to protect against malaria .     

宫颈癌组织HPV58的检测及其E7基因的克隆和表达

目的　检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)并克隆表达其E7基因。方法采用GP5 /GP6 引物系统扩增 5 8例宫颈癌组织 ,将荧光偏振 (FP)检测技术与模板指导的末端延伸反应 (TDI FP)结合 ,检测HPV5 8,确定HPV5 8感染阳性宫颈癌组织。用特异引物从HPV5 8阳性标本中扩增HPV5 8早期表达蛋白E7基因 ,将其连入pGEM TEasy载体 ,获得克隆重组体HPV5 8E7 pGEM T ,并测序验证。将E7基因与pRSET A融合表达载体连接 ,获得E7表达重组体pRSET 5 8E7,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,并用IPTG诱导表达。结果　 5 8例宫颈癌标本中 ,HPV5 8阳性 10例 ,占 5 2例HPV阳性标本的 19.2 %。从其中扩增到了HPV5 8E7基因并构建了其克隆和表达重组体。其表达重组体经IPTG诱导后 ,可表达Mr16× 10 3 的HPV5 8E7His6融合蛋白 ,表达量占菌体蛋白的 30 %。结论　欧美国家少见的高危HPV5 8在中国陕西人宫颈癌组织中并不少见。HPV5 8E7重组表达体可在大肠杆菌中高效表达 ,为HPV5 8相关肿瘤诊断试剂及疫苗的研制奠定了初步基础     

PGDH基因甲基化状态与散发性结直肠癌的相关性研究

[目的]探讨15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyproglandin dehydrogenase,PGDH)基因甲基化状态与散发性结直肠癌发生发展的关系.[方法]利用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测散发性结直肠癌及相对应的癌旁组织中PGDH基因甲基化状态.[结果]PGDH基因在散发性结直肠癌中甲基化率为37.5%(10/32),有6例癌及癌旁组织都发生了甲基化;伴有淋巴结及远处转移的甲基化率为50%(7/14),高于无转移的甲基化率16.7%(3/18)(P<0.05).[结论]PGDH基因高甲基化是散发性结直肠癌中常见的分子改变之一,结直肠癌中PGDH基因高甲基化可能发生在癌变早期并与结直肠癌的恶性进展具有相关性.     

GpsOne远程心脏病急救系统的设计与实现

将GpsOne混合通信定位技术和专业医疗诊断用的心电图采集技术整合到嵌入式单片机系统中,设计了一套新型的基于N-tier体系结构的远程心脏病急救系统。该系统能为远程心脏病急救提供准确的定位和必要的心电图诊断信息。     

基于MSP430动态心电存储系统的设计

目的：解决动态心电图存储容量有限、波形不能实时显示的不便。方法：设计一种基于TI公司超低功耗混合信号处理器MSP430F149的动态心电数据实时存储、传输系统。结果：此系统由MSP430F149单片机、心电数据采集、LCD显示、SD卡存储、USB数据传输等部分组成,它能完成心电数据的实时采集、显示、大容量存储,以及心电数据的USB传输。结论：经临床初步实验,该仪器具有较强的抗干扰能力、性能稳定、功耗低、携带方便,应用前景广阔。     

慢性淋巴细胞性白血病患者miR-9-3甲基化异常及其意义

目的本研究旨在探讨microRNA-9-3(miR-9-3)在慢性淋巴细胞性白血病骨髓细胞中的甲基化异常及其意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术检测8例正常骨髓组织、78例新确诊的慢性淋巴细胞性白血病患者和7种白血病细胞株甲基化水平。结果正常对照组miR-9-3呈未甲基化状态;7种白血病细胞株中有5种呈未甲基化状态(71.4%);78例慢性淋巴细胞性白血病患者中65例呈miR-9-3甲基化,MSP阳性率为83%。5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza Dc)处理白血病细胞株后I83-E95和WAC3CD5+细胞株miR-9-3呈未甲基化状态。结论慢性淋巴细胞性白血病患者存在miR-9-3表达受抑,可能与其基因甲基化异常有关。而miR-9-3甲基化在激活慢性淋巴细胞性白血病患者NF-κB1信号通路的作用值得进一步研究。     

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征免疫网络及其与临床的相关性

目的探讨红细胞表面补体受体Ⅰ型(CR1)活性、红细胞表面CD58表达和血清中可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、白细胞介素-6(IL-6)水平在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)中的作用、变化规律及其与疾病严重程度的关系。方法采用肿瘤红细胞花环法、流式细胞分析法及酶联免疫吸附法检测20例中、重度OSAS患者(研究组)及15例正常人(对照组)的红细胞CR1活性、CD58表达和血清中SIL-2R、IL-6水平。结果(1)研究组患者肿瘤红细胞花环率(ECR1CaRR)较正常对照组降低(P<0.05);CD58表达明显高于对照组(P<0.01)。(2)研究组患者SIL-2R及IL-6水平均明显高于对照组(P均<0.01)。(3)OSAS患者SIL-2R、IL-6与呼吸紊乱指数(AHI)无相关性(P均>0.05),与动脉血氧饱和度低于90%的时间占总睡眠时间百分比(SIT90%)均呈正相关(P均<0.01)。ECR1CaRR、CD58表达与SIT90%无相关性(P均>0.05)。结论血清中SIL-2R、IL-6水平变化与OSAS患者病情密切相关,可作为临床分度及评价疗效的指标;红细胞免疫功能与细胞因子间存在相互调节作用。     

用稳定性同位素~(58)Fe中子活化法测定缺铁性贫血儿童膳食铁吸收率

本文报告了应用稳定性同位素~(58)Fe对三组缺铁性贫血儿童,分别摄取平衡膳、平衡膳加大豆蛋白膳和平衡膳加大豆蛋白加维生素C膳时,各组儿童膳食铁的吸收率。测定结果顺次分别为12.0±3.6％、10.7±4.7％和18.1±3.6％。后者高于前二者,差异显著。据此,作者同意国际营养性贫血咨询小组(INACG)以及大多数学者的主张,即大豆制品不利于或降低膳食铁的生物利用率(bioavailability)。本文并结合实验讨论了本法的原理、操作技术及误差控制等问题,评价了本法在类似工作中的重要意义。