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目的构建pCool—GST—ICAD/CAD的表达载体,并存大肠杆菌BL21(DE3)中表达具有生物学活性的CAD核酸酶?方法用PCR扩增CAD基因,将扩增产物克隆入pCool—GST—ICAD载体中构建出pCool—GST—ICAD/CAD表达载体。经酶切和电泳鉴定正确后,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物经亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤等方法分离纯化。最后用SDS—PAGE和DNA降解实验进行鉴定。结果构建了pCool—GST—ICAD/CAD原核表达载体,重组载体转化后表达出毫克级水平的GST—ICAD/CAD蛋白复合体。经分离纯化后得到纯度很好的CAD—ICAD篮白复合体,在SDS—PAGE电泳上旱现清晰的两条蛋白带。经DNA降解实验证明纯化所得的CAD蛋白具有非特异性降解DNA的核酸酶作用。结论成功制备了具有生物学活性的CAD核酸酶,为进一步研究细胞凋亡的作用机制提供了有效的制剂。 相似文献
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一种适用于聚合酶链反应的常见念珠菌基因组DNA提取方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的介绍一种简单、快速的真菌DNA提取方法,提高真菌DNA提取效率,减少毒性和污染性,以适应临床研究需要。方法同时用溶细胞酶结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法,提取白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和净平滑念珠菌基因组DNA,用A260/A280的比值检测DNA的纯度并计算质量浓度,同时行聚合酶链反应(PCR)以评价其可靠性。结果溶细胞酶结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂成功提取所用真菌基因组DNA,其纯度及质量浓度能满足PCR反应的要求。结论用溶细胞酶结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂提取DNA,简单、快速、高效,可用于PCR反应。 相似文献
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韩立虎 《中华今日医学杂志》2004,4(1):35-35
目的:研究用离子电极法测定SMZ片剂含量的效果。方法:用碘离子选择电极作为指示电极,KI溶液回滴过量Ag^ 。结果:测定结果正确,符合药典要求。结论:离子电极法是测定SMZ片剂含量的有效方法。 相似文献
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灵芝菌合剂中灵芝多糖含量的测定 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:探讨灵芝菌合剂中灵芝多糖含量的检测方法。方法:采用分光光度法,以无水葡萄糖为对照品,检测波长为490nm。结果:此方法在0~120μg范围内线性关系良好,灵芝多糖的平均回收率为99.09%。RSB为1.14%。结论:本法简便快捷,准确度高,重现性好,可作为本制剂的质控方法。 相似文献
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耳针、艾灸对衰老模型小鼠自由基代谢的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
目的观察耳针、艾灸对衰老模型小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)及肝组织脂褐质(LF)含量的影响。方法:D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠接受耳针、耳针 艾灸治疗6周后,测定血清SOD活性、血清MDA及肝组织LF含量。结果:与青年对照组相比衰老模型组小鼠血清SOD活性明显降低、血清MDA及肝组织LF含量明显升高,而经耳针特别是耳针 艾灸治疗后,上述指标:则呈良性转逆。结论:耳针、艾灸具有延缓衰老的作用,且以耳针和艾灸联合应用效果更好。 相似文献
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T细胞在胸腺内的分化发育经历CD4 -CD8-双阴 (DN)T细胞的早期阶段、CD4 +CD8+(DP)细胞的中期阶段、经过阳性选择和阴性选择分化发育成只表达CD4 +或CD8+的单阳 (SP)细胞的后期阶段。SP细胞为成熟的T细胞 ,从胸腺迁出后移居到血液和周围淋巴器官中。既往认为在成熟的T细胞上 ,CD4抗原和CD8抗原的表达是互相排斥的 ,故根据T细胞上CD4抗原或CD8抗原的表达与否把外周T细胞分为CD4 +CD8-和CD4 -CD8+(SP)两大类。但国外自80年代以来 ,已有许多关于DPT淋巴细胞和DNT淋巴细胞研究的报道[1] 。故根据T细胞表面CD4或CD8抗原的表… 相似文献