骨关节病时关节软骨细胞凋亡的研究进展

骨关节病 (ＯｔｅｏａｒｔｈｒｏｓｉｓＯＡ)是活动关节的一种慢性、进行性疾病 ,以关节基质崩解、软骨细胞明显减少为主要特征。研究表明 ,ＯＡ时软骨细胞凋亡与ＯＡ进程密切相关。认识软骨细胞的凋亡机制、凋亡与基质降解、凋亡与异常钙化的关系 ,将有助于了解ＯＡ的发病机理 ,并可通过干预凋亡达到控制病程、治愈疾病的目的。一、ＯＡ时关节软骨细胞的凋亡细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是由基因控制的自主性的有序死亡。在形态学上表现为细胞皱缩、染色质浓缩和出现凋亡小体 ;生化和分子生物学上表现为ＤＮＡ断裂成多聚核小体片段和蛋白…     

核因子κB受体活化剂配体对乳牙根吸收的影响

核因子κB受体活化剂配体（RANKL）是新近发现的破骨细胞活化因子，它与核因子κB受体活化剂（RANK）、骨保护素（OPG）组成一个具有调节破骨细胞增殖、分化、融合、激活和凋亡的相关细胞因子系统。与破骨细胞生物学行为相似的破牙质细胞调节乳牙根生理性吸收，表达于该过程中的RANKL对乳牙根吸收起到一定的促进作用，且对乳恒牙替换具有调控作用。本文就RANKL对乳牙根吸收所起的作用作一综述．     

纯钛表面牙周韧带细胞牙骨质附着蛋白的表达

目的以牙骨质附着蛋白为分化指标，分析牙周韧带细胞在纯钛表面的分化趋势，并探讨诱导矿化对牙周韧带细胞牙骨质附着蛋白表达的影响。方法第三代牙周韧带细胞在商用纯钛表面接种后，分别进行常规培养和矿化液诱导矿化培养，通过免疫荧光原位检测牙骨质附着蛋白的表达，并比较诱导矿化对牙骨质附着蛋白表达的影响。结果牙周韧带细胞在纯钛表面初期呈条纹状生长，常规培养和诱导矿化培养务件下均能表达牙骨质附着蛋白，诱导矿化对牙骨质蛋白的表达无明显影响。结论在常规培养务件和诱导矿化培养条件下，纯钛表面生长的牙周韧带细胞能高度表达牙骨质附着蛋白，提示纯钛表面体外培养的牙周韧带细胞具有形成牙骨质的分化趋势，从而可为种植体周构建牙周韧带结构提供在种植体侧的锚着点。     

米诺环素对牙周膜细胞在根面上附着和增殖的影响

目的探讨米诺环素处理根面对牙周膜细胞附着和增殖的影响。方法用2.5%盐酸米诺环素溶液处理牙周炎患牙的牙骨质根片,与牙周膜细胞共同孵育16、24、72小时不等,以生理盐水作为对照处理。用扫描电镜观察牙周膜细胞在根片上的生长状况;MTT法分析根面处理对细胞附着和增殖的影响。结果在米诺环素处理的病变根面上牙周膜细胞的附着和增殖量(0.43±0.05;0.68±0.07)显著多于盐水处理的病变根面(0.25±0.03;0.41±0.05)(P<0.01),但仍少于健康根面(0.54±0.07;0.86±0.08)(P<0.01)。结论牙周膜细胞在病变牙骨质根面上的生长受到抑制;米诺环素处理根面后,能显著提高细胞的附着和增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子与骨再生修复

骨组织的再生修复一直是多年来的研究热点之一，而生长因子因其能够促进组织细胞的生长和分化也已引起了广泛的关注。骨组织工程学的发展把生长因子作为重要激活物与种子细胞、支架材料、立体培养等联系在一起，成为构建骨组织再生修复必不可少的要素。碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)是主要的生长因子之一，但由于其促进成骨与毛细血管生成的双重作用，使其在促进骨再生修复方面的前景日益受到人们的重视。另外，它还可通过细胞因子网络发挥广泛的生物学作用。现就bFGF在骨组织再生修复过程中的作用及机制，及其在细胞因子网络中与其他因子的相互作用作一综述。     

牙髓干细胞向成牙本质样细胞分化过程中基因表达研究

目的：分离培养来源于人成体牙髓组织的干细胞(dental pulp stem cells，DPSC)，分析研究其在未分化状态及在矿化诱导液中基因表型的变化：方法：采用胶原酶消化法获得人牙髓组织的单细胞悬液，14 d后挑取细胞克隆，分别在普通培养基和矿化诱导培养基中进行培养，利用RT-PCR，图像分析检测细胞基因表型变化。结果。未诱导的DPSC不表达牙本质特异性蛋白(dentin phosphprotein,DSPP)及骨涎蛋白(Bone sialoprotein，BSP)，表达部分成骨(osteocalcin,OCN alkaline phsphatase,ALP)相关表型，低表达转录因子核心结合因子(Cbfa-1)；与末诱导的DPSCs相比较，在成骨诱导中DPSCs表达DSPP和BSP，骨相关基因表达也相应上调。结论：DPsCs在矿化诱导液的作用下向成牙本质样细胞分化，其过程有可能是通过谱系特异表犁的表达或表达上调实现的。     

IL—1,IL—6,TNF对人TMJ滑膜细胞蛋白合成的影响

目的：研究人ＴＭＪ滑膜细胞（ＳＭＣ）蛋白质合成能力，与其它组织细胞的差异，及细胞因子对这方面的影响。方法：采用体外培养的ＳＭＣ、ＴＧＣ、ＮＭＣ３种细胞及无血清培养液，应用紫外分光光度仪在２８０ｎｍ波长处，对培养上清中的蛋白含量进行测定，并与加用ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ后蛋白质合成的量进行对比观察。结果：正常状态下，ＴＧＣ蛋白合成量最高，ＯＤ值达０．１４，而ＳＭＣ最低，为０．０７９。在加用细胞因子作用４８ｈ后，ＳＭＣ蛋白含量达到０．１１７，提高３０％，而ＴＧＣ、ＮＭＣ却下降１０％～３０％。结论：正常状态下ＳＭＣ合成蛋白质成份较其它细胞少，而细胞因子可刺激ＳＭＣ蛋白质合成增加，这些蛋白成份中可能具有影响关节炎症的物质。     

小鼠骨髓细胞和脾细胞诱导形成破骨细胞潜能的比较

目的在体外破骨细胞分化因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)联合应用的情况下,比较小鼠骨髓细胞和脾细胞形成破骨细胞的能力。方法选用小鼠M-CSF依赖性非附着性骨髓细胞和脾细胞,以不同的细胞密度在含有25ng/mlsM-CSF和30ng/mlsRANKL的(-MEM培养液中培养5、9天后,计数形成的抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)阳性多核细胞的数目和骨吸收面积。结果脾细胞形成的破骨样细胞与骨髓形成的细胞形态与功能均无明显差异,但所需的细胞密度为骨髓细胞的10~20倍。结论在特殊情况下,脾细胞可替代骨髓细胞进行体外破骨细胞实验,但培养条件应适当调整。     

细胞角蛋白18和13在术后性上颌囊肿化生上皮中的表达

目的研究口腔术后性颌骨囊肿（POMC）化生上皮起源以及细胞角蛋白（CK）在鳞状化生细胞中的表达.方法采用免疫组化SP法、原位杂交法和RT-PCR法,分别检测46例POMC中细胞角蛋白的表达情况.其中13例囊肿衬里上皮只含有假复层纤毛柱状上皮细胞;30例囊肿衬里既含有纤毛柱状上皮细胞,又含化生的鳞状上皮细胞;3例囊肿衬里只含有化生的鳞状上皮细胞.结果43例纤毛柱状上皮细胞中,39例表达CK8,9例表达CK13,43例均有CK18表达.发生鳞状上皮化生的细胞中CK13表达较多,CK8和CK18表达较少.在33例发生化生的囊肿衬里中,24例表达CK8,23例表达CK13,26例表达CK18.CK13和CK18蛋白的表达与CK13、CK18-mRNA表达水平相关.原位杂交方法检测CK1g-mRNA表达时发现,26例CK18蛋白阳性的化生囊肿衬里上皮以及7例发生化生但不表达CK18蛋白的囊肿衬里上皮都有CK18-mRNA的表达.RT-PCR结果进一步证明所有发生鳞状化生的囊肿衬里上皮都有CK18-mRNA的表达,但是其表达水平较未发生化生的柱状细胞囊肿衬里上皮弱,而且CK13-mRNA的表达与CK18-mRNA表达相反.结论在发生上皮化生的全过程中,CK18-mRNA保持不变,但是其蛋白的表达水平下降,而且发生鳞状化生时CK18表达减少,CK13表达增加.     

体内诱导法建立的Tca8113细胞耐卡铂细胞株的耐药性表达研究

目的探讨通过体内诱导法得到的耐药细胞株的耐药性表达情况。方法以人舌癌Tca8113细胞系为研究对象,实验组采用荷瘤耐药动物的肿瘤细胞培养获得,对照组为体外连续培养诱导其产生耐药性。用四唑蓝法检测细胞耐药指数,标记生物素链亲和素法免疫细胞化学检测耐药相关蛋白P糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶π、多药耐药蛋白和拓扑异构酶Ⅱ的表达,逆转录PCR检测多药耐药基因、多药耐药蛋白、拓扑异构酶Ⅱ和谷胱甘肽S转移酶π的表达。结果免疫细胞化学和逆转录PCR显示2组细胞多药耐药蛋白、谷胱甘肽S转移酶π、拓扑异构酶Ⅱ等表达均升高,但体内诱导较体外诱导可以获得更高、更稳定的耐药性。诱导后的Tca8113细胞对氨甲喋呤、卡铂、平阳霉素、长春新碱耐药性明显升高,而对5-氟尿嘧啶耐药性增加不明显。结论体内诱导得到的细胞株耐药性明显高于体外诱导株,肿瘤细胞的耐药现象受多种基因的调节。体内诱导Tca8113卡铂耐药细胞株Tca8113/CBP-vo可以作为肿瘤耐药研究的平台。