心肌细胞吞噬聚乳酸-乙醇酸纳米粒子的形态学实验

目的　探讨心肌细胞吞噬聚乳酸—乙醇酸 ( polylactic polyglycolicacid ,PLGA)纳米粒子的形态学机理 ,制备组织细胞吞噬纳米粒子的相关模型 ,为纳米粒子作为包载各类药物或基因载体提供实验形态学依据。方法 :将制备的PLGA纳米粒子加入生理盐水中 ,超声振荡成注射用纳米粒子悬浮液后 ,注射至活体家兔心肌组织内 ,4 8小时后取材切片、电镜下观察。结果 :心肌细胞胞质内及胞核内可见大量被吞噬的纳米粒子 ,并且出现了PLGA纳米粒子被吸收、降解的迹象。结论 :心肌细胞完全可以通过吞噬方式大量摄取 ;PLGA纳米粒子 ,将PLGA纳米粒子作为向心肌细胞内转运某种药物或基因的载体是完全可行的。     

生物功能化半导体量子点对活细胞内蛋白质分子可视化的研究进展

半导体量子点(或称半导体纳米微晶体)具有独特的光谱特性和良好的光化学稳定性。通过改变量子点的材料或粒径大小可在同一波长光激发下获得从紫外到近红外(或从蓝色到红色)波长范围内任意点的发射光谱。随着近年来生物亲和性功能化纳米技术的发展,为半导体量子点用于多通道、高通量对活细胞内蛋白质分子直接观察研究这一国际未解决的难题提供了可能。概述了生物功能化半导体量子点在活细胞生理条件对蛋白质分子进行可视化研究的最新进展,评价了其作为荧光探针对活细胞蛋白质分子进行实时动态研究的发展前景。     

纳米技术及其在生物医学中的应用

纳米技术和生物学相结合而形成的纳米生物学将是21世纪生命科学的重要组成部分；纳米技术和医学相结合形成的纳米医学必将大大改善医疗方法，提高治疗水平；被誉为21世纪制造技术的纳米技术将允许我们廉价地制造一些复杂的分子机器，也允许我们制造一些比细胞还要小很多的工具，利用这些工具我们可以更方便地来探究生命的奥秘。可以使医疗在细胞和分子水平上进行。也能够让我们以不可思议的细节来检查生物组织和器官。     

壳聚糖纳米颗粒包裹对鼠白细胞介素2基因表达和调节小鼠免疫效应的影响

本实验制备壳聚糖纳米颗粒 (CNP) ,包裹小鼠白细胞介素 2基因 (mIL 2 )真核表达质粒 (VRMIL 2 ) ,肌注接种 2 1d昆明小鼠 ,观察mIL 2基因体内表达及其对免疫应答和免疫保护的影响。实验结果发现 :CNP包裹VRMIL 2注射小鼠血液中IgG、IgM和IgA不同程度地增多 ,均显著高于CNP包裹空白质粒组 (P <0 .0 5 ) ;其血清中IL 2、IL 4和IL 6的含量明显升高 ,与对照组差异显著 (P <0 .0 5 ) ;外周血液的白细胞和淋巴细胞数量也较对照组显著增加。免疫后 35d以大肠杆菌口服攻毒实验小鼠 ,检测发现 :CNP包裹VRMIL 2组小鼠的上述免疫指标除中性粒细胞外均显著多于对照小鼠 ,VRMIL 2接种小鼠均健康存活 ,而对照小鼠均发病 ;尽管CNP包裹VRMIL 2接种小鼠的体液和细胞免疫指标与未包裹VRMIL 2免疫鼠差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,但剂量仅为后者的 1/ 5。这些结果表明 :壳聚糖纳米颗粒包裹VRMIL 2可显著提高外源IL 2基因体内表达水平 ,明显增强体液和细胞免疫水平的效应 ,增强对大肠杆菌的抗病力 ,提示壳聚糖纳米颗粒包裹IL 2基因可明显增强动物的体液和细胞免疫 ,可作为有效的抗感染免疫调节剂。     

植物血凝素(PHA)对小鼠骨髓粒—单祖细胞增殖的影响

用体外琼脂培养法研究了PHA对小鼠骨髓CFU-GM的影响,结果表明,小鼠经腹腔注射PHA后,对小鼠CFU-GM产率和自杀率的影响随PHA的剂量不同而异,20～40mg/kg的PHA能明显提高CFU-GM的产率,其作用时间维持3天,剂量大于50mg/kg,可抑制CFU-GM产率。PHA组自杀率较对照组明显提高,提示适量的PHA在体内可促进小鼠CFU-GM的增殖,使更多的CFU-GM由Go期进入S期。将PHA直接加入无CSF的培养体系中,未见集落生长。此项结果提示PHA可能通过间接机制而非直接作用于CFU-GM。     

磁性阿霉素纳米微球的制备及在高频磁场中的发热研究

制备一种在高频磁场中能感应发热的用于治疗肿瘤的阿霉素纳米微球，研究其在磁场中的热效应。用超声搅拌冷冻干燥的方法制备药物微球，平均粒径200nm左右。电镜观察其形态为球囊状。将其置于不同介质中于高频磁场中测其温度变化值，实验表明该微球在交变磁场中使介质升温。升温速度与平稳时的温度和微球的量及磁场强度成正比，介质流动性好，升温快。     

未成熟树突状细胞诱导实验性自身免疫性重症肌无力耐受的试验研究

目的 探讨未成熟树突状细胞(iDC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的影响。方法 用小剂量粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)体外诱导骨髓前体细胞，获得的iDC用乙酰胆碱受体(ACAR)负载后皮下接种同基因大鼠，3周后通过体外试验观察脾细胞对AChR的增殖反应，同时用AChR和完全弗氏佐剂(CFA)免疫大鼠，观察免疫7周后MG相关指标的改变。结果 小剂量GMCSF诱导所获得的iDC与成熟DC(mDC)相比，其表面MHCⅡ和共刺激分子CD80、CD86的表达低，摄取dextran-FITC的能力强但刺激同种T细胞增殖的能力弱。接种iDC、mDC、AChR负载的mDC的大鼠和对照组一样，体外脾细胞对AChR的刺激均强烈增殖，用AChR和CFA免疫后，产生明显的MG症状，重复电刺激出现明显衰减，血清AChRAb滴度明显增高，神经肌肉接头呈现典型的MG样改变；而接种AChR负载的iDC的大鼠脾细胞对AChR的刺激呈现明显的增殖抑制但对卵清蛋白的刺激仍强烈增殖，MG相关指标均未见明显改变。结论 骨髓前体细胞经小剂量GM-CSF诱导产生了iDC，AChR负载的iDC可诱导EAMG耐受。     

骨钉和脱钙骨在骨创伤和骨缺损中的应用

目的：探讨同种异体冻干骨钉固定关节内骨折和脱钙骨移植治疗骨缺损的实用价值。方法：应用骨钉治疗关节内骨折７例，其中股骨头骨折４例，距骨骨折１例，内踝骨折２例；应用脱钙骨皮质骨条、松质骨粒移植治疗四肢骨折骨不连６例、骨良性病变切除术后骨缺损６例。结果：术后随访３～１２个月，骨钉固定者８个月后骨钉与宿主骨融合，脱钙骨皮质骨条和松质骨粒植骨者２～６个月愈合，无一例发生免疫排斥反应，近期效果满意。结论：认为骨钉为临床治疗关节内骨折提供了一种新的内固定材料，避免再次手术取内固定物，脱钙骨皮质骨条或骨粒适宜于骨不连和骨缺损的填充植骨治疗。     

改性的纳米羟基磷灰石/聚乳酸复合材料的亲水性与溶胀性研究

评价用聚乙二醇系列的表面改性剂PEG、F127及PELA改性的纳米羟基磷灰石／聚乳酸复合材料的亲水性和溶胀性，先对纳米羟基磷灰石进行表面改性处理后，再综合用传统的溶液共混、流延法及热压法将改性的和未改性的纳米羟基磷灰石分别与聚乳酸制备成复合薄膜。检测结果表明：改性剂分别被涂敷于纳米羟基磷灰石上，改性处理能够改善纳米颗粒在基材内的分布；改性的纳米羟基磷灰石／聚乳酸复合材料比未改性的对比材料的表面接触角小、表面能大、亲水性好、溶胀度大，达到饱和溶胀度的时间长。改性的纳米羟基磷灰石比未改性的羟基磷灰石改善基体聚乳酸的亲水性和溶胀性效果更显著。     

RGD肽表面修饰壳聚糖载基因纳米粒子的体外实验研究

目的 将Arg-Gly-Asp(RGD)肽偶联到壳聚糖(cH)材料表面,并制备成包载质粒DNA的纳米粒子,以未偶连RGD的壳聚糖载质粒DNA作为对照,进行体外内皮细胞转染,观察其是否能提高对内皮细胞的转染效率.方法 以1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS)为偶联剂,通过酰胺键将RGD肽偶联到壳聚糖表面,对其进行表征,并以未偶连RGD的壳聚糖作为对照,制备载pEGFP-C1质粒DNA纳米粒子,比较2者对Hy926细胞的转染效率.结果 壳聚糖-RGD(CH-RGD)载基因纳米粒子转染Hy926细胞的效率明显高于未偶连RGD的壳聚糖载基因纳米粒子(35.7%vs 14.3%,P<0.001).结论 RGD肽表面修饰壳聚糖载基因纳米粒子可用于体外细胞转染,其对细胞的转染效率明显优于未偶连RGD的壳聚糖.