端粒重复序列扩增法结合微孔板杂交法定量检测端粒酶活性

目的 探讨定量检测端粒酶活性的非放射性检测方法。方法 将端粒重复旬扩增测定法（TRAP）与微孔板杂交相结合建立了非放射性检测方法。对3例正常肝组织和4例肝癌患者治疗前后的肝癌组织、瘤旁组织、肝癌凋亡组织进行检测。结果 肝癌组织具有比较高的端粒酶活性,而正常肝组织和瘤旁组织无此酶活性,肝癌凋亡组织端粒酶活性显著降低。结论 该定量分析方法简单、灵敏、特异性强,可以比较准确地反映组织的端粒酶活性状态。     

宫颈癌组织中端粒酶活性测定

目的 探讨端粒酶活性在子宫颈癌组织发生发展中的作用及临床应用价值。方法 采用PCR－TRAP微孔杂交法检测45例子宫颈癌组织标本和8例正常的子宫颈组织的端粒酶活性。结果 45例宫颈癌组织中端粒酶阳性表达率为86．6％,其中宫颈癌Ⅰ期27例,阳性率77．7％,宫颈癌Ⅲ期6例,阳性率100％。8例正常宫颈组织中未检测出端粒酶阳性。结论 端粒酶活性表达在子宫颈癌的发生发展中起重要的作用,端粒酶活性检测对指导宫颈癌的诊断和治疗具有重要意义。     

RADIATION INDUCED PROGRESSIVE DECREASING IN THE EXPRESSION OF REVERSE TRANSCRIPTASE GENE OF hEST2 AND TELOMERASE ACTIVITY

Objectites. In order to identify the relationship between telomerase and the biological effect of radiation injury, and investigate the role of human telomerase catalytic subunit gene (hEST2) reverse tranacriptase(RT) seg-ment in the expression of telomerase activity. Methods. Tumor FIeLa cells, KB cells and A431 cells were employed to measure the change in telomeraseactivity after 60Co-ray irradiation at RNA level and protein level. Quantitative PCR and Northern blotting wereused to determine the expression of bEST2 RT segment that encodes seven motifs of the human telomeres, a PCR-besed telomeric repeat amplification protocol (TRAP)was used to assay telomerase activity after exposure toradiation. Results. Both of telomerase activity and the expression hEST2 RT segment were decreased with increasingdosage of radiation. In addition, testing the expression of motifs domain is similar to the measurement of telomerase activity. Conclusion. The detection of the hEST2 BT segment by Northern blotting and quantitative PCR are new methods for testing Uflomerase activity. Furthermore, radiation can cause a dose-dependent decrease in telomerase activity. The effect of radiation on telomerase is one possible reason for the death of cancer ceils after irradiation.     

下消化道出血经回肠末端入路内镜检查18例

内镜是消化系疾病诊治的重要手段,不明原因的下消化道出血剖腹术中紧急内镜检查已成熟地应用于临床[1]。我院1993年以来对术前及术中未能确诊的下消化道出血18例,均采用经回肠末端入路紧急内镜检查,效果良好。1　资料和方法1.1　资料　18例中男12例,女6例;年龄17～68岁,平均43岁。全组患者术前均经胃镜检查排除上消化道病变;均经纤维结肠镜检查,除1例发现回肠末端多发性息肉外,余均未发现结肠病变。1.2　方法　常规剖腹,因肠腔积血等原因术中探查未能找到出血原因,即从回肠末端作一小切口,采用OlympusCF-30I纤维结肠镜(配合电视显像系统)…     

先天性肛门闭锁直肠舟状窝会阴瘘26例治疗体会

先天性肛门闭锁伴直肠舟状窝会阴瘘是小儿外科中常见的畸形之一,术后并发症如肛门狭窄、肛门失禁、瘘管复发颇为多见。我们自1994年～2002年共收治先天性肛门闭锁伴直肠舟状窝、会阴瘘患儿26例,均采用直肠末端旋转、倒“V-Y”肛门成形术,疗效满意。现报告如下。1临床资料1.1一般情况本组26例,舟状窝瘘16例,会阴瘘9例,阴唇瘘1例,均为中、低位瘘。年龄3d～4岁,其中2例伴有先天性心脏病(心脏彩超检查为室间隔缺损),1例为右位心。1.2手术方法全麻后取截石位,常规消毒后置“F-8”号导尿管。肛门隐窝两侧用7号丝线对称缝合两针,备作牵引线,正常…     

中风患者检测氨基末端脑钠肽前体的临床意义

目的 探讨中风患者氨基末端脑钠肽前体(Nt-pmBNP)检测的临床意义.方法 选择脑梗死患者212例、脑出血患者63例、健康体检者38例,分别检测血浆Nt-pmBNP的含量.结果 血浆Nt-proBNP的含量高于早期心力衰竭预警值的脑梗死患者有32例,阳性率15.1%;脑出血患者有8例,阳性率12.7%,与对照组比较差异有统计学意义.结论 中风患者检测Nt-proBNP对预防并发心力衰竭具有重要临床意义.     

端粒酶在宫颈癌诊断上的应用及常见问题

端粒酶在宫颈癌中有高比例的表达，因此可能是一个很好的肿瘤分子标记物，可用做官颈癌的辅助诊断。但在临床中用TRAP法检测端粒酶活性时，会由于各种原因而导致结果误差，如能够注意到这些问题，将提高端粒酶检测的正确性。     

核酶对食管癌EC9706细胞端粒酶活性及凋亡的影响

目的：观察针对人端粒酶RNA模板区的核酶对食管癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法：利用脂质体Lipofectamine介导，将已构建好的带有端粒酶核酶基因的重组质粒pBBS212Rz及空载质粒pBBS212转染食管癌EC9706细胞，采用TRAP—ELISA法检测端粒酶活性，用倒置相差显微镜及流式细胞仪观察细胞生长和凋亡情况。结果：重组质粒pBBS212Rz转染的食管癌EC9706细胞的端粒酶活性明显下降，细胞生长速度明显变慢，凋亡加速。结论：端粒酶核酶对食管癌细胞端粒酶活性和细胞生长有抑制作用，可望成为食管癌基因治疗的新方法。     

TELOMERASE ACTIVITY OF FIBROBRONCHOSCOPIC BRUSHING CELLS IN NON－SMALL CELL LUNG CANCER

Telomerase is a ribonucleoprotein enzyme that uses its own integral RNA as a template for synthesis of the telomeric DNA. The cells containing thisenzyme can escape from natural telomeric shortening and acquire infinite growth potentiality. Findings in recent studies showed that telomerase was activated in almost all malignant tumor tissues which suggests that the activation of telomerase is the critical procedure in oncogenesis. We studied telomerase activity in bronchial exfoliated cells f…     

肿瘤特异性凋亡基因对人黑素瘤细胞凋亡诱导作用的机制研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin gene)在诱导人黑素瘤细胞A375发生凋亡时，c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用，用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375；采用流式细胞仪、蛋白印迹法(Western blot)、锥虫蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间对人黑素瘤细胞A375诱导凋亡的作用。结果表明，apoptin基因瞬间转染的人黑素瘤细胞A375可出现明显的细胞凋亡；而且凋亡细胞的数量与apoptin的转染时间有关；凋亡细胞内磷酸化型JNK蛋白随凋亡细胞数量的增加而增多，而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论：JNK信号通路的活化可能在apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。