子宫颈癌组织中缺氧诱导因子1α蛋白的表达及其与血管生成的关系

缺氧诱导因子(hypoxia—inducible factor，HIF)1是在缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子，主要由两个亚单位HIF-1α和HIF-1β组成。近年来的研究表明，HIF-1α与肿瘤的发生、发展密切相关，而在正常组织则无表达。HIF—1α在肿瘤生长、血管形成中起重要作用。本研究检测宫颈癌组织中HIF-1α的表达，并分析其与微血管密度(MVD)的关系，旨在探讨HIF-1α在宫颈癌组织中的表达及其与血管生成的关系。     

缺氧缺血性脑损伤新生鼠环氧化酶2表达变化及其抑制剂NS398的抗氧化作用

环氧化酶(cyclooxygenase，COX)为一种膜结合蛋白，具有COX—1和COX—2两种异构体，其中COX—2为诱导型，参与了多种疾病的病理过程。本研究旨在通过检测新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑组织COX—2mRNA、蛋白的表达，并比较其抑制剂NS398对丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的影响，探讨COX—2及NS398在新生儿HIBD中的作用。     

妊高征患者胎盘组织血管紧张素Ⅱ 1型受体和血管紧张素原的表达

目的　探讨血管紧张素Ⅱ 1型受体 (angiotensinⅡtype 1receptor ,AT1R)和血管紧张素原 (angiotensinogen ,AGT)在妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘组织中表达的变化及其在妊高征发病中的意义。　方法　采用免疫组织化学染色法 (免疫组化 )和逆转录聚合酶链反应法 (RT PCR) ,检测 2 0例中、重度妊高征患者 (妊高征组 )和 15例正常妊娠妇女 (正常组 )的胎盘组织AT1R水平及AT1RmRNA和AGTmRNA的表达。　结果　 ( 1)AT1R主要定位于胎盘绒毛滋养细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞。 ( 2 )免疫组化定量灰度分析 ,妊高征组胎盘组织AT1R阳性表达( 112 .4 3± 11.75 )显著强于正常组 ( 170 .4 7± 10 .5 9) (P <0 .0 1)。 ( 3)妊高征组胎盘组织AT1RmRNA的表达水平 ( 0 .96± 0 .2 0 )高于正常组 ( 0 .5 6± 0 .14 ) (P <0 .0 1)。妊高征组胎盘组织AGTmRNA的表达水平 ( 1.0 8± 0 .2 2 )亦显著高于正常组 ( 0 .6 0± 0 .12 ) (P <0 .0 1)。　结论　在妊高征患者胎盘组织中 ,AT1R和AGT表达均有明显增加 ,说明胎盘组织局部肾素 血管紧张素系统与妊高征发病有相关性     

内毒素对新生大鼠肺组织金属基质蛋白酶2及其抑制因子2表达影响的研究

目的　探讨金属基质蛋白酶 2 (MMP 2 )和金属基质蛋白酶抑制因子 2 (TIMP 2 )蛋白及mRNA在内毒素 (LPS)致新生大鼠肺损伤中的作用。　方法　将新生 7日龄大鼠 88只随机分为八组 ,即生理盐水对照组 (对照组 ) ,LPS注射后 30min组 ,1h ,2h ,4h ,8h组 (每组 8只 ) ,16h组 (16只 ) ,2 4h组 (2 4只 ) ,其中 16h组死亡 8只 ,2 4h组死亡 17只。观察不同时间点存活大鼠肺组织大体、光镜和电镜下的病理改变 ,应用免疫组化和RT PCR方法分别检测肺组织MMP 2和TIMP 2蛋白及mRNA的表达改变。　结果　病理改变证实了新生大鼠肺出血的发生 ,对照组MMP 2mRNA和蛋白的表达相对值分别为 (0 .5 2 3± 0 .0 30 )和 (12 6 .2 0± 17.98) ;注射LPS后 4h和 8hMMP 2mR NA(0 .82 6± 0 .5 6 7)和MMP 2蛋白 (15 0 .77± 9.80 )表达达高峰 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。TIMP 2蛋白及mRNA的表达无明显改变。　结论　用LPS制备了新生大鼠肺出血的动物模型 ,肺组织MMP 2的降解作用明显增加 ,可能导致肺出血的发生。     

他莫昔芬相关的恶性子宫内膜肿瘤的病理学特征和ERα、β和PR表达：病例对照研究

与他莫昔芬(TAM)相关的子宫内膜恶性肿瘤(TAMET)的雌激素受体-β(ER-β)及雌激素受体-α(ER-α)表达分析，尚未见报道。抗雌激素复合物的ER-β曾有人报道可致激活蛋白-1(AP-1)途径的激活，结果致细胞增生和肿瘤生长。为测定TAMET病例的ER-α、ER-β及孕激素受体(PR)，并与TAM无关病例病理特点进行对照比较。     

应用医院信息网监控医院感染病例探讨

随着医院信息化管理的普及，规模较大的医院巳建立了局域网，采用了电子病历，这给医院感染控制工作带来了便利。我院于2002年建立了局域网，通过网络阅读电子病历来监控医院感染病例，收到了比较好的效果。现总结报告如下。     

淋球菌膜蛋白疫苗的研究

目的设计淋球菌膜蛋白疫苗并构建原核表达系统,测定表达蛋白的免疫活性.方法PCR扩增淋球菌膜蛋白(PIA)基因片段,构建重组质粒,重组质粒宿主菌经IPTG诱导,用SDS-PAGE分析PIA的表达情况.淋球菌标准株免疫BALB/c小鼠,体外凝集检测动物血清的免疫效果及ELISA法检测PIA的免疫活性.结果成功构建表达PIA蛋白的重组质粒,SDS-PAGE电泳图上显示1条相对分子量(Mr)约为40KDa的新生条带,能与免疫血清发生特异性结合反应.结论淋球菌膜蛋白疫苗原核表达系统的设计和构建正确,表达蛋白PIA具有免疫活性,为淋病疫苗的开发奠定了基础.     

我院医院感染现患率调查分析

目的了解某院医院感染现患率,发现医院感染管理中存在的问题和医院感染发生的特点,以改进预防控制措施.方法统一培训调查人员,床旁询问病史、体格检查与在架病历调查相结合,填写统一的个案调查表.对调查日处于医院感染状态的病例进行统计分析.结果应查病例512人,实查495人,实查率96.68%.发生医院感染40例,41例次,医院感染现患率为8.08%、例次现患率为8.28%,高于日常连续性调查结果.医院感染部位以下呼吸道居首位.结论医院感染现患率调查有利于发现医院感染管理工作中存在的问题,为制定医院感染监控措施提供可靠依据.     

人乳头瘤病毒重组质粒的构建及蛋白表达

目的 构建重组原核表达质粒获得人乳头瘤病毒18型L1片段(HPVl8LI)活性蛋白。为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础。方法 以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板，利用PCR方法扩增HPV18L1DNA片段。将HPV18L1DNA与质粒(pUC19)重组构建重组质粒(pUC19-HPV18L1)。用酶切电泳验证重组结果的正确性；并通过测序检查质粒重组后序列有无变化。再利用质粒(pQE32)做表达载体构建重组质粒(pQE32-HPV18L1)，并用酶切电泳验证。将重组质粒pQE32-HPV18L1转入工程菌(M15)。用酶切电泳验证重组工程菌(pQE32-HPV18L1／M15)正确性。利用SDS-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测HPV18L1目的蛋白。采用不同浓度异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)、不同诱导时间来优化HPV18L1目的蛋白表达条件。利用Western印迹检测蛋白质(Western blot)鉴定HPV18L1目的蛋白的特异性。结果PCR扩增DNA片段约为1．7Kb。与预期结果相同。克隆重组质粒pUC19-HPV18L1酶切后显示的酶切图谱与预期相同。而且测序验证插入片段全序列无改变。表达重组质粒pQE32-HPVl8L1酶切图谱亦与预期相同。蛋白表达条件优化结果为1mmol／LIPTG诱导4h后，获得HPV18L1最佳蛋白表达量：SDS-PAGE显示，约63KD处可见目的蛋白带，与预期结果一致。Westem blot鉴定，在约63KD处可见目的条带，与预期结果一致。结论 成功构建表达重组质粒pQE32-HPV18L1并能表达HPV18L1目的蛋白。     

镉应答癌基因蛋白对细胞原癌基因表达的影响

目的探讨镉应答癌基因蛋白(TEF-1δ编码蛋白)对多种不同细胞肿瘤相关基因表达的影响，以阐明镉的分子致癌机制。方法应用TEF-1δ基因真核细胞稳定表达系统和Western blot检测技术，用各种单克隆抗体检测细胞肿瘤相关基因蛋白的表达情况。结果相对于载体转染中国地鼠卵巢细胞(CHO)对照细胞，在4株具有高效稳定表达TEF-1δ编码蛋白质的CHO细胞系中均有细胞原癌基因C-fos高表达，其编码蛋白(55kDa)含量均明显高于对照组。同样，4株高效稳定表达TEF-1δ编码蛋白质的CHO系均具有相对较高的细胞周期调控基因Cyclln D1(编码蛋白36kDa)的表达。其余肿瘤相关基因蛋白如pan-ras，c-myc，c-jun，MDM2，ODC，p16，p53的表达在TEF-1δ转基因细胞与对照细胞之间未见明显差别。结论镉应答原癌基因TEF-1δ的超额表达可调高细胞原癌基因c-fos和细胞周期调控基因Cyclin Dl的表达，这可能是镉应答原癌基因TEF-1δ的分子致癌机制。