不同解冻液对冻融胚胎移植的影响

随着辅助生育技术的发展和完善,体外受精、胚胎移植(IVF-ET)技术已广泛用于临床,有40%以上IVF-ET患者有剩余胚胎冷冻[1]。由于胚胎冷冻技术日趋成熟,增加了患者一次取卵妊娠率。如何增加冷冻胚胎复活率,提高冻融胚胎的妊娠率,是生殖医学领域医师不断探索的课题。我们利用两种不     

自体颅骨瓣颅骨成形术的临床应用30例报告

为探讨自体颅骨瓣在颅骨缺损患者颅骨成形术中的应用，分析了30例颅骨缺损患者应用深低温保存自体颅骨瓣行颅骨成形术的临床资料。结果30例患者用自体颅骨骨瓣行颅骨成形术后均达临床痊愈。认为白体颅骨瓣修补颅骨缺损切实可靠，值得推广。     

器官保存研究的新进展

器官移植是20世纪人类医学科学的重大进展，自20世纪60年代开始在临床应用以来，移植医学得到了突飞猛进的发展。目前，全世界在肾脏、肝脏、心脏、胰腺和骨髓移植的领域的移植总数已超过70万例（次），存活最长的器官移植受者已近半个世纪。器官移植已经成为21世纪医学发展的主要方向之一，是治疗终末期器官衰竭唯一有效的根治手段。任何临床器官移植首先要有高质量的供体，这是器官移植成功的先决条件和根本保障，作为器官移植学三大支柱之一的器官保存曾经为此作出过重大的贡献，是器官移植学的基石。器官保存的根本目的是最大限度减少缺血对离体器官造成的各种损伤，使离体器官保存有效的活力，以便完成运送、配型和手术，使移植器官在手术后迅速恢复功能。离体器官大都采用单纯冷却灌洗保存，而机器持续灌注和深低温保存主要应用于研究，本文将重点对于单纯冷却灌洗保存方面研究新进展作一综述。     

First Babies from Cryopreserved Oocytes in Hungary

Embryo cryopreservation (CP) is a well established technique and it has been widely used for years with good results on the field of human assisted reproduction. Oocyte CP offers more advantages compared with embryo freezing with regarding ethical, legal …     

桔梗试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生

目的为桔梗Platycodongrandiflorum种质资源的保存提供一条新途径。方法采用玻璃化法研究了桔梗试管苗茎尖超低温保存及植株再生。结果桔梗嫩梢在培养基(MS 5%DMSO 103g/L蔗糖)上培养3d,切取2~3mm茎尖,室温(20℃)下装载液(60%PVS2)过渡20min,0℃下玻璃化液(PVS2)处理90min,投入液氮保存1d后,40℃水浴化冻,含410g/L蔗糖的MS培养基洗涤20min,接种于含0.6mg/LKT、0.2mg/LBA、0.05mg/LNAA的MS培养基表面的滤纸上,暗处理1d后转移到新鲜的上述再生培养基中,暗培养1周后转到正常光下,80%以上成活,植株生长正常。结论桔梗种质资源的玻璃化法超低温保存操作简单、成活率高、再生植株正常,可用于生产实践。     

人类成熟卵母细胞慢速程序化冷冻复苏后培养时间对纺锤体和染色体的影响

目的 研究慢速程序化冷冻人类成熟卵母细胞复苏后培养时间对纺锤体和染色体的影响.方法 慢速程序化冷冻人成熟卵母细胞102枚,选择复苏后外观存活良好的卵母细胞共64枚,随机分为A组20枚、B组22枚、C组22枚,分别培养不同时间(1、3、5 h)后进行固定、荧光染色;另取新鲜成熟卵母细胞18枚固定、染色作为对照组,采用激光共聚焦显微技术,观察并分析纺锤体和染色体的形态学变化.结果 (1)A、B、C 3组正常纺锤体比例分别为10%(2/20)、46%(10/22)、41%(9/22),均明显低于对照组(83%,15/18),差异均有统计学意义(P＜0.05);A组分别和B组、C组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).纺锤体缺失率A组为45%(9/20),明显高于对照组(6%,1/18),差异有统计学意义(P＜0.01);A组分别和B组(14%,3/20)、C组(14%,3/20)比较,差异也有统计学意义(P＜0.05);B、C组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)A组正常染色体比例为30%(6/20),与B组(68%,15/22)、C组(64%,14/22)和对照组(78%,14/18)比较均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);B、C、对照组之间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 慢速程序化冷冻复苏后培养3～5 h可以促进部分卵母细胞纺锤体和染色体形态的恢复.     

一种改良的二甲基亚硝胺肝纤维化模型诱导方法及其病理特点

目的采用不同的抗冷冻液对实验兔桑椹胚的超低温保存进行探索,以达到经济、有效保存实验兔资源的目的。方法选取三个方案进行实验。方案一:采用改良的EFS40(40%乙二醇 180ppm聚蔗糖(w/v) 0.3mol/L蔗糖PB1溶液)溶液mEFS40作为冷冻保护液,胚胎先在mEFS20溶液中平衡2min,然后移入mEFS40中平衡1min,再移入麦管中,麦管在液氮表面预冷却2min后投入液氮中保存。方案二:将冷冻液和平衡液分别替换为EFS40和EFS20,冷冻步骤同方案一。方案三:使用EFS40溶液作为抗冷冻液和平衡液,胚胎在EFS40中冲洗三遍,移入麦管中后将麦管投入液氮中冷冻保存。冷冻胚胎的复苏均采用25℃水浴加温,然后将胚胎置于0.5mol/L的蔗糖溶液中平衡,再转入PB1溶液中进行培养。结果三个不同方案的冷冻胚胎的复苏率分别为17.1%、69.6%和36.1%。结论采用EFS40作为冷冻保护液和EFS20作为平衡液(方案二)可有效保存实验兔胚胎。     

不同浓度保护剂对超速冻存小鼠卵巢组织的效果观察

目的:寻找适宜的小鼠卵巢组织超速冻存低温保护剂种类及浓度。方法:以不同浓度二甲亚砜(DMSO)和丙二醇(PROH)(1.5　mol/L、3　mol/L)作低温保护液时,观察超速冻存法对小鼠卵巢组织的冻存效果。解冻后行自体和异体卵巢的肾被膜下移植。通过对受体动情期的恢复及激素水平测定等方法对冻存效果进行观察。结果:低浓度组DMSO和PROH动情期的恢复率分别为75%和71%;血清E2分别为(10.5和16.8)×10-9　mmol/L,与作为对照的慢速程序法组无显著性差异(66.7%和100%;11.7×10-9　mmol/L和12.1×10-9　mmol/L)。高浓度动情期的恢复率分别为100%和62.5%;血清E2分别为14.1×10-9　mmol/L(DMSO)和7.4×10-9　mmol/L(PROH),与慢速组比也无显著性差异。结论:两种浓度的DMSO和PROH均适用于超速冻存法,尽管高浓度的DMSO在超速冻存时可取得较好的动情周期恢复率,但血清E2 水平的结果以低浓度的PROH为好。     

自体颅骨低温保存作颅骨缺损成形术19例

将自体颅骨经－１０℃～－１８℃低温何存后,行颅骨缺损修补术１９例。作颅骨成形术前１天取出经自然解冻后,重新移植。随访结果：１４例经Ｘ片或头颅ＣＴ检查证实,２个月内均见骨质稀疏吸收,４个月骨瓣周边缝隙变窄,１２个月见部分骨松质为骨质取代填充。此法因无排异反应和容貌无改变,易被患者接受,便于在无需特殊器材即可在基层医院推广。     

肝细胞的低温保存及应用研究进展

随着生物人工肝和肝细胞移植研究的开展，对肝细胞的需求不断增加，迫切需要有效的肝细胞长期保存方法以促进其在临床上的应用。低温保存是目前保存肝细胞的重要方法，其影响因素较多，主要有低温保存肝细胞的形式冻存液的组成、降温、复温速度，复苏肝细胞的功能检测及应用范围等。本对国内外该方面的最新进展进行踪述。