二甲基亚砜和右旋糖酐应用于脐血造血细胞的低温保存

探讨液氮保存中联合低温保护剂 (二甲基亚砜和右旋糖酐 )对造血细胞的保护作用和不同冻存时间对造血细胞活力的影响。同时分析脐血全血 4℃保存造血细胞的变化。通过测定冻存前后总有核细胞数 ( TNC)、细胞活率、造血祖细胞集落生成情况 ,反映冻存后造血细胞损失情况及增殖能力。结果显示 40例脐血冻存后细胞活率平均为 91 .5 % ,TNC、CFU- GM、BFU- E、CFU- GEMM平均回收率为 95 .0 %、86 .7%、81 .8%、84.4%。不同保存时间细胞仍保持较高细胞活率和祖细胞产率 ,48小时细胞活率和祖细胞产率有明显下降。二甲基亚砜 ( DMSO)与右旋糖酐 ( Dextran)组成的联合保护剂对造血细胞有良好保护作用 ,适用于造血细胞的长期低温保存。长期冻存造血细胞的效果与冻存时间无密切关系。全血 4℃保存应在 2 4小时分离冻存。     

低温保存条件下人肝细胞钙超载途径的研究

细胞内钙超载是导致细胞缺血再灌注损伤的主要原因,对人肝细胞低温保存下钙超载途径的研究报道不多,现有的研究中,对钙超载的途径尚无统一认识。本实验针对这一问题进行了探讨。一、材料和方法1.成人肝细胞的分离和培养:临床行同种异体肾移植时,联合切取肝脏,以4℃ＵＷ液保存。切取灌洗较好的肝叶组织于培养皿中,用剪刀将组织剪碎,收集于锥形瓶中,加入胶原酶10ｍｌ,37℃水浴消化。取出细胞悬液,400μｍ滤网过滤,滤液吹打后加入红细胞裂解液3ｍｌ,1000ｒ/ｍｉｎ离心10ｍｉｎ,弃上清液,加入保存液10ｍｌ,吹打均匀,37℃孵箱保存。取1ｍｌ细胞悬…     

循环温差法测定生物组织活性的实验研究

如何测定低温损伤后的生物材料活性是低温保存和低温医疗领域中的重要课题.本文提出了循环温差法测定生物组织活性的新方法,并进行了初步的实验研究,给出了定量评价生物组织活性的数学关联式.实验证明,该方法所采用的测试装置简单,易于操作,结果稳定可靠,重复性较好.本文最后指出了进一步的改进方法.     

低温保存对生物样本及其生物大分子的影响

生物样本库在现代医学研究中的作用日趋重要,基于生物样本库的研究成果层出不穷,极大地推动转化医学的发展。生物样本库中样本保存的质量对研究结果的可靠性有较大影响,如何保存高质量的样本是生物样本库研究的关键问题之一。低温保存技术可以保持样本的活性,若将其用于生物样本库,不仅能够保存样本完整的分子信息,还能保持样本的活性,对生物样本库的发展具有里程碑式的意义。综述低温保存方法对样本的损伤(尤其是生物大分子的损伤)以及减小这些损伤的技术与方法,为提高生物样本的保存质量提供指导性建议。     

激素替代冻融胚胎移植第6天血清孕酮与临床结局的关系

目的：探讨在激素替代冻融胚胎移植（FET）周期中,移植第6天血清孕酮与FET临床结局的关系。方法：回顾性分析行激素替代FET 261个周期的临床资料。依据移植第6天血清孕酮水平分组,A组（孕酮＜20 μg/L）,B组（20 μg/L≤孕酮＜30 μg/L）,C组（孕酮≥30 μg/L）,比较各组临床特征、妊娠率及流产率的差异。同时根据FET临床结局分为D组：宫内活胎组,E组：妊娠结局不良组,F组：未妊娠组,比较各组移植第6天血清雌激素、孕激素水平的差异。结果：C组妊娠率（50%）明显高于B组妊娠率（28.5%）,B组妊娠率高于A组妊娠率（11.1%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;A组流产率（60%）高于C组（18%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;移植第6天血清孕酮水平D组和E组高于F组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：在激素替代FET周期中移植第6天血清孕酮水平对FET临床结局有一定的预测性,血清孕酮值越高妊娠结局越好,且流产率更低。     

冻融胚胎移植98周期结果分析

目的分析冻融胚胎移植后结局,探索提高冻融胚胎移植妊娠率的方法。方法采用慢速冷冻-快速融冻方法行胚胎移植,子宫内膜的准备分自然排卵周期及激素替代周期,移植前融胚过程分为辅助孵化组和未辅助孵化组,对移植融胚的妊娠结局进行分析。结果冻融胚胎移植98周期,妊娠率24.5%。自然周期与激素替代周期比较妊娠率无统计学意义,流产率亦无统计学意义。辅助孵化组与对照组相比妊娠率有差异,流产率相比无显著差异。结论自然周期与激素替代周期作为冻融胚胎移植前子宫内膜的准备可获得相近的妊娠率。应用激光辅助孵化技术可提高冻融胚胎移植妊娠率。     

卵母细胞深低温保存的策略分析

背景：卵母细胞具有特殊而复杂的低温生物学性质,致使卵母细胞在深低温保存中易受到多因素的损伤而影响复温后的存活率、受精率和受精后发育潜能。 目的：综述卵母细胞深低温保存技术的研究进展,阐明存在的技术缺陷以及解决问题的思路与研究路线。 方法：以“卵母细胞,深低温保存/慢速冷冻,玻璃化”为中文捡索词,以“oocyte, cryopreservation/slow freezing, vitrification”为英文检索词,在中国知网(CNKI)期刊全文数据库和PubMed数据库检索2004 年1月至2014年10月有关卵母细胞深低温保存文献,排除陈旧性、重复性研究,最终纳入41篇文献进行综述。 结果与结论：慢速冷冻、玻璃化方法深低温保存卵母细胞得到较好的临床应用,但复温存活率、受精能力、发育能力损伤等仍困扰医生们。卵母细胞深低温保存技术的进一步完善或突破在于对深低温保存技术环节的细化、卵母细胞低温生物学特性的研究以及相关技术的创新,如深低温保护剂选择、冷冻载体的改进、卵母细胞时相选择、卵母细胞体外成熟技术、卵巢组织保存与移植等。     

卵巢移植的研究进展

近年癌症患者治疗后生存率显著提高,但大剂量的抗癌药物治疗常对女性卵巢的结构、功能产生严重甚至不可逆损害,造成卵巢早衰及相关不孕。卵巢移植技术为失去卵巢功能的患者提供了新的恢复生殖功能和内分泌功能的方法。根据近几年国外对卵巢移植的相关研究,简要综述卵巢移植的分类、移植部位的血管重建及肿瘤再种植的风险,并展望其发展前景。