白细胞介素4和干扰素γ及转化生长因子β_1在支气管哮喘发病机制中的研究进展

支气管哮喘是由多种细胞和细胞因子参与的肺部慢性炎症性疾病,其发病机制尚未完全清楚。现在认为Th1/Th2比例和功能失衡是支气管哮喘的主要免疫学发病机制之一,其中白细胞介素4和干扰素γ在支气管哮喘的发病过程中起着重要作用,并与哮喘的严重程度相关。呼吸道重构是支气管哮喘的重要病理特征之一,是呼吸道炎症反复损伤和修复的结果,转化生长因子β1通过多种途径参与支气管哮喘呼吸道炎症和呼吸道重构。     

硬膜外阻滞对老年腹腔镜胃癌根治术患者围术期Th1/TH2平衡的影响

目的 研究硬膜外阻滞对腹腔镜胃癌根治术老年患者围术期Th1/Th2平衡的影响.方法 对60例择期行腹腔镜胃癌根治术老年患者采用随机数字表法分为硬膜外阻滞组(Ⅰ组)和对照组(Ⅱ组),每组30例.麻醉诱导前行T8-9间隙行硬膜外穿刺置管.Ⅰ组切皮前约30min时硬膜外腔注射0.25％罗哌卡因+0.04mg/ml布托啡诺混合液10ml.Ⅱ组给予等量0.9％氯化钠溶液.两组患者均在术毕硬膜外腔注射0.25％罗哌卡因+0.04mg/ml布托啡诺混合液10ml后接PCEA泵.于硬膜外穿刺前(T0)、术前(T1)、术毕(T2)、术后24h(T3)和72 h(T4)抽取外周血,采用放射免疫法检测血浆皮质醇(Cor)水平,采用ELISA法测定血浆干扰素(IFN)-γ、IL-4水平.结果 与T0时比较,Ⅱ组T2、T3时Cor水平升高,Ⅰ组仅在T2时升高(P＜0.05).与Ⅱ组比较,Ⅰ组T2、T3时Cor水平明显降低(P＜0 05).与T0比较,两组T2、T3、T4时IFN-γ水平明显上升(P＜0.05).Ⅰ组T2、T3时IFN-γ水平明显高于Ⅱ组(P＜0.05).Ⅰ组T3时IL-4水平低于T0 (P＜0.05).与Ⅱ组比较,Ⅰ组T4时IL-4水平明显降低(P＜0.05).与T0时比较,两组T2、T3、T4时IFN-γ/IL-4均升高(P＜0.05);Ⅰ组T3时IFN-γ/IL-4明显高于Ⅱ组(P＜0.05).结论 硬膜外阻滞能减轻腹腔镜胃癌根治术老年患者手术后Th1/Th2平衡的漂移程度,改善机体手术创伤后免疫受抑状态.     

硫化氢对动脉粥样硬化的影响及其与 CX3CR1 的关系

目的在高脂饮食ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型中,探讨硫化氢对动脉粥样硬化斑块的影响及其与斑块内趋化因子受体CX3CR1的关系。方法10周龄、雄性纯合子ApoE基因敲除小鼠予以高脂饮食喂养,在高脂饮食喂养第4、8、12、24周时处死小鼠并留取血浆和主动脉,通过化学比色法和Western Blot技术检测血浆硫化氢水平和主动脉胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）表达情况。一部分小鼠在高脂饮食4或12周后开始每天予以硫化氢供体药物NaHS（1mg-kg^-1,i．P．）或生理盐水。高脂饮食24周后,通过超声生物显微镜成像技术评估小鼠主动脉及其主要分支内的动脉粥样硬化情况,随后处死小鼠并留取主动脉,通过H＆E染色和免疫组化技术进一步观察小鼠头臂干动脉粥样斑块的病变情况及CX3CR1的表达水平。结果在动脉粥样硬化斑块形成早期,即出现了CSE表达水平的显著降低,随着斑块的进展,CSE的表达水平进一步下调和CSE活性明显下降,最终导致血浆硫化氢水平的显著降低。动脉粥样硬化早期或中晚期予以NariS均可显著延缓动脉粥样硬化斑块的形成和进展,但是NaHS早期干预,其抗动脉粥样化的益处显著优于中晚期干预。NariS的抗动脉粥样硬化益处可能与其抑制斑块内CX3CR1的表达有关。结论动脉粥样硬化过程中存在着内源性硫化氢代谢紊乱,予以NaHS干预可抑制斑块内CX3CR1的表达和延缓动脉粥样硬化的进展,早期NaHS干预的疗效显著优于中晚期干预。     

The effect of pharmacological PI3Kγ inhibitor on eotaxin-induced human eosinophil functions

BackgroundAsthma is characterized by chronic inflammation caused by activation of immune cells including Th2 lymphocytes and eosinophils. Phosphoinositide 3-kinase (PI3K) γ deficient asthmatic mice did not develop lung eosinophilia, although the detailed mechanisms are not well known. A CC chemokine eotaxin (CCL11) plays a prominent role in developing eosinophilic inflammation through CCR3. In this study, we tested the roles of PI3Kγ in eotaxin-induced eosinophil functions using a pharmacological inhibitor.MethodHuman peripheral blood eosinophils were isolated by CD16-negative selection method. The effect of AS605240, synthetic PI3Kγ inhibitor on eotaxin-induced adhesion, chemotaxis, and degranulation were studied using intracellular adhesion molecule-1 (ICAM-1)-coated plates, Boyden chamber system, ELISA for eosinophil-derived neurotoxin (EDN) levels in the culture supernatant, respectively. CCR3 expression levels and extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) phosphorylation were assessed by flowcytometry. Involvement of PI3Kγ in spontaneous apoptosis was studied using flowcytometry.ResultsAlthough AS605240 did not affect the eosinophil spontaneous apoptosis, eotaxin-induced chemotaxis, adhesion to ICAM-1 coated plate, and EDN release were inhibited by AS605240. AS605240 also inhibited the eotaxin-induced ERK1/2 phosphorylation without down-regulation of surface CCR3 expression.ConclusionThese results indicate that PI3Kγ inhibitor attenuates eotaxin-induced eosinophil functions by suppressing the downstream signaling of CCR3 without significant cytotoxicity. PI3Kγ plays an important role in the development of eosinophilic inflammation and blockade of PI3Kγ might be a therapeutic strategy for treatment of eosinophil-related diseases including asthma.     

一氧化氮对胎兔动脉导管胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢体系的影响

目的探讨H2S、NO对早产胎兔动脉导管的作用及其相互影响,进一步探索动脉导管开放与关闭的病理生理机制、意义及其影响因素,为临床上全面认识动脉导管的开放与关闭提供理论依据。方法将孕21d日本大耳白兔24只随机分成四组：空白对照组及三个处理组,处理组待孕龄23d和25d时分别腹腔注射以不同剂量的一氧化氮前体-硝普钠,待孕龄26d时解剖孕兔取胎兔,胎兔心脏取血1mL后立即解剖胎兔取动脉导管组织,进行实验。结果随着注射硝普钠浓度的增加,胎兔血浆中硫化氢含量、动脉导管组织CSEmRNA表达量均逐渐随注射剂量的增加而增加。各组间相比较,P<0.01,具有显著性差异。结论早产兔血浆中有H2S存在,早产兔动脉导管组织中存在CSEmRNA表达;给孕兔注射不同剂量硝普钠(在一定范围内)对早产兔动脉导管中H2S/CSE体系具有浓度依赖性促进作用。     

健康体检者空腹血糖、胰岛素抵抗与血清谷氨酰转肽酶水平的相关性研究

目的 探讨健康体检者血清谷氨酰转肽酶（γ-GT）与FPG、IR间的关系. 方法 纳入793名健康体检者,根据FPG中位数5.42 mmol/L与胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）中位数2.04,分为高FPG（HF）组和正常FPG（NF）组,IR组和IS组,比较各组γ-GT水平. 结果 HF、IR组γ-GT水平均高于NF、IS组（P＜0.01）.Spearman相关分析显示,γ-GT与FPG、FIns及HOMA-IR呈正相关.Logistic回归分析结果显示,FPG（OR=1.615,95％CI：1.208～2.158）、TG（OR=4.104,95％CI：2.650～6.357）、FIns（OR=2.866,95％CI：1.114～7.372）及饮酒情况（OR=3.068,95％CI：1.935～4.864）是γ-GT水平升高的危险因素. 结论 FPG、FIns与血清γ-GT水平相关,γ-GT可能成为T2DM发生风险的预测因素.     

胆汁酸通过p-STAT3-SOCS3途径调节下丘脑神经元食欲及抑制信号肽表达

目的 探索胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸对小鼠下丘脑GT1-7细胞食欲抑制信号肽表达的影响及可能的作用途径。方法 将实验分为3组,每组3个平行样本。空白对照组：仅给予含10%胎牛血清高糖培养基培养GT1-7细胞。胆汁酸牛磺石胆酸处理组：分别采用10 nmol/L,100 nmol/L,1 μmol/L和10 μmol/L浓度的胆汁酸牛磺石胆酸处理GT1-7细胞12、24和48 h。鹅去氧胆酸处理组：分别采用10 nmol/L,100 nmol/L,1 μmol/L和10 μmol/L浓度的鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞12、24和48 h。采用Real-time PCR 检测GT1-7细胞食欲抑制信号肽阿黑皮素原（POMC）mRNA表达水平;ELISA法检测POMC剪切产物抑制食欲肽α-促黑素细胞激素水平。采用Western blot检测G蛋白偶联胆汁酸受体（TGR5）和法呢醇X受体表达以及磷酸化信号转导转录激活因子3（p-STAT3）,磷酸化蛋白激酶（p-AKT）,细胞因子信号传导抑制因子3（SOCS3）蛋白表达量。结果 Western blot结果显示,下丘脑神经元GT1-7细胞能表达TGR5和FXR两种胆汁酸受体,且表达量受胆汁酸调节。Real-time PCR检测结果显示,10 μmol/L tLCA或鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞24 h后POMC mRNA表达水平上升,ElISA结果也发现10 μmol/L 胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞24 h后具有抑制食欲作用的POMC衍生肽[α]-MSH释放增多。Western blot结果显示,胆汁酸处理可上调GT1-7细胞p-STAT3和p-AKT蛋白表达,且调控STAT3信号通路的SOCS3蛋白表达也有增加。结论 胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸通过GT1-7细胞胆汁酸受体TGR5和FXR促进POMC mRNA表达,增加[α]-促黑素细胞激素水平,提示胆汁酸具有通过抑制食欲信号肽表达调节食欲的潜在作用,该作用是通过p-AKT和p-STAT3 -SOCS3 信号通路实现。