绞股蓝皂苷对原代培养胚鼠中脑多巴胺能神经细胞的保护作用

目的 探讨绞股蓝皂苷(GPs)对原代培养的胚鼠中脑多巴胺(DA)能神经细胞的保护作用. 方法原代培养胎鼠中脑腹侧神经细胞,分别应用100、200、400、800μg/mL GPs作用6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h,同时设空白对照组和阳性对照(NGF)组,应用MTT比色试验检测GPs对细胞活性的影响,筛选GPs的最佳作用浓度和时间.免疫细胞化学染色检测抗酪氨酸羟化酶(TH)的表达;应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导细胞损伤,同时设空白对照组和GPs预处理组,应用免疫细胞化学染色和流式细胞仪分别检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和细胞凋亡.结果 MTT检测结果显示400μg/mL GPs作用48h后细胞活性最高,与NGF组比较差异无统计学意义(P>0.05).TH免疫染色显示400μg/mL GPs组和NGF组TH阳性细胞数均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);iNOS免疫染色和流式细胞仪检测显示400 μg/mL GPs预处理组iNOS阳性细胞数和细胞凋亡率高于空白对照组,但仍低于MPTP组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 400μg/mL GPs作用48 h对MPTP诱导的DA能神经细胞的损伤具有保护作用.     

绞股蓝总皂甙在沙门菌试验中的抗诱变作用

以阿地平（ＡＢ），柔红霉素（ＤＮ）．迭氨化钠（ＳＡ），丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）分别作为沙门诱变菌株ＴＡ９７、ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１０２的诱变因子．以回变菌落数下降为指标。观察绞股蓝总皂甙（ＧＰ）的抗诱变作用。实验结果显示ＧＰ能拮抗以上４种诱变因子的诱变作用，并有剂量─效应关系。     

绞股蓝总皂苷纳米乳的制备及其抗衰老作用研究

目的:研究绞股蓝总皂苷纳米乳的制备及其抗衰老作用。方法:通过对绞股蓝总皂苷溶解度试验和伪三元相图确定其最佳处方并制备出绞股蓝总皂苷纳米乳,用透射电镜和粒度分析仪分析其形态和对粒径进行鉴定。以皮下注射D-半乳糖复制亚急性衰老大鼠模型。30只SD大鼠均分为6组,即正常对照(2mL生理盐水)、亚急性衰老模型(2mL生理盐水)、绞股蓝水溶液(120mg.kg-1)和绞股蓝总皂苷纳米乳高、中、低剂量(180、120、60mg.kg-1)组;25只老年大鼠均分为5组,即自然衰老模型(2mL生理盐水)、绞股蓝水溶液(120mg.kg-1)和绞股蓝纳米乳高、中、低剂量(180、120、60mg.kg-1)组。灌胃给药,每天1次,连续30d。检测大鼠血清、下丘脑和心脏的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果:绞股蓝总皂苷纳米乳最佳处方为聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40)/肉豆蔻酸异丙酮(IPM)/丙二醇/水,表面活性剂和助活性剂比例为3:1,平均粒径为35.8nm。与亚急性衰老模型和自然衰老模型组比较,绞股蓝总皂苷纳米乳高、中、低剂量组大鼠血清、心脏和下丘脑组织中的SOD、CAT、T-AOC、GSH-Px水平显著升高(P<0.05),而NO、MDA含量显著减少(P<0.05)。结论:绞股蓝总皂苷纳米乳有较好的抗衰老作用,且呈剂量依赖关系。     

绞股蓝总皂甙对肝脏四氯化碳损伤保护作用的实验研究

给慢性四氯化碳（ＣＣ１＿４）肝损害小鼠灌喂绞股蓝总皂甙（ＧＰｓ），剂量为每次７５ｍｇ／ｋｇ或１５０ｍｇ／ｋｇ（每周５次，共３周），均能明显减轻肝组织损害，与未治疗组比较差异有显著意义（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）。用ＧＰｓ治疗的两组小鼠血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）活性均较未治疗组降低，血清白蛋白含量和Ａ／Ｇ比值较未治疗组升高。在原代培养大鼠肝细胞损伤模型上，预先用浓度为１０ｍｇ／Ｌ和４０ｍｇ／Ｌ的ＧＰｓ处理大鼠肝细胞，肝细胞ＤＮＡ合成速率分别从ＣＣ１＿４损伤组的３１．９％升高到６７．６％（Ｐ＜０．０５）和８２．４％（Ｐ＜０．０１）；肝细胞培养液中ＡＬＴ活性均明显低于损伤组（Ｐ＜０．０１）。表明ＧＰｓ能减轻ＣＣ１＿４诱导的小鼠慢性肝损害和离体大鼠肝细胞损伤，改善肝脏合成白蛋白的功能，保护肝细胞ＤＮＡ合成。     

绞股蓝总苷对局灶性脑梗死大鼠脑梗死面积、神经功能及ROCK-1和ROCK-2表达的影响

目的：探讨分析绞股蓝总苷对局灶性脑梗死大鼠脑梗死面积、神经功能及ROCK-1和ROCK-2表达的影响。方法：将SD大鼠随机分为模型组、假手术组和绞股蓝总苷组,每组40只,在复制模型术后的第2 h,3 d,7 d对其神经功能进行评价,在首次给药后2 h和7 d,从每组随机选取5只大鼠进行TTC染色,计算其梗死面积,另取5只对其大脑的干湿重比进行计算。在术后第4,5 w末通过Westernbolt对大鼠的ROCK-1和ROCK-2蛋白的表达进行观测。结果：模型大鼠在脑缺血后出现神经功能的障碍、大面积的脑梗死以及组织水肿,在7 d治疗之后,绞股蓝总苷组大鼠的神经功能得到改善,脑梗死面积减少,脑组织的水肿减轻,相比于模型组,差异显著（P〈0.05）。模型组大鼠的ROCK-1和ROCK-2蛋白表达在术后第4 w末显著低于假手术组大鼠（P〈0.05）,而在第5 w末,二者间差异已无统计学意义。绞股蓝总苷组大鼠的ROCK-1和ROCK-2蛋白表达于第4、5w末均显著低于模型组和假手术组（P〈0.01）。结论：绞股蓝总苷可以使局灶性脑梗死大鼠的神经功能得到改善,梗死面积和脑组织水肿得以减少,ROCK-1和ROCK-2的表达得到抑制。     

绞股蓝总甙调控mTOR/ULK1通路对ApoE－/－小鼠动脉粥样硬化的影响

目的基于mTOR/ULK1自噬信号通路探讨绞股蓝总甙改善动脉粥样硬化模型小鼠主动脉脂质沉积的作用机制。方法 30只健康ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型对照组、绞股蓝总甙组和辛伐他汀组,每组10只。10只C57BL/6J小鼠作为正常组。模型对照组、绞股蓝总甙组和辛伐他汀组采用高脂饲料喂养4周,绞股蓝总甙组和辛伐他汀组分别采用绞股蓝总甙2.973 g/(kg·d)、辛伐他汀2.275 mg/(kg·d)灌胃8周,模型对照组、正常组予等量生理盐水灌胃。HE染色观察小鼠动脉粥样硬化斑块形成情况,全自动生化分析仪检测血脂水平,Western blot检测主动脉ULK1、Beclin1、LC3、p-mTOR的蛋白表达。结果与正常组相比,模型对照组TG、TC和LDLC水平升高(P0.05),HDLC水平降低(P0.05),主动脉管腔见较大粥样斑块,ULK1、Beclin1、LC3蛋白表达水平下调(P0.01),pmTOR蛋白表达水平上调(P0.01);与模型对照组相比,绞股蓝总甙组和辛伐他汀组TG、TC和LDLC水平降低(P0.05),HDLC水平升高(P0.05),主动脉管腔粥样斑块明显减少,ULK1、Beclin1、LC3蛋白表达水平上调(P0.01),p-mTOR蛋白表达水平呈下调趋势(P0.01或P0.05)。结论绞股蓝总甙可能通过调控自噬缓解动脉粥样硬化斑块形成,进而防治动脉粥样硬化。     

绞股蓝总皂甙对血小板聚集和血栓形成的影响

研究了绞股蓝总皂甙(Gypenosides,GP)灌服给药对血小板聚集和血栓形成的影响。结果发现GP(50mg/kg,100mg/kg,ig)对二磷酸腺甙(ADP)、花生四烯酸(AA)及胶原诱导的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用;体外实验表明GP(FC100μg/ml,20μg/ml)对血小板活化因子(PAF)诱导的家兔血小板聚集有明显的抑制作用。GP(100mg/kg,200mg/kg,ig)对大鼠实验性脑血栓、体外动脉血栓及小鼠肺血栓的形成均有明显的抑制作用。并呈剂量依赖关系。找示绞股蓝总皂甙为一血小板功能抑制剂。     

绞股兰皂甙对庆大霉素所致大鼠急性肾功衰的保护作用

为研究绞股兰皂甙对庆大霉素所致的急性肾功能衰竭的保护作用，用Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只随机分为３组：庆大霉素组、绞股兰皂甙保护组和正常对照组，每组１０只观察肾功能和形态学变化，同时测定血清超氧化物歧化酶和血清丙二醛含量结果显示：绞股兰皂甙保护组血清ＢＵＮ，Ｃｒ和Ｕｒ较庆大霉素组明显改善，肾组织病理形态学改变明显减轻结果提示绞股兰皂甙对庆大霉素所致的急性肾功能衰竭有明显保护作用