一组抗人T淋巴细胞表面抗原单克隆抗体的制备及鉴定

用鼠细胞融合杂交瘤技术,获得3株分泌抗人T淋巴细胞表面抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为SMU_1、SMU_2、SMU_3,为IgG_1类,不与补体结合。间接免疫荧光法表明,SMU_1、SMU_3分别与50.3±6.42%和51.5±6.37%的周血单个核细胞反应,SMU_2与68.89±9.92%的周血半个核细胞及74.68±8.08%的成熟粒细胞反应,3株单抗的分子量为54～62kD(未还原)。调变试验及竞争抑制试验表明SMU_1、SMU_3与WuT_3识别相同的抗原分子,但为不同的表位。SMU_2为一非系限性单抗。本组单抗对研究T淋巴细胞分化及临床白血病免疫分型是有意义的。     

血清CEA测定及免疫显像诊断卵巢癌的研究

对19例卵巢肿瘤患者进行了术前血清CEA测定和~(131)I-CEA单克隆抗体免疫显像,使用γ-闪烁显像辅以微机图像处理技术获得较好效果。19例均经手术病理证实。12例卵巢癌术后复发病人7例血清CEA>0.15mg/L,11例免疫显像阳性,1例假阴性。7例卵巢良性肿瘤1例血清CEA>0.15mg/L,免疫显像均为阴性。免疫显像在发现转移灶的同时亦可直接显示病灶的位置,形态,大小与数量。     

Autoantibodies to Human Tissue Transglutaminase: Superior Predictors of Coeliac Disease

Background: Using selected sample populations, we compared sensitivity and specificity of autoantibodies to guinea pig and human tissue transglutaminase to assess if the human antigen is superior for predicting coeliac disease. Methods: Four commercial enzyme-linked immunoassay kits using human tissue transglutaminase as antigen were used to measure autoantibody levels in serum samples from untreated adult coeliacs ( n = 32). They were from a series of 130 cases diagnosed between 1997 and 1999 and chosen to bias the group towards subjects with negative autoantibodies when measured with guinea pig tissue transglutaminase as antigen. Samples from 38 control subjects (biased towards false-positive levels with guinea pig antigen) were used to compare specificity. We also assessed if human antigen kits could differentiate between levels in normal subjects and in selective IgA deficiency. Results: Sensitivity for coeliac disease in this selected group using the human antigen kits ranged from 88% to 100%. Three kits showed significantly higher specificity (82%-97%, P < 0.05) than the guinea pig antigen kit (71%) for the samples studied. No kit achieved complete separation between normal autoantibody levels and lower levels in selective IgA deficiency. Conclusions: All human antigen kits showed significantly higher sensitivity for coeliac disease compared to guinea pig antigen ( P < 0.001). Receiver operating characteristic curves confirmed the superior diagnostic accuracy of the human antigen kits.     

肿瘤浸润性淋巴细胞结合偶联半乳糖抗CD3单克隆抗体的肝脏靶向性研究

目的　探讨结合偶联半乳糖（ Ｇａｌａｃｔｏｓｅ , Ｇａｌ） 抗 Ｃ Ｄ３ 单克隆抗体（ Ａｎｔｉ Ｃ Ｄ３ Ｍｃ Ａｂ） 肿瘤浸润性淋巴细胞（ Ｔｕｍｏｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ , Ｔ Ｉ Ｌ） 肝脏靶向性。 方法　本组把大鼠抗小鼠 Ｃ Ｄ 单克隆抗体和半乳糖偶联在一起,与３ Ｈ Ｔｄ Ｒ 标记 Ｔ Ｉ Ｌ结合后,从鼠尾静脉注入小鼠体内,在注射不同时间眼眶取血０５ ｍｌ,然后处死,切除肝、脾、肺,分别称重后进行放射性强度测定。 结果　结果显示：注射 Ｇａｌａｎｔｉ Ｃ Ｄ３ Ｍｃ Ａｂ Ｔ Ｉ Ｌ小鼠肝脏比注射单纯 Ｔ Ｉ Ｌ 的小鼠肝脏具有较高的放射性（ Ｐ＜ ００１） ,且该放射性持续较长一段时间,而脾、肺、血液内放射性强度差异无显著意义（ Ｐ＞ ００５ , Ｐ＞ ００５ , Ｐ＞ ００５） 。结论　该结果提示： Ｇａｌａｎｔｉ Ｃ Ｄ３ Ｍｃ Ａｂ Ｔ Ｉ Ｌ较单纯 Ｔ Ｉ Ｌ具有更好的肝脏靶向性。     

骨巨细胞瘤GCF－5抗原的cDNA克隆化及其在大肠杆菌中的表达

目的 ＧＣＦ－５是骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）特异性单抗,其抗原是了解ＧＣＴ特性的途径之一。为了利用这一途径,对ＧＣＦ－５抗原的ｃＤＮＡ进行了克隆及表达。方法 盐酸胍和有机溶剂法提取总ＲＮＡ,Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ亲和层析法分离ｍＲＮＡ,反转录合成ｃＤＮＡ,用λｇｔ１１Ｓｆｉ－Ｎｏｔ表达载体构建ｃＤＮＡ文库,免疫学筛选并克隆ＧＣＦ－５抗原的ｃＤＮＡ,大肠杆菌Ｙ１０８９表达含ＧＣＦ－５抗原的     

抗结核分枝杆菌培养滤液蛋白10的新型单克隆抗体的制备及其临床应用

目的 制备抗结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP-10)特定抗原肽的单克隆抗体,为建立结核病临床早期诊断的免疫学方法奠定物质基础.方法 设计并合成结核分枝杆菌CFP-10第53 ～ 66位氨基酸(14肽AAVVRFQEAANKQK)作为特定的抗原肽序列,经免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测、多次有限稀释亚克隆建立能稳定分泌抗结核分枝杆菌特异抗原肽单克隆抗体的杂交瘤细胞系,纯化该单克隆抗体,进行免疫球蛋白亚型分析,并鉴定分析该单克隆抗体在蛋白质免疫印迹法(Western blotting)、免疫沉淀法和ELISA检测中的应用效果.共检测结核分枝杆菌培养上清样本38份,非结核分枝杆菌培养上清样本20份,结核性胸水样本32份,非结核性胸水样本24份以及健康对照血清样本20份.结果 单克隆抗体免疫球蛋白亚型分析显示该杂交瘤细胞系产生的抗体类型为IgG1和κ型.该抗结核分枝杆菌CFP-10特异性单克隆抗体可成功用于Western blotting和免疫沉淀法分析.ELISA定量检测显示,该特异性抗体检测结核分枝杆菌的敏感性为78.6％ (55/70),特异性为92.2％ (59/64).结论 CFP-10特定抗原肽单克隆抗体用于结核分枝杆菌检测有较高的敏感性和特异性,可用于结核病的早期诊断.     

达利珠单抗预防致敏受者肾移植后排斥反应的临床研究

目的　探讨用达利珠单抗诱导治疗预防致敏受者肾移植后急性排斥反应的有效性与安全性。方法　将 36例群体反应性抗体为 30 %～ 5 0 %的致敏受者随机分为舒莱组和对照组 ,各 18例 ,舒莱组患者于移植术前 2h和术后第 4d接受达利珠单抗 (2 0mg/次 )诱导治疗 ,两个组术后均以环孢素A、霉酚酸酯和皮质激素预防排斥反应。结果　舒莱组术后 3个月内的急性排斥反应发生率明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;术后 2～ 4周内对照组平均每日皮质激素用量明显高于舒莱组 ;两个组人 /肾 1年存活率的差异无显著性 ;舒莱组术后肾功能的恢复较对照组快 ,但差异无显著性 ;舒莱组术后1周内CD2 5 淋巴细胞数明显降低 (P <0 .0 1) ;未观察到达利珠单抗的相关不良反应。结论　在合理筛选供受者的基础上 ,致敏受者肾移植前接受达利珠单抗诱导治疗可降低术后急性排斥反应的发生率 ,且较为安全。     

Beyond C4d: Other Complement-Related Diagnostic Approaches to Antibody-Mediated Rejection

Complement is a multifunctional system of receptors and regulators as well as effector molecules. Both the pathogenic and diagnostic power of complement is based on the capacity of the complement system to amplify innate and adaptive immunity. This amplification is accomplished through two strategies: (1) enzymatic reactions in the complement cascade, and (2) stimulation of leukocytes, platelets and parenchymal cells through specific receptors or receptor-independent pore formation. The mechanisms by which complement mediates and modifies nonspecific inflammation, antibody-mediated injury and T-cell responses are of particular significance to the pathogenesis of transplant rejection. Understanding the mechanisms by which complement integrates the interactions of leukocytes, platelets and parenchymal cells offers opportunities to further refine the diagnosis of rejection.     

131I-Herceptin在乳腺癌裸鼠模型中的显像及体内分布研究

目的 研究131I-Herceptin荷人乳腺癌裸鼠体内的生物学分布及荷人乳腺癌裸鼠的放射免疫显像特点.方法 以对数生长期的SK-BR-3乳腺癌细胞皮下接种BALB/c-neu裸鼠建立动物模型,对荷瘤小鼠模型进行SPECT连续显像.测量小鼠注药后的4、12、24、48 h各脏器每克组织每分钟的放射性计数(cpm/g),并计算T/NT以及每克组织的放射性计数占注射剂量放射性计数的百分比(％ ID/g).结果 (1)SK-BR-3细胞皮下接种BALB/c-neu裸鼠后成瘤率96％.(2)实验组对比对照组,显像对比明显;实验组T/NT以及肿瘤组织％ID/g显著高于对照组(P＜0.01).结论 131I-Herceptin在SK-BR-3乳腺癌裸鼠肿瘤组织中的浓聚明显,具有良好的靶向作用.     

供者特异性抗原静脉输注联合抗γ链单克隆抗体诱导小鼠皮肤移植物免疫耐受

目的　探讨静脉输注供者特异性抗原联合抗白细胞介素2受体(IL 2R)γ链单克隆抗体诱导移植免疫耐受的可行性。方法　在C57BL/6小鼠建立H Y皮肤移植模型,术前7 d给予5×106个供者脾细胞静脉输注,并分别于术前6 d和4 d给予抗白细胞介素2受体γ链单克隆抗体(4G3、3E12及TUGm2各0.5 mg)和抗IL 2Rβ单克隆抗体(TM β1,0.5 mg)混合液2.0 mg腹腔注射,以单纯行H Y皮肤移植模型和静脉输注供者特异性抗原的H Y皮肤移植模型为对照,观察皮肤移植物的存活时间。结果　联合给予抗白细胞介素2受体γ链单克隆抗体和供者特异性抗原输注组的皮肤移植物存活时间均超过100 d,显著长于单纯H Y皮肤移植组的33.42 d(P<0.01)及仅输注供者特异性抗原H Y皮肤移植组的14.71 d(P<0.01)。结论　在H Y皮肤移植模型中,静脉输注供者特异性抗原联合抗白细胞介素2受体γ链单克隆抗体可以成功地诱导受者对皮肤移植物的免疫耐受。