母婴阻断失败乙型肝炎病毒基因序列分析

目的 通过随访调查和病毒基因检测,了解母婴阻断后的效果,并研究突破母婴阻断的乙型肝炎病毒基因序列特征,了解病毒母婴传播特点.方法 2003年开始收集临床乙型肝炎病毒表面抗原阳性母亲血清及婴儿血清75对,检测血清学感染指标,取其中母亲与婴儿皆为阳性的血清提取乙型肝炎病毒,扩增包括preS和S基因在内的基因序列片段,序列测定后与标准基因型别比较,确定病毒基因及血清型别,及母婴间病毒核苷酸差异率,及确定a抗原决定簇的氨基酸替代突变率,与免疫成功组进行比较.结果 经血清学检测后共得到母婴血清皆为阳性者4对,包括一对双胞胎,扩增出乙肝病毒基因序列,其中4个乙型肝炎病毒基因型为B型,1个乙型肝炎病毒基因型为C型,其中1对双胞胎婴儿在"a"抗原决定簇出现T143M变异,其余扩增母婴阻断成功病例43例,37例为B型,6例为C型,其中a抗原决定簇发生变异的有3例.结论 母婴阻断失败的儿童中大部分与母亲的基因序列相同,a抗原决定簇变异的比率高于成功组母亲,但差异无统计学意义.     

肿瘤坏死因子-a及其Ⅱ型受体基因多态性与矽肺

目的探讨肿瘤坏死因子-a(TNF-a)及其Ⅱ型受体(TNFRⅡ)基因多态性在矽肺发病遗传易感性中的作用及其与二氧化硅暴露的交互作用.方法选择259例矽肺患者和341例矽尘接触者(对照)为研究对象,对其职业史、尘肺病史、既往病史等进行问卷调查;拍摄其高仟伏X射线后前位胸片,根据尘肺病诊断标准进行诊断和分期;采集每个研究对象的外周静脉血,应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测其TNF-a及TNFRⅡ基因多态性.结果在成组或11配对分析中,矽肺患者和矽尘接触者两组间TNF-a基因-308位点G/A+A/A基因型和TNFRⅡ196位点T/G+G/G基因型分布频率的差异均无统计学意义(P＞0.05).当接尘工龄＜15年时,G/A+A/A基因型携带者发生矽肺的危险性是G/G基因型的6.74倍,95%CI1.01～44.99.结论TNF-α和TNFRⅡ基因多态性在汉族人群矽肺发病的遗传易感性中不起主要作用.TNF-α基因-308位点基因多态性在矽肺发病过程中与接尘工龄存在交互作用,当累积接尘量较低时,G/A+A/A基因型携带者发生矽肺的危险性较G/G基因型明显增加.     

散发性肾透明细胞癌组织中VHL基因突变、血管内皮生长因子表达及其与微血管形成的关系

目的探讨国人散发性肾透明细胞癌(CCRCC)中von Hippd-Lndau(VHL)基因突变、血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管形成的关系和意义。方法应用聚合酶链反应(PCR)、PCR产物直接测序和免疫组化等方法分析77例散发性肾透明细胞癌中VHL基因突变、VEGF和微血管密度(MVD)的情况。结果VHL基因突变40例(51．9％),VEGF染色阳性61例(79．2％)。在VHL基因突变组中VEGF阳性率(92．5％)高于无突变组(64．9％),P=0．003;VHL基因突变组MVD均值(760．80／mm^2)也高于无突变组(547．03／mm^2),P=0．001。VEGF阳性组MVD均值(715．95／mm^2)高于VEGF阴性组(437．44／mm^2),P=0．001。在VEGF阳性组中,按照VHL基因是否突变分组,突变组MVD值仍高于无突变组,P=0．011。结论在国人散发性肾透明细胞癌中VHL基因突变率较高,其突变会使VEGF表达和MVD升高。VHL基因突变失活后除通过VEGF,还可能通过其他机制促进肿瘤微血管的形成,并因此可能增加了CCRCC的恶性能力。     

汉族家族性肥厚型心肌病患者的MYH7基因R663H、E924K突变

目的研究中国人家族性肥厚型心肌病(HCM)的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系。方法对5个家族性HCM的先证者进行β-肌球蛋白重链基因(β-MHC)扫描,聚合酶链反应(PCR)扩增其功能区外显子片段,双脱氧末端终止法测序。对阳性测序结果者进行家系中其他成员筛查,并分析患者临床表型特点。结果在其中2个家系中分别发现R663H、E924K杂合突变,而正常对照组同一位置未见异常,E924K在我国HCM患者中首次发现。结论β-MHC为我国家族性HCM的致病基因之一。其临床表型的异质性提示多因素参与了HCM的发生及外显。     

中国3个民族群体Y染色体上17个双等位基因位点的遗传分析

目的研究中国不同民族群体Y染色体的遗传多样性.方法采用PCR和等位基因特定PCR(ASPCR)的方法,对山东汉族、白族和土族共计76份男性DNA样本进行Y染色体上17个双等位基因位点的基因分型,确定每一个体的单倍型,统计3个群体各单倍型的频率分布,与国内其他群体的结果进行对比分析,并进行这些群体的主成分分析.结果有6个位点在3个群体中没有发现多态变异,YAP 在土族、白族和山东汉族中的分布分别为23.8%、6.7%和4%;3个群体共发现11种单倍型,山东汉族7种,土族8种,白族9种,主要单倍型频率集中在H1、H3、H5、H6、H8和H11.主成分分析结果显示白族与北方汉族相近,山东汉族与南方汉族等南方群体聚在一起,土族与彝族、回族和满族相近.结论山东汉族可能与一些南方群体有过基因交流,白族基因池中融入汉族基因流.中亚人群的基因流可能对东亚人群的遗传结构有过影响.     

突变型与野生型HPV16 DNA疫苗的免疫原性

目的评价突变人乳头瘤病毒16(HPV16)E7锌指结合区后HPV16E7 DNA疫苗的免疫原性.方法将构建的野生型(pcDNA3.1/16E7)和突变型(pcDNA3.1/16ME7)DNA疫苗经肌肉免疫C57BL/6小鼠,分离脾单个核细胞,用E7特异性多肽刺激后,测定E7特异性白介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的水平及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应.同时以未加E7多肽组作对照组.结果经E7特异性多肽刺激后,pcDNA3.1/16ME7产生IL-2的斑点数明显高于pcDNA3.1/16E7、pcDNA3.1和空白对照组.pcDNA3.1/16ME7的斑点数是pcDNA3.1/16E7的5倍多,两组间差异有显著性(P＜0.05);pcDNA3.1/16ME7产生的IFN-γ是pcDNA3.1/16E7的2倍,差异有显著性(P＜0.05);LDH结果显示在E:T为45:1时,pcDNA16/E7、pcDNA16/ME7、pcDNA3.1及未经免疫的小鼠4组之间CTL细胞杀伤率分别为(28.7±1.2)%、(55±2.2)%、(12.5 2.0)%和(11.5±1.2)%,前两组与后两组中任一组之间差异均有显著性,前2组之间差异亦有显著性(P＜0.05).而未加E7多肽组,各组间差异均无显著性(P＞0.05).结论突变HPV16E7锌指结合区能显著增强DNA疫苗的免疫原性,是提高DNA疫苗免疫原性的策略之一.     

Troponin I, cardiac diastolic dysfunction and restrictive cardiomyopathy

Cardiomyopathiesarediseasesofheartmusclethatareassociatedwithcardiacdysfunction.Molecularge-neticstudiesperformedtodatehavedemonstratedthatthedamageormutationsinseveralsarcomericcontractileproteingenesareassociatedwiththedevelopmentofthediseases.Inthisreview,cardiactroponinI,oneofthesarcomericthinfilamentprotein,willbediscussedregardingitsroleincardiacfunction,itsdeficiency-relateddiastolicdysfunction,andthemutationofthisprotein-mediatedrestrictivecardiomyopathy.INTRODUCTIONHeartfailureis…     

针灸对小鼠骨髓细胞微核的影响

目的 :研究针灸对小鼠骨髓细胞微核的影响。方法 :将实验动物分为正常对照组 ,阳性对照Ⅰ、Ⅱ组 ,针灸预防Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组 ,针灸治疗Ⅰ、Ⅱ组。针刺小鼠“足三里” ,艾灸“关元”穴 ,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率、骨髓有核细胞微核率的变化。结果 :阳性对照组与正常对照组比较 ,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率、骨髓有核细胞微核率明显升高。针灸预防Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组 ,针灸治疗Ⅰ组与阳性对照Ⅰ组比较 ,针灸治疗Ⅱ组与阳性对照Ⅱ组比较 ,各指标明显降低 (P <0 0 0 1)。结论 :针灸可拮抗由环磷酰胺诱导的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率、骨髓有核细胞微核率的升高     

Expression of a mutant hTERT in human bladder carcinoma cell line T24 and its clinical significance

Objective: To construct a mutant pEGFP- hTERT expression vector, to observe its steady expression in transfected human bladder carcinoma cell line T24 and its role in molecular regulatory mechanisms of telomerase, and to provide a new target gene for bladder cancer. Methods:PCR amplification was performed by using primers based on the known gene sequence of hTERT. PCR production was cloned into plasmid pGEMT-T easy and the sequence of mutant hTERT gene was analyzed. A recombinant mutant hTERT vector (pEGFP-hTERT) was constructed at the EcoR I and Sa/I sites of the pEGFP-C1 vector. After transfecting the fusion gene into bladder carcinoma cell line T24 by calcium phosphate-DNA coprecipitation, the steady expression of GFP-hTERT fusion protein was tested by fluorescent light microscopy. The proliferation changes of bladder carcinoma cell line T24 were detected by light microscopy and senescence correlated [3-galactosidase staining. Results: Identification of pEGFP-hTERT by enzyme digestion showed that mutant hTERT fragment had been cloned into EcoR I and Sal I sites of the pEGFP-C1 vector. The steady expression of GFP-hTERT fusion protein was localized in the nucleus of transfected cells. Expression of senescence-associated ~-galactosidase in transfected cells gradually increased with extended cultured time and cell growth was suppressed. Conclusion: The mutant-type hTERT gene suppresses the proliferation of bladder carcinoma cell line T24 by competitive effect on telomerase activity. This suggests that hTERT gene might be a suitable gene target for bladder cancer therapy.     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变、同型半胱氨酸水平与1型糖尿病微血管并发症相关性研究

国内外大量研究表明 ,高同型半胱氨酸 (Hcy)血症是心、脑及外周血管疾病的重要危险因素之一[1 ] 。亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因C6 77T突变是导致该酶活性降低并引起高Hcy血症的主要遗传机制。 2型糖尿病 (DM)血管病变患者MTHFR基因C6 77T纯合突变率及Hcy水平明显升高[2 ,3] 。本研究旨在探讨MTHFR基因C6 77T突变、Hcy水平与 1型DM年轻患者糖尿病微血管并发症的关系。对象1型DM患者 6 8例 ,男 2 9例 ,女 39例 ,年龄 (17 2± 4 0 )岁 ,病程 (9 0± 3 4 )年 (5 0～ 18 5年 ) ,病例符合 1999年WHO的诊断标准。根据是否合…