碳青酶烯类抗菌药物对常见非发酵革兰阴性杆菌体外抗菌活性的分析

目的比较美罗培南和亚胺培南对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性，为临床医生经验用药提供参考。方法采用K-B纸片法和MIC法对2004-2006年分离的铜绿假单胞菌587株和鲍曼不动杆菌226株进行药敏试验．结果按照CLSI2006标准判定，数据采用WHONET5．4和SPSS11．5进行统计分析。结果铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为43．4％和37．5％，P〈0.01；鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为40．7％和41．6％，P〉0.05。结论非发酵菌对碳青酶烯类抗菌药物耐药问题越来越严重，该研究发现美罗培南对铜绿假单胞菌的耐药率低于亚胺培南，对鲍曼不动杆菌耐药率无统计学意义。美罗培南和亚胺培南对铜绿假单胞菌的耐药性存在差异，应该加强对这两种抗菌药物的监测。     

Mcl-1基因与肝细胞癌

Bcl-2家族蛋白在细胞凋亡的调节中起着重要的作用，髓样细胞白血病-1（Mcl-1）是Bcl-2家族中一个重要的抗凋亡成员，并作为促耐药因子在不同肿瘤组织中表达。进展期肝细胞癌对各种化疔药物有着高度的耐药性。Mcl-1下调使HCC癌细胞对不同化疗药物敏感，并增加癌细胞的凋亡率。因而，Mcl-1靶向治疗有望成为肝细胞癌治疗的新途径。     

幽门螺杆菌对6种抗生素的耐药性及其机制的研究

目的了解幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）对6种常用抗生素的耐药状况，探讨耐甲硝唑rdxA基因突变与耐药性的关系。方法分离培养76株Hp，以琼脂稀释法检测Hp对甲硝唑、替硝唑、四环素、克拉（红）霉素、阿莫西林、利福平的最小抑菌浓度（Mininum Inhibitory Concentration，MIC），再用PCR方法扩增甲硝唑耐药相关基因rdxA,DNA测序分析敏感株和耐药株耐药基因的序列与耐药性的关系。免疫印记（westem Blotting）分析耐药基因的表达与耐药性的关系。结果武汉地区人群Hp对甲硝唑、替硝唑、四环素、克拉（红）霉素、阿莫西林、利福平的耐药率分别为67．1％、43．4％、3．9％、11．8％、17．1％和10．5％；甲硝唑耐药基因序列分析表明rdxA基因有插入或点突变；Western Blot显示耐药株和敏感株的rdxA基因的表达有差异。结论幽门螺杆菌对6种抗生素有较高的耐药率，rdxA基因突变导致基因表达水平改变，导致Hp对甲硝唑耐药。     

254个周期夫精宫腔内人工授精临床分析

目的探讨影响夫精宫腔内人工授精妊娠率的因素。方法回顾分析2004年1月～2006年5月在南方医院生殖医学中心行夫精宫腔内人工授精254个周期的临床资料。结果周期临床妊娠率为12．2％。不同不孕原因之间及不同促排卵方案之间的临床妊娠率的差异具有显著性（P〈0．05），而患者年龄、不孕年限及IUI周期数等与IUI周期的妊娠率之间无显著关系，比较各组间的临床妊娠率差异无显著性（P〉0．05）。结论夫精宫腔内人工授精的妊娠率与不孕原因及是否采用促排卵治疗有关。     

海参糖胺聚糖对内皮细胞vWF和PAI-1表达的影响

目的探讨玉足海参糖胺聚糖（GAG）对活化人脐静脉内皮细胞（HUVECs）von Willebrand因子（vWF）和纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）表达的影响，以进一步明确GAG抗血栓作用机制。方法不同浓度GAG与凝血酶活化HUVECs共同孵育，MTT比色法检测GAG对细胞活力的影响，分别采用ELISA法和RQ—PCR法检测GAG对活化HUVECs vWF和PAI-1抗原蛋白和基因表达的影响。结果GAG可以降低活化HUVECsvWF抗原和PAI-1抗原的表达，5mg／LGAG抑制作用最为显著（P〈0．001），且强于相同剂量的肝素。5mg／LGAG还可以抑制活化HUVECsvWFmRNA和PAI-1 mRNA转录（P〈0.01、0.05），5mg／L肝素虽然对此两种mRNA转录亦呈抑制作用，但对PAI-1mRNA转录的抑制作用无统计学意义（P〉0．05）。结论GAG可能通过降低活化HUVECsvWF和PAI-1抗原表达及其mRNA转录，从而达到抗凝血及抗血栓作用。     

结肠癌组织CD44v6和Ⅳ型胶原的表达及其临床意义

浸润和转移是恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一 ,它是一个复杂多步骤的主动过程 ,包括肿瘤细胞脱离原发灶、局部浸润、进入宿主血液循环、出血管进入靶器官间质、在靶器官内增殖等步骤。其本质是肿瘤细胞与宿主细胞、肿瘤细胞与细胞外基质之间相互作用的过程。基底膜成份的破坏及肿瘤细胞表面粘附分子表达异常是肿瘤浸润转移的两个重要环节。本研究采用免疫组织化学技术检测 6 0例结肠癌患者Ⅳ型胶原及ＣＤ44ｖ6的表达 ,以探讨它们对结肠癌浸润转移及预后判断的价值。1　材料和方法1.1　标本来源　　 6 0例大肠癌选自本院 1997年 4月至 1998…     

蛋白翻译起始因子C2在原发性肝细胞肝癌中表达的意义

目的：研究C2 mRNA及其蛋白在原发性肝细胞肝癌（HCC）中的表达及意义。方法：用原位杂交检测C2 mRNA在21例HCC及其癌旁组织中的表达,ABC免疫组化法检测C2蛋白60例HCC及其42例癌旁组织中的表达,Western blot检测C2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达。结果：21例HCC及其癌旁组织中,C2 mRNA阳性率分别占23.8%（5/21）和85.7%(18/21)。60例HCC及42例癌旁组织中,C2蛋白阳性分别占27.3%(17/60)和83.3%（35/42）。27例肝硬变中,C2蛋白阳性率为77.8%(21/27)。χ^2检验：C2 mRNA及其蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织（P＜0.001);C2蛋白在肝硬变中的表达明显高于HCC癌组织（P＜0.001);C2的表达与患年龄、HBsAg及AFP有明显关系（P＜0.001);碉与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无并;Western bolt与免疫组化结果一致。结论：C2基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断。     

Endostatin基因真核表达载体的构建及活性鉴定

目的：构建endostatin基因的真核表达载体,并将其转染C6脑胶质瘤 细胞,探讨其体外抑制血管内皮细胞生长的活性。方法：利用PCR将大鼠血清蛋白分泌信号连接在endostatin基因的碳末端,构建成真核表达载体pcDNA3-Sendostatin,利用Lipofectamine法将其转染C6脑胶质瘤细胞,采用细胞增殖实验进行endostatin表达蛋白体外活性鉴定。结果：成功构建了endostatin基因真核表达载体,转染该载体的C6脑胶质瘤细胞可分泌表达抑制血管内皮细胞增生的endostatin蛋白。结论：endostatin是一种有效的血管生成抑制剂,可进一步用于在体肿瘤的抗血管生成治疗。     

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠脑弥漫性轴索损伤中的表达

0　引言　碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growthfactor,b FGF)作为新的神经营养因子对神经再生的研究是近年的热点 ,研究表明 ,b FGF能促进体内外受损伤神经元的存活和突起生长 .广泛分布于成熟和未成熟的中枢神经系统内 ,主要由神经元、巨噬细胞和胶质细胞产生 [1 ] ,b FGF是一种具有生物学活性的多肽 ,具有促进胶质细胞、血管内皮细胞生存活化以及新生毛细血管的形成 ,在中枢神经系统内 ,其神经活性广泛 ,能保护神经元 ,促进神经生长 ,b FGF在保护神经元免受各种因素所致神经元变性和死亡中发挥着重要作用 .b FGF参与弥…     

趋化因子SDF-1β在大肠杆菌中的表达及其纯化

目的　重组人SDF 1 β在大肠杆菌中表达并获得纯化的有生物学活性的SDF 1 β蛋白。 方法　以pET32a( + ) SDF 1为人SDF 1 β克隆基因的表达载体 ,以大肠杆菌AD494(DE3)pLysS为表达菌 ,在IPTG诱导下表达出一个由 2 30个氨基酸残基组成的硫氧还蛋白 (thioredoxin) SDF 1 β的融合蛋白 ( 2 6× 1 0 3)。经细菌裂解、金属离子螯合亲和层析、肠激酶消化以游离SDF 1 β、阳离子交换层析和逆向高效液相层析等步骤纯化目的蛋白。以蛋白印迹、纯化产物的N端氨基酸测序及配体结合试验、微生理监测术鉴定纯化产物的生化性质及生物学活性。结果　在经诱导的发酵菌中融合蛋白占总菌体蛋白的 1 0 %～ 1 5 %。从 1L发酵菌液中可获得高纯度目的蛋白约 40 0 μg。蛋白印迹实验及N端氨基酸测序皆证实纯化终产物为SDF 1 β(由 71个氨基酸残基组成 ,7.8× 1 0 3)。配体结合试验及Cytosensor表明 ,该产物能与CXCR4结合 [Kd =( 1 2 .2 0± 2 .99)nmol L]并引起CXCR4表达细胞的信号传导。结论　采用本方法可获得高表达的 ,高纯度的具有与天然SDF 1 β相似活性的重组人SDF 1 β。