克雷伯氏肺炎杆菌生产1,3-丙二醇代谢途径中的酶活变化

考察了不同条件下克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella.pneumoniae)合成1,3-丙二醇(1,3-PD)的3种关键酶(甘油脱氢酶(GDH)、1,3-PD氧化还原酶(PDOR)及甘油脱水酶(GDHz))的表观酶活变化。结果显示:这3种酶的酶活变化与Klebsiella.pneumoniae的1,3-PD代谢不完全相关。用SDS-PAGE电泳分析上述不同发酵条件下酶活变化,结果显示不同于3种酶的蛋白条带,Mr约为4.0×104位置的蛋白条带有明显的变化,这可能与菌体代谢过程相关,结论有待进一步深入研究。     

HPLC法测定首乌胶囊中2,3,5,4 -四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的：测定首乌胶囊中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为DiamonsilC18（4.6mm×200mm）,流动相为乙腈-水（25：75）,柱温为30℃,流速为1.0mL/min,检测波长为320nm。结果：2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.02104-0.526μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为98.45%,RSD（%）=1.23%（n=5）。结论：含量测定方法快速、准确,适用于首乌胶囊质量分析控制方法。     

Osimertinib successfully combats EGFR-negative glioblastoma cells by inhibiting the MAPK pathway

Glioblastoma(GBM)patients have extremely poor prognoses,and currently no effective treatment available including surgery,radiation,and chemotherapy.MAPK-interacting kinases(MNK1/2)as the downstream of the MAPK-signaling pathway regulate protein synthesis in normal and tumor cells.Research has shown that targeting MNKs may be an effective strategy to treat GBM.In this study we investigated the antitumor activity of osimertinib,an FDA-approved epidermal growth factor receptor(EGFR)inhibitor,against patient-derived primary GBM cells.Using high-throughput screening approach,we screened the entire panel of FDA-approved drugs against primary cancer cells derived from glioblastoma patients,found that osimertinib(3μM)suppressed the proliferation of a subset(10/22)of EGFR-negative GBM cells(>50%growth inhibition).We detected the gene expression difference between osimertinib-sensitive and-resistant cells,found that osimertinib-sensitive GBM cells displayed activated MAPK-signaling pathway.We further showed that osimertinib potently inhibited the MNK kinase activities with IC50 values of 324 nM and 48.6 nM,respectively,against MNK1 and MNK2 kinases;osimertinib(0.3–3μM)dose-dependently suppressed the phosphorylation of eukaryotic translation initiation factor 4E(eIF4E).In GBM patient-derived xenografts mice,oral administration of osimertinib(40 mg·kg^?1·d^?1,for 18 days)significantly suppressed the tumor growth(TGI=74.5%)and inhibited eIF4E phosphorylation in tumor cells.Given the fact that osimertinib could cross the blood–brain barrier and its toxicity was well tolerated in patients,our results suggest that osimertinib could be a new and effective drug candidate for the EGFR-negative GBM patients.     

两种多位点探针的制备及AKR和NOD小鼠DNA指纹分析

用所制备的复制型M13mp18和寡核苷酸(GACA)_4探针,分别与近交系AKR小鼠的9个个体及NOD小鼠的5个个体进行DNA杂交,结果提示,一种探针和近交系内各个体杂交的DNA指纹图完全一致;同一探针与不同近交系小鼠杂交的指纹图完全不同;不同探针与同一近交系小鼠杂交的指纹图也完全不同。说明用DNA指纹图分析,对建立各种实验动物标准的DNA指纹图,用于遗传监测、杂交育种、基因制图以及寻找遗传标记等均有实用价值和参考作用。     

人附睾分泌蛋白4光激化学发光免疫分析法的建立

目的 采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测人附睾分泌蛋白4(HE4)的方法.方法 用两株配对的HE4单克隆抗体,一株HE4单克隆抗体包被受体微球,另一株HE4单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲合素的供体微球共同组成检测试剂.结果 自制HE4试剂分析灵敏度为0.81 pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.3％～7.2％和6.1％～7.7％,均低于10％,与癌抗原15-3 (CA15-3)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原125(CA125)无明显交叉反应,120份临床血清样本用本试剂与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测,其相关系数为0.95.结论 自制HE4光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品.     

碳酸氢钠溶液对人牙釉质的抗酸性作用

目的研究碳酸氢钠溶液对人牙釉质抗酸性的影响。方法取制备好的釉质标本40块,随机分成4组,每组10块,设置实验组3组与对照组进行矿化及抗酸实验,分别测定矿化实验及抗酸实验前后各组釉质表面显微硬度值,比较实验前后各组标本显微硬度值的变化。结果矿化实验后,3组实验组釉质标本表面显微硬度值均较实验前显著升高（P〈0.01）,对照组硬度值较实验前略有下降,无统计学意义（P〉0.05）。抗酸实验后,实验组和对照组显微硬度值均下降,混合矿化液组下降程度显著高于其他各组（P〈0.01）;氟化钠矿化液组与碳酸氢钠矿化液组的下降程度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论碳酸氢钠溶液可增加釉质抗酸性,且能协同氟化物增强其抗酸能力。     

针刺合谷穴对脑功能成像的研究

目的 研究针刺合谷穴引起的脑功能的即刻效应和后效应(时间变化规律)。方法 用改进时间簇分析(modified temporal chlster analvsis，MTCA)方法对12名健康志愿者针刺合谷穴功能磁共振成像(fMR1)的数据进行处理，得到针刺后脑功能变化的时间和趋势。结果 针刺合谷穴在进针后7～9s和拔针后高峰后，还会不规律出现一些小的高峰。结论 针刺合谷穴对中枢神经系统影响具有时间特性。     

非吸烟烟草对BALB/3T3 A31—1—13细胞的转化活性

用体外细胞转化系统对嚼烟与含烟抽提物的转化活性进行了研究,发现两种烟草的抽提物均可使 BALB/3T3细胞发生形态学转化。酸化后的含烟抽提物和亚硝化后的嚼烟抽提物的转化活性高于未酸化或未亚硝化者。从转化集落分离出来的细胞具有肿瘤转化的某些特征,如细胞生长的接触抑制消失,饱和密度增高,获得锚独立性,细胞能在软琼脂上生长,形成克隆。本研究结果提示非吸烟烟草对使用者可能具有致癌危害作用.