LIG4mRNA与XRCC4mRNA在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨宫颈癌组织中DNA连接酶4(LIG4)及X射线修复交叉互补基因4(XRCC4)的mRNA表达水平及临床意义。方法应用实时荧光定量RT-PCR技术检测61例宫颈癌和20例正常宫颈组织中LIG4和XRCC4的mRNA表达水平,分析两种基因的表达与宫颈癌分期、分化程度及盆腔淋巴结转移之间的关系。结果 LIG4 mRNA和XRCC4mRNA在宫颈癌组织及正常宫颈组织中的表达分别为(2.88±1.97)、(5.02±1.87)和(2.16±0.99)、(3.72±1.36),差异有统计学意义,P值分别为0.00和0.00;宫颈癌患者盆腔淋巴结有转移组和无转移组中的表达分别为(0.61±0.17)、(0.41±0.28)和(0.80±0.31)、(0.58±0.26),差异有统计学意义,P值分别为0.00和0.01;宫颈癌低分化组和中高分化组中的表达分别为(1.81±0.99)和(2.03±1.25)、(1.50±0.76)和(1.45±0.57),差异无统计学意义(P>0.05)。LIG4 mRNA在Ⅱ期和Ⅲ期宫颈癌组织中的表达分别为(0.71±0.34)和(0.96±0.36),差异有统计学意义,P=0.01。LIG4 mRNA与XRCC4mRNA在宫颈癌组织中表达呈正相关(r=0.38,P=0.00)。结论 LIG4 mRNA和XRCC4 mRNA在宫颈癌组织中的异常表达与宫颈癌的发展及盆腔淋巴结转移密切相关。     

心肌梗死后心力衰竭大鼠上胸段硬膜外阻滞治疗后心功能和β_3肾上腺素能受体表达变化

目的:探讨上胸段硬膜外阻滞治疗对心肌梗死(MI)后心力衰竭大鼠心功能和β3肾上腺素能受体基因表达的影响.方法:48只大鼠随机分为假手术组(S组,n=12)和左冠状动脉结扎组(LAD组,n=36),LAD组大鼠再随机分为心衰组(CHF组,n=14)和硬膜外阻滞治疗组(HTEA组,n=14).4 wk后各组均经寰枕关节置入PE-10导管至胸段硬膜外腔,置管术后24 h S组和CHF组于硬膜外腔注入9 g/L生理盐水(100 μL/kg,2次/d,4 wk).HTEA组于硬膜外腔注入125 g/L布比卡因(100 μL/kg,2次/d,4 wk).4 wk后行超声多普勒测定心功能的参数;测量和计算心脏与体质量(HW/BW)、左心室与体质量(LVW/BW)的比值;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量测定心肌组织β3AR和eNOS mRNA.结果:与CHF组相比较,HTEA组的LVEDd和LVEDs减小,EF和FS有所增加;HW/BW和LVW/BW有所降低;β3AR和eNOS mRNA表达明显减少.结论:上胸段硬膜外阻滞治疗可以改善MI后心衰大鼠的心功能,减缓心室重构,降低或延缓β3AB和eNOS mBNA的表达.     

基于3G的临床实习生教育移动学习资源设计与开发

分析了基于3G移动通讯技术的移动学习特点,探讨了移动学习中学习资源的开发原则,并提出了基于Wap浏览移动学习模式的学习管理系统的设计方案。     

丙戊酸钠慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞GAT-3及GABA-TmRNA表达的影响

目的通过研究丙戊酸钠(VPA)慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞γ-氨基丁酸转运体-3(GAT-3)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T) mRNA表达水平的影响,从星形胶质细胞的角度来探讨VPA的停药反跳机制。方法用含50 mg/L VPA的DMEM培养基将C6细胞培养2周后制成VPA慢性作用模型,采用半定量RT-PCR方法检测VPA慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞GAT-3和GABA-T mRNA表达水平的变化。结果(1)在VPA慢性作用下,相对灰度值(RV值,即GAT-3、GABA-T电泳条带与相应的β-actin灰度积分的百分比)为(39.1±0.5)%,低于正常对照组的(46±1.3)%;各停药组的RV值均低于VPA慢性作用组,其中停药24 h组的最低,为(11.7±1.6)%,停药30 min组的最高,为(38.9±0.6)%;而停药48 h组又升高到(33.5±1.1)%。(2)VPA慢性作用组[RV值为(71.31±6.91)%]与对照组[RV值为(34.77±3.26)%]相比,GABA-T mRNA表达明显上调;各停药组与VPA慢性作用组相比GABA-T mRNA的表达明显下调,其中停药12 h组[RV值为(25.36±7.68)%]降至最低。结论VPA慢性作用可使GAT-3 mRNA的表达下调,使GABA-T mRNA表达上调。VPA慢性作用后停药造成的GAT-3和GABA-T mRNA表达水平的波动可能与VPA停药反跳有关。     

卒中后抑郁Nogo-P300的执行功能分析

目的通过事件相关电位检测,探讨卒中后抑郁患者的执行功能。方法对12例卒中后抑郁患者(观察组)及12例健康者(对照组)进行事件相关电位检测,受试者须对稀有声刺激执行按键反应(代表Go反应),对标准声刺激不执行按键反应(代表Nogo反应),通过头顶中央(Cz)记录大脑对听觉刺激信号产生的Nogo-P300波形,对Nogo-P300中的主成分Nogo-N2、Nogo-P3的波幅分别测量。结果观察组Nogo-N2、Nogo-P3波幅低于对照组,2组相比差别有统计学意义(P<0.01)。结论Nogo-N2、Nogo-P3显示反应抑制,可为卒中后抑郁提供执行功能的依据。     

IgG4-Related Disease: A Constellation of Abdominal Manifestations

IgG4-related disease is an autoimmune condition that results in inflammation and fibrosis throughout multiple organ systems. This disease is rare; however, it can mimic many more prevalent conditions clinically and thus should be included in their differential diagnoses. Although autoimmune pancreatitis is the most common abdominal manifestation, the disease can afflict the hepatobiliary, vascular and renal systems as well. We present a case of a 78-year-old male with symptoms of chronic fatigue and weight loss. Imaging was performed with the expectation of revealing a malignancy, although the features of IgG4-related disease involving multiple organs were detected instead. Serology confirmed the diagnosis. It is imperative to diagnose IgG4-related disease early as it has a different treatment and favorable prognosis compared to many malignancies.     

融合基因GM-CSF-BZLF1重组腺病毒表达载体的构建

目的构建粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和EB病毒即刻早期基因(BZLF1)融合基因的重组腺病毒表达载体。方法采用逆转录-聚合酶链反应分别获得GM-CSF和BZLF1编码序列的cDNA,应用剪接式重叠延伸(SOE)技术将两段基因通过多肽接头(Gly4Ser)3的DNA序列进行连接,构建融合基因GM-CSF-BZLF1。将融合基因GM-CSF-BZLF1定向亚克隆至pAdTrack-CMV质粒,在原核细胞E.coliBJ5183中完成穿梭质粒与骨架质粒pAdEasy-1的同源重组,构建融合基因GM-CSF-BZLF1真核表达载体pAd-GM-CSF-BZLF1。将真核表达载体pAd-GM-CSF-BZLF1转染293细胞,获得复制缺陷型重组腺病毒vAd-GM-CSF-BZLF1。RT-PCR鉴定感染重组腺病毒的293细胞中GM-CSF-BZLF1基因的表达。结果 GM-CSF-BZLF1基因插入重组腺病毒表达载体的预期位置,且插入序列完全正确;感染重组腺病毒vAd-GM-CSF-BZLF1的293细胞中检测到融合基因GM-CSF-BZLF1的转录表达。结论成功地构建了融合基因GM-CSF-BZLF1重组腺病毒表达载体,为进一步探讨GM-CSF-BZLF1的功能提供了理论基础和实验依据。     

视网膜母细胞瘤Rb50细胞株VEGFR-3表达的研究

目的:研究视网膜母细胞瘤细胞株VEGFR-3的表达,探讨视网膜母细胞瘤自身增殖的机制.方法:选择Rb50细胞株,通过S-P免疫组化法、RT-PCR法及PCR产物琼脂糖凝胶电泳等方法,研究Rb50细胞株VEGFR-3的表达情况.结果:S-P免疫组化法呈阳性结果,表明Rb50细胞株有VEGFR-3的表达,RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳表明Rb50细胞株有较高水平VEGFR-3 mRNA的存在.结论:视网膜母细胞瘤细胞株有VEGFR-3的表达,表明VEGFR信息通路对视网膜母细胞瘤生长、浸润的影响,除了与促进肿瘤血管及淋巴管新生,改善肿瘤组织微环境相关外,还与促进肿瘤细胞自身增殖有关.     

抗Stat3多克隆抗体的制备和其在乳腺癌诊断中的应用

目的:制备兔抗信号转导与转录激活因子3(Stat3)抗体,分析其在乳腺癌诊断中的价值.方法:应用人工重组小鼠Stat3蛋白,免疫雄性家兔制备抗Stat3抗体;用免疫印迹法分析检测抗Stat3抗体的纯度和特异性;应用免疫组化染色法检测65例乳腺癌和30例正常乳腺组织中Stat3蛋白的表达.结果:用Stat3蛋白免疫家兔被免疫6 wk后,其血清中抗Stat3抗体效价＞1∶ 256,000(A450 nm=0.40);SDS-PAGE和免疫印迹分析均在分子质量(Mr)92 000处有明显的带;65例乳腺癌组织的细胞浆和细胞核中,Stat3蛋白表达量在不同的组织学分级之间有统计学差异(P＜0.05).结论:高效价和特异性强的抗Stat3抗体被成功制备. 该抗体可用于乳腺癌组织细胞Stat3蛋白表达的检测.     

克雷伯氏肺炎杆菌生产1,3-丙二醇代谢途径中的酶活变化

考察了不同条件下克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella.pneumoniae)合成1,3-丙二醇(1,3-PD)的3种关键酶(甘油脱氢酶(GDH)、1,3-PD氧化还原酶(PDOR)及甘油脱水酶(GDHz))的表观酶活变化。结果显示:这3种酶的酶活变化与Klebsiella.pneumoniae的1,3-PD代谢不完全相关。用SDS-PAGE电泳分析上述不同发酵条件下酶活变化,结果显示不同于3种酶的蛋白条带,Mr约为4.0×104位置的蛋白条带有明显的变化,这可能与菌体代谢过程相关,结论有待进一步深入研究。