TIMP-1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的作用

目的　探讨TIMP 1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的意义及外源性IL 10抗肝纤维化作用的可能机制。方法　 60只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组 (N组 ,8只 )、CCl4组 (C组 ,2 8只 )和IL 10干预组 (Ⅰ组 ,2 4只 ) ,建立下常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL 10干预模型。造模第 7周和第 11周 ,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉原位灌流消化 ,11%Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)。半定量RT PCR法检测各组HSC的TIMP 1mRNA表达水平 ;免疫细胞化学法检测培养贴壁后HSC的TIMP 1蛋白表达情况。结果　各组均检出TIMP 1的mRNA表达 ;造模第 7周 ,C组与I组的TIMP 1mRNA表达均高于N组 (P <0 .0 1) ,I组低于C组 (P <0 .0 1) ;造模第 11周 ,I组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,C组TIMP 1的表达水平较第 7周进一步增加 (P <0 .0 1) ,而I组有所下降 (P <0 .0 5 )。免疫细胞化学法检测各组TIMP 1的蛋白表达变化与mRNA表达变化一致。结论　TIMP 1随着大鼠肝纤维化进展表达逐渐升高 ,IL 10通过抑制TIMP 1的表达 ,起抗纤维化作用     

肥大细胞在大鼠胰腺组织纤维化形成中的作用及其机制

目的探讨肥大细胞（MC）在大鼠胰腺组织纤维化形成中的作用和机制。方法建立经逆行胆胰管注射2％三硝基苯磺酸（TNBS）诱导大鼠慢性胰腺炎模型，将大鼠分为三组，每组40只，分别用肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠和MC激动剂48／80化合物及生理盐水进行干预，并于第3、7、14、21和28天处死动物。H—E染色观察胰腺组织病理学改变；Van Gieson染色观察胰腺组织纤维化情况；硫堇蓝染色观察大鼠慢性胰腺炎过程中MC分布、形态和数量的改变；免疫组化染色观察大鼠慢性胰腺炎α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子（TGF）β1的表达；逆转录-多聚酶链反应（RT—PCR）观察血管紧张素Ⅱ1型（AT1）和2型（AT2）受体蛋白的表达。结果2％TNBS胰管内注射后可于第4周引起典型大鼠胰腺组织纤维化，在胰腺纤维化区域可见大量Ⅰ型胶原沉积。在此过程中MC存在着活化及脱颗粒。胰腺组织α—SMA、TGFβ1、AT1和AT2 mRNA蛋白制模早期表达即为阳性，至第4周时最强。与对照（生理盐水）组比较，色甘酸钠组MC数量及脱颗粒现象明显减少，α-SMA、TGFβ1蛋白表达和AT1、AT2受体mRNA表达明显减少；48／80化合物组MC数量及脱颗粒现象明显增多，上述各指标的表达均有不同程度的增加。结论MC参与TNBS诱导的大鼠慢性胰腺炎的炎症和纤维化的发生及发展，其机制可能与MC促进胰腺星状细胞活化，上调血管紧张素Ⅱ受体表达等介导了胰腺纤维化的形成。     

The role of C/EBP-α expression in human liver and liver fibrosis and its relationship with autophagy

Aim: To investigate the expression of CCAAT enhancer binding protein-α (C/EBP-α) in normal human liver and liver fibrosis and its probable association with autophagy. Methods: Double label immunohistochemistry was used to detect the location of C/EBP-α in hepatocytes and hepatic stellate cells (HSCs). The expression of C/EBP-α, Atg5, and Atg6 was also evaluated by immunohistochemistry in paraffin sections of human liver. HSC-T6 cells were treated with rapamycin and 3-methyladenine (3MA) to induce or inhibit autophagy, and the expression of C/EBP-α protein was detected by Western blotting. Results: Double label immunohistochemistry showed that C/EBP-α was predominantly located in hepatocytes and that its expression was significantly decreased in fibrosis compared with normal liver. Atg5 expression was increased in fibrosis but was located primarily in liver septa and peri-vascular areas, which was consistent with the distribution of HSCs. In contrast, Atg6 was not expressed in normal or fibrotic liver. Treatment of HSC-T6 cells in culture with rapamycin or 3MA decreased or increased C/EBP-α expression, respectively, as shown by Western blotting. Conclusion: C/EBP-α was primarily expressed in hepatocytes in normal liver, but its expression decreased significantly in liver fibrosis. Autophagy might play a role in liver fibrosis through its association with C/EBP-α, but this hypothesis warrants further investigation.     

Role of platelets in chronic liver disease and acute liver injury

Platelets contain not only hemostatic factors but also many growth factors that play important roles in wound healing and tissue repair. Platelets have already been used for the promotion of tissue regeneration in the clinical setting, such as dental implantation and plastic surgery. Thrombocytopenia, which is frequently found in patients with chronic liver disease and cirrhosis, is due to various causes such as decreased thrombopoietin production and accelerated platelet destruction caused by hypersplenism. However, the relationship between thrombocytopenia and hepatic pathogenesis and the role of platelets in chronic liver disease are poorly understood. In acute liver injury, it is reported that platelets are recruited to the liver and contribute to liver damage by promoting the induction of chemotactic factors and the accumulation of leukocytes in the liver, whereas platelets or mediators released by platelets can have a protective effect against liver injury. In this review, we highlight the recent accumulated knowledge concerning the role of platelets in chronic liver disease and acute liver injury.     

酒精性肝病患者血浆白细胞介素-21水平及重组IL-21对LX-2肝星状细胞增殖和活化的影响

目的：分析酒精性肝病患者血浆白细胞介素-21（IL-21）水平及重组IL-21体外对LX-2肝星状细胞增殖和活化的影响。方法采用ELISA法检测17例酒精性肝炎、51例酒精性肝硬化患者和20例健康人血浆IL-21水平;体外培养LX-2肝星状细胞,以IL-21（1ng/ml或10ng/ml）处理24 h或48 h,检测LX-2细胞增殖及α-平滑肌肌动蛋白表达。结果与健康对照人群比,酒精性肝炎和酒精性肝硬化患者血浆IL-21水平均显著升高（P＆lt;0.05）,但酒精性肝炎和肝硬化患者之间无显著性差异,不同Child分级的肝硬化患者之间也无显著性差异;在IL-21作用24～48 h后,LX-2细胞增殖水平与对照组比无显著性差异,但α-平滑肌肌动蛋白表达均较对照组显著升高。结论血浆IL-21可能通过促进肝星状细胞活化参与了酒精性肝病患者肝纤维化的发生和发展。     

星状神经节阻滞对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡 及PI3K/Akt 信号通路的影响

目的 探讨星状神经节阻滞（SGB）对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡、PI3K/Akt 信号通路表达的 影响及其相关机制的研究。方法 复制心力衰竭雄性大鼠,8 周龄,共18 只,随机分为SGB 组、对照组和假 手术组。其中SGB 组予以0.1% 利多卡因阻滞右侧星状神经节,对照组予以0.9% 生理盐水注射至右侧星状神 经节部位,假手术组仅切开皮肤至星状神经节暴露而不予阻滞,神经阻滞2 周后处死大鼠,取出心脏,酶联 免疫吸附试验检测各组心肌组织内肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平,Western blotting 检测各组心肌组织中PI3K、Akt 和Caspase-3 蛋白的表达,TUNEL 检测各组大鼠心肌组织中细胞凋 亡情况。结果 SGB 组TNF-α、IL-1β 水平较对照组和假手术组低（P <0.05）;SGB 组PI3K、Akt 蛋白相 对表达量较对照组和假手术组高（P <0.05）,Caspase-3 蛋白相对表达量较对照组和假手术组低（P <0.05）; SGB 组高倍镜视野下TUNEL 染色平均阳性数较对照组和假手术组少（P <0.05）。结论 SGB 能显著抑制心 力衰竭大鼠心肌细胞凋亡,其主要机制在于增强PI3K/Akt 信号通路表达,从而保护心脏功能。     

星状神经节阻滞对重症急性胰腺炎患者肺损伤的影响*

目的 探讨星状神经节阻滞对重症急性胰腺炎（SAP）合并急性肺损伤（ALI）患者炎症介质及功能的影响。方法 选取2016年6月—2018年12月河北北方学院附属第一医院重症医学科确诊SAP患者34例,随机分为常规治疗组（对照组）19例和超声引导下星状神经节阻滞组（SGB组）15例。对照组予禁食、水等常规治疗,而SGB组在常规治疗基础上行超声引导下星状神经节阻滞。酶联免疫吸附试验检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的变化,血液细胞分析法检测CRP和WBC的水平。观察两组在治疗前后肺水指数、氧合指数、治疗后ICU住院时间及呼吸机拔管时间的差异,以及入院0?h（T0）、第3天（SGB治疗后2?d,T1）、第7天（SGB治疗后6?d,T2）和第15天（SGB治疗后14?d,T3）时间点炎症介质的改变。结果 治疗前两组患者肺水指数和氧合指数比较,差异无统计学意义（P?>0.05）。治疗2周后SGB组的肺水指数较对照组下降（P?<0.05）,氧合指数较对照组升高（P?<0.05）,SGB组ICU住院时间、呼吸机拔管时间较对照组缩短（P?<0.05）。不同时间点间IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-10、WBC和CRP有差异（P?<0.05）;两组患者IL-6、TNF-α、IL-1β、CRP和IL-10有差异（P?<0.05）;两组患者TNF-α、IL-1β、IL-10、WBC、CRP随时间变化趋势有差异（P?<0.05）。结论 SGB有可能减轻SAPALI的炎症反应而利于改善肺损伤。     

髓样分化因子88对姜黄素诱导肝星状细胞凋亡的影响

目的观察髓样分化因子88在姜黄素促进肝星状细胞(HSC)凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSCT6,并分为空白对照组、Control siRNA组、MyD88 siRNA干扰组、姜黄素组、姜黄素+Control siRNA组、姜黄素+MyD88 siRNA干扰组,siRNA处理组给予siRNA干扰48 h后,姜黄素组加入姜黄素作用24 h,各组均在收集细胞前12 h给予LPS诱导,收集各组细胞,Western blotting法检测MyD88蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 MyD88 siRNA干扰、姜黄素均可降低MyD88蛋白的表达(P0.05),同时给予MyD88 siRNA干扰和姜黄素作用时与单独给予姜黄素比较,MyD88蛋白下降更明显(P0.05)。MyD88siRNA干扰后HSCs凋亡率无明显增加(P0.05),给予姜黄素处理HSCs凋亡率增加(P0.05),且姜黄素+MyD88 siRNA干扰组的凋亡率升高更明显。结论降低MyD88表达可加强姜黄素促进HSCs凋亡的作用。