microRNA-21在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的研究miR-21在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达,探讨miR-21表达与DL-BCL临床病理特征的关系及其在DLBCL发生发展中的意义。方法采用Real-time RT-PCR方法检测36例DLBCL和10例正常淋巴结中miR-21的表达,并采用免疫组织化学SP法检测Ki-67、PTEN在DLBCL中的表达。结果miR-21在DLBCL中高表达,36例DLBCL中有14例表达PTEN(38.9%),21例Ki-67≥50%(58.3%)。DLBCL中miR-21表达水平与PTEN蛋白表达呈负相关,其高表达与DLBCL高Ann Arbor分期、高增殖指数(Ki-67≥50%)、国际预后指数(IPI)呈正相关。结论miR-21过表达可能是DLBCL恶性度高的标志,是促进DLBCL肿瘤细胞增殖的重要因素。PTEN可能是miR-21在DLBCL发挥作用的靶标。     

MicroRNA-539靶向调控E2F转录因子3抑制肝癌的发生与发展

目的 探讨肝癌组织中microRNA-539（miR-539）表达水平及其抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法 收集90例肝癌患者术后肝癌组织及癌旁组织标本,用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测组织中miR-539表达量。在PCL/PRF5、Huh7和QGY-7701肝癌细胞中转染miR-539 模拟物（mimics）,用Real-time PCR检测miR-539表达量。用MTT法检测miR-539对肝癌细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测miR-539对肝癌细胞凋亡的影响;用免疫印迹法检测miR-539对肝癌细胞中E2F转录因子3（E2F3）蛋白表达的影响。结果 肝癌组织中miR-539表达量显著低于癌旁组织（P<0.05）;miR-539表达量与肝癌患者性别、年龄及肝癌组织分化程度无关（P>0.05）;与肿瘤直径和淋巴结转移相关（P<0.05）。转染miR-539 mimics组肝癌细胞中miR-539表达量显著高于空白组和miR-539 NC组（P<0.05）。在QGY-7701细胞中,过表达miR-539能显著抑制细胞增殖（P<0.05）,降低E2F3蛋白的表达（P<0.05）,对细胞凋亡无明显作用（P>0.05）。结论 miR-539是肝癌发生中的抑癌因子,可能是通过靶向下调E2F3蛋白水平达到抑制癌细胞的增殖。     

丹参诱导骨髓基质细胞神经元样细胞分化的microRNA-128路径

目的　研究microRNA-128在丹参制剂诱导大鼠骨髓基质细胞(bone marrow strowal cells,BMSCs)向神经元样细胞分化过程中的调控作用。  方法　培养鉴定大鼠BMSCs,应用反义寡居核苷酸转染技术（Lipofectamin 2000）转染microRNA-128 inhibitors于BMSCs;取转染和未转染的BMSCs,待细胞增殖到60%~70%融合时进行预诱导分化,预诱导24 h后,进行诱导分化;根据处理方式不同分为4组：未诱导组（A组）,丹参制剂诱导组（B组）,转染未诱导组（C组）,转染诱导组（D组）。流式细胞术鉴定BMSCs;qPCR检测microRNA-128及神经元特异性烯醇化酶（NSE）、巢蛋白（Nestin）、微管蛋白（β3-tubulin）的mRNA表达;Western blot检测NSE、Nestin和β3-tubulin的蛋白表达。  结果    BMSCs流式细胞检测CD29和CD90双阳性率达99.17%,CD11b和CD45双阴性率达99.21%;丹参制剂诱导及microRNA-128 inhibitors转染后,细胞microRNA-128表达量显著降低（P<0.05）;诱导与未诱导组,转染与未转染组比较,NSE、Nestin和β3-tubulin的mRNA和蛋白表达均显著升高（P<0.05）。  结论　丹参制剂能够抑制BMSCs的microRNA-128表达,进而影响BMSCs神经分化相关蛋白的表达,促进BMSCs向神经元样细胞分化。     

microRNA-146a与2型糖尿病的相关性研究进展

2型糖尿病是由遗传因素和环境因素共同导致的复杂疾病,胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍是其主要的发病机制.miRNAs是一类内源性非编码小RNA,通过调控各种基因的表达广泛参与细胞增殖、分化、凋亡、代谢等生物过程.近年研究发现,miRNA-146a与糖尿病、心血管疾病、自身免疫性疾病以及肿瘤等疾病密切相关,但miRNA-146a在2型糖尿病中的作用机制尚不清楚,还需进一步明确miRNA-146a对其的作用机制.该文就miRNA-146a与2型糖尿病及其并发症之间的相关性作一综述.     

MicroRNA-429靶向抑制occludin及对糖尿病小鼠肠上皮屏障功能的影响

 目的: 探讨microRNA-429(miR-429)在体内对糖尿病(DM)小鼠肠上皮细胞(IECs)内闭合蛋白(occludin,Ocln)表达及肠上皮屏障功能的影响。方法: 构建糖尿病小鼠模型(腹腔内注射链脲佐菌素);通过尾静脉注射antagomiRNA-429抑制DM小鼠IECs内miR-429的表达;real-time PCR检测miR-429和Ocln mRNA的表达变化;Western blotting及免疫组化检测Ocln蛋白表达变化;气相色谱法检测小鼠尿液乳果糖/甘露醇比值;显色基质鲎试剂法检测小鼠血浆LPS浓度。结果: 尾静脉注射antagomiRNA-429能显著抑制DM小鼠IECs内miR-429的表达,注射后6 d恢复至正常小鼠IECs表达水平。抑制DM小鼠IECs内miR-429表达后,Ocln表达显著提高(P<0.05),小鼠尿液乳果糖/甘露醇比值及血浆LPS水平均明显下降(P<0.05)。结论: AntagomiRNA-429能有效抑制DM小鼠IECs内miR-429的表达,进而使小鼠IECs内Ocln的表达升高,从而使肠上皮屏障功能部分恢复。     

miR-7靶向缺氧诱导因子1α对肝癌细胞的影响

目的：探究微小RNA-7(miR-7)靶向缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对肝癌细胞迁移、凋亡及干细胞特性的影响。方法 ：采用慢病毒转染肝癌细胞MGCC97H,分为对照组、miR-7模拟物组、miR-7干扰组（转染miR-7模拟物组+干扰物）、HIF-1α过表达组（转染pc-HIF1α）和共转染组（转染miR-7模拟物+pc-HIF1α）,RT-PCR检测各组细胞miR-7、HIF-1α mRNA表达量,免疫印迹检测各组HIF-1α蛋白的表达量,Transwell实验检测细胞迁移能力,流式细胞法检测细胞凋亡情况,软琼脂克隆形成实验分析其干细胞特性,荧光素酶实验验证miR-7与HIF-1α靶向关系。结果 ：miR-7模拟物组细胞HIF-1α蛋白表达、迁移率、克隆形成率低于对照组,凋亡率高于对照组;HIF-1α过表达组细胞迁移率、克隆形成率高于对照组,凋亡率低于对照组;共转染组HIF-1α蛋白表达、细胞迁移率、克隆形成率低于HIF-1α过表达组,凋亡率高于HIF-1α过表达组。结论 ：miR-7靶向HIF-1α可降低肝癌细胞迁移能力及干细胞特性,促进细胞凋亡,miR-7及HIF-1α可能是...     

抑制miR-133b通过靶向FOXP3对PD大鼠调节性T淋巴细胞、炎性反应和神经元凋亡的影响

目的探究抑制微小RNA(microRNA,miR)-133b通过靶向叉头盒蛋白3(forkhead box protein 3,FOXP3)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的影响。方法 32只PD模型大鼠随机分为PD组和PD+miR-133b antagomir组(n=16),健康大鼠16只作为对照组。尾静脉注射miR-133b antagomir(300μg)来抑制miR-133b的水平。检测和比较各组大鼠神经功能、黑质损伤、细胞凋亡、炎性反应、Treg细胞水平、miR-133b、FOXP3 mRNA和蛋白表达水平;通过双荧光素酶报告验证miR-133b和FOXP3的靶向关系。结果 PD组的逃避潜伏期、旋转速率、细胞凋亡情况、IL-6、miR-133b水平显著高于对照组,穿越次数、IL-10、FOXP3 mRNA和蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。PD+miR-133b antagomir组的逃避潜伏期、旋转速率、细胞凋亡情况、IL-6、miR-133b水平显著低于PD组,穿越次...     

1,25(OH)2D3干预糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1的变化

文题释义： 1,25(OH)₂D3：维生素D3是胆固醇的衍生物,其活性形式有25-羟维生素D3[25(OH)D3]和1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)₂D3]两种,其中1,25-二羟维生素D3活性更高。体内的维生素D3无生物活性,它首先在肝脏被25-羟化酶催化为具有一定生物活性的25(OH)D3,然后在肾近端小管1α-羟化酶的催化下生成活性更高的1,25(OH)₂D3,1,25(OH)₂D3在肾脏具有促进肾小管对钙、磷的重吸收,尿钙、磷排出量减少等方面作用。MicroRNA-130b：microRNA(miRNA)是一种内源性小分子RNA,由21-25个核苷酸组成,可通过与靶基因mRNA的3’UTR或者CDS序列配对,促进mRNA的降解或抑制其翻译,从而抑制靶基因的表达,其中MicroRNA-130b与多脏器的多种病变有关,在糖尿病的进程中MicroRNA-130b与早期肾脏损伤具有一定的关系,可能成为糖尿病患者早期肾脏损害以及肾脏损害严重程度的新的生物学标志。 背景：1,25(OH)₂D3在糖尿病肾病的发展过程中发挥着重要调节作用。 目的：探索1,25(OH)₂D3对糖尿病肾病大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1表达的影响作用。 方法：实验方案经新疆医科大学动物实验中心动物实验伦理委员会批准。将25只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组、糖尿病肾病+花生油组,后2组分别给予骨化三醇(即1,25(OH)₂D3,活性维生素D3) 0.03 μg/(kg • d)治疗、花生油对照处理。37 d后采集标本,以实时聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学方法检测大鼠肾脏组织转化生长因子β1的表达;RT-PCR检测MicroRNA-130b的表达;采用苏木精-伊红及Masson染色对大鼠肾脏形态结构及纤维化程度进行分析。 结果与结论：①RT-PCR结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组及糖尿病肾病+花生油组MicroRNA-130b的表达明显低于正常对照组(P < 0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组明显高于糖尿病肾病+花生油组(P < 0.01);②RT-PCR、Western blot、免疫组织化学及病理结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组及糖尿病肾病+花生油组转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达、大鼠肾脏组织结构紊乱及纤维化程度明显高于正常对照组(P < 0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组明显低于糖尿病肾病+花生油组(P < 0.01);③结果说明,糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b表达水平下降,转化生长因子β1 mRNA及蛋白表达水平升高,肾脏组织结构紊乱及纤维化程度严重;1,25(OH)₂D3可上调糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b的表达水平,同时还可下调糖尿病肾病大鼠肾脏转化生长因子β1的表达水平,改善肾脏组织结构紊乱及纤维化程度。ORCID: 0000-0002-5676-5016(刘玥彤) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Hepatitis B virus X protein boosts hepatocellular carcinoma progression by downregulating microRNA-137

BackgroundHepatocellular carcinoma (HCC) is a frequent diagnosed malignancy. microRNAs (miRs) are involved in various cellular processes during cancer development. This study attempted to probe the miR-based mechanism in hepatitis B virus X protein (HBx) small interfering RNA (siRNA)-treated HCC cells.MethodsHBx expression in hepatocyte and HCC cells was detected, and cells with highest HBx expression were screened out and transfected with HBx-siRNAs. Then the effect of HBx on HCC cell proliferation was detected. miRs differentially expressed in HBx-siRNA-transfected MHCC97H cells were analyzed and verified. miR-137 methylation was analyzed by bioinformatics, and miR-137 restoration was detected after Aza treatment. Furthermore, miR-137 methylation in MHCC97H cells with HBx knockdown or HBx overexpression was detected by methylation specific PCR. The targeting relationship between miR-137 and Notch1 was verified. Then the gain-and-loss functions of miR-137 or/and Notch1 were performed to estimate their roles in HCC cell proliferation. The effects of HBx-siRNA and overexpressed miR-137 in vivo were observed by tumor xenograft in nude mice and immunohistochemistry.ResultsHBx-siRNA weakened MHCC97H cell proliferation and tumor growth. miR-137 was highly expressed in HBx-siRNA-treated HCC cells and targeted Notch1. HBx knockdown decreased miR-137 methylation and restored miR-137 expression. miR-137 overexpression prevented HCC cell proliferation and tumor growth, while miR-137 downregulation reversed the repressing effects of HBx-siRNA on HCC cell proliferation. Inhibition of Notch1 reversed HCC cell proliferation induced by miR-137 downregulation.ConclusionOverexpression of miR-137 blocks HCC cell proliferation in HBx-siRNA-treated MHCC97H cells by targeting Notch1. This study may offer novel target for HCC treatment.     

MicroRNA-181d-5p通过PTEN参与睾丸支持细胞间紧密连接损伤

目的:探讨miR-181d-5p通过与人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源的基因(PTEN)mRNA 3'UTR区相互作用,参与小鼠睾丸支持细胞TM4细胞间紧密连接损伤及其可能机制.方法:通过网站预测miR-181d-5p的靶基因为PTEN mRNA,采用双荧光素酶报告基因分析实验在293T细胞上验证其与靶基因3...